公开(公告)号：CN103757115B

公开(公告)日：2016-01-20

申请号：CN201410022452.X

申请日：2014-01-17

Applicant: 上海市农业科学院

Inventor： 赵凯 ,  施伟 ,  赵笑 ,  任方方 ,  吴洋洋 ,  胡瑞丽 ,  唐雪明 ,  赵庆 ,  史斌 ,  赵桓震 ,  赵斌安 ,  杜亚楠 ,  宋美萱

IPC: C12Q1/68 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种基于多重微滴PCR偶联荧光分光光度法的生物基因定性、定量、高通量检测方法。首先，设计特异性引物并对其选择性地进行不同荧光基团标记，随后应用上述荧光标记的特异性引物进行微滴PCR扩增，扩增产物经纯化后，用荧光分光光度计或酶标仪来测量纯化后的PCR产物中各个发射波长和荧光值含量，达到自动检测的目的，可同时进行定性、定量和高通量检测。本发明方法可实现对大量目标DNA分子同时进行高通量的扩增和定性、定量和高通量检测。

公开(公告)号：CN104164510A

公开(公告)日：2014-11-26

申请号：CN201410410218.4

申请日：2014-08-20

Applicant: 上海市农业科学院 ,  上海科立特农产品检测技术服务有限公司

Inventor： 赵凯 ,  周昌艳 ,  任方方 ,  赵笑 ,  索玉娟 ,  吴洋洋 ,  邵毅 ,  胡瑞丽 ,  沈源源 ,  金晓芬 ,  史斌 ,  宋美萱

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/14 ,  C12Q1/10 ,  C12Q1/04

CPC classification number: Y02A50/451 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2537/143 ,  C12Q2565/125

Abstract: 本发明公开了一种利用多重PCR技术对食源性致病菌进行高通量快速检测的方法，依据四种主要的食源性致病菌沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增多性李斯特菌以及大肠杆菌O157：H7的保守区序列设计出适用于进行多重PCR的引物，用多重PCR技术检测农产品中的主要食源性致病菌，该检测方法特异性好，与8种相似菌种无交叉反应，扩增出的条带清晰，灵敏度也较高，检出限均可以达到103copies/ml，而且快速、方便。本发明设计的引物与多重PCR体系可制成适于快速检测食源性致病菌的试剂盒，利用此试剂盒可以大大地缩短时间，提高检测的效率。

公开(公告)号：CN103966333A

公开(公告)日：2014-08-06

申请号：CN201410215717.8

申请日：2014-05-20

Applicant: 上海市农业科学院

Inventor： 赵凯 ,  施伟 ,  赵笑 ,  唐雪明 ,  任方方 ,  吴洋洋 ,  胡瑞丽 ,  刘华 ,  史斌 ,  宋美萱 ,  赵斌安 ,  潘磊

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/686 ,  C12Q2537/143 ,  C12Q2563/159 ,  C12Q2565/125

Abstract: 本发明公开了一种多重微滴聚合酶链式反应的生物基因高通量定性检测方法，建立了一种改进的微滴PCR高通量的扩增技术，对该技术在实验仪器、实验方法和试剂方面进行了改进，优化了实验步骤，减少了一些实验环节，对试验中需要的仪器进行了国产化，使该方法更容易进行，大大减少了人力、物力和财力的需求，使得微滴PCR技术可为一般实验技术人员掌握，可在国内大多数生物实验室开展。实验结果清晰可靠，本发明方法可实现对大量目标DNA分子同时进行高通量的扩增来达到高通量定性检测的目的。