一种FGFR3突变体的重组表达载体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN105368861A

    公开(公告)日:2016-03-02

    申请号:CN201510819481.3

    申请日:2015-11-23

    Abstract: 本发明公开了一种FGFR3突变体的重组表达载体,它含有缺失外显子7、8和9的突变体FGFR3Δ7-9,所述突变体FGFR3Δ7-9缺失的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。此外,本发明还公开了该FGFR3突变体的重组表达载体的构建方法,包括如下步骤:(1)采用搭桥法扩增FGFR3突变体的DNA片断;(2)扩增产物凝胶电泳后行目的基因切胶回收;(3)PCR产物双酶切;(4)连接目的片段和载体片段。此外,本发明还公开了该FGFR3突变体的重组表达载体的应用。实验显示,该重组表达载体在鉴定FGF1/FGF2和FGFR3及其突变体的亲和力、鉴定FGFR3及其突变体形成二聚体的能力,以及鉴定FLAG-FGFR3 IIIc、FLAG-FGFR3 Δ7-9和FLAG-FGFR3 AT-I酪氨酸激酶区的激活中均具有良好的应用价值。

    一种FGFR3突变体的重组表达载体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN105368861B

    公开(公告)日:2018-11-09

    申请号:CN201510819481.3

    申请日:2015-11-23

    Abstract: 本发明公开了一种FGFR3突变体的重组表达载体,它含有缺失外显子7、8和9的突变体FGFR3Δ7‑9,所述突变体FGFR3Δ7‑9缺失的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。此外,本发明还公开了该FGFR3突变体的重组表达载体的构建方法,包括如下步骤:(1)采用搭桥法扩增FGFR3突变体的DNA片断;(2)扩增产物凝胶电泳后行目的基因切胶回收;(3)PCR产物双酶切;(4)连接目的片段和载体片段。此外,本发明还公开了该FGFR3突变体的重组表达载体的应用。实验显示,该重组表达载体在鉴定FGF1/FGF2和FGFR3及其突变体的亲和力、鉴定FGFR3及其突变体形成二聚体的能力,以及鉴定FLAG‑FGFR3 IIIc、FLAG‑FGFR3 Δ7‑9和FLAG‑FGFR3 AT‑I酪氨酸激酶区的激活中均具有良好的应用价值。

    一种三维多孔壳聚糖/明胶微球及其制备方法和在肝细胞培养中的应用

    公开(公告)号:CN102172498B

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201110025674.3

    申请日:2011-01-24

    Abstract: 本发明公开一种三维多孔壳聚糖/明胶微球及其制备方法和在肝细胞培养中的应用。其制备方法即将壳聚糖和明胶B混合后经过高压脉冲微胶囊成型仪滴入液氮快速冷冻成球,一次冻干后的微球用饱和的三聚磷酸盐-85%乙醇溶液交联固化后进行二次冻干,再将二次冻干所得的微球充分水化,加入交联剂碳二亚胺/N-羟基琥珀酰,用明胶A对微球进行修饰,水浴,避光反应后,洗去未反应的碳二亚胺/N-羟基琥珀酰和明胶A,再进行三次冻干后即得到直径在300-800um,表面孔径50-200um的三维多孔壳聚糖/明胶微球,且微球表面与内部孔径相连通。本发明所得的三维多孔壳聚糖/明胶微球可用于体外培养出高密度、高活性的肝细胞。

    一种大孔径胆红素吸附剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN102441364A

    公开(公告)日:2012-05-09

    申请号:CN201110299183.8

    申请日:2011-09-29

    Abstract: 本发明公开了一种大孔径胆红素吸附剂及其制备方法和应用。它是在壳聚糖单体与胺化剂乙二胺反应并保护游离胺基后加入交联剂戊二醛,在高压静电环境下喷入低温冻存器内快速成型。所得的大孔径胆红素吸附剂颗粒大小均一,直径约500μm,吸附剂颗粒表面以及内部孔径丰富、直径约40μm并且相互交通。本发明的大孔径胆红素吸附剂的原材料生物相容性好,冻干后三次洗涤,未见化学残基遗留,对胆红素的吸附作用增加,其制备过程吸附剂颗粒直径可调控。使用该吸附剂进行体外血浆灌洗或者共培养时,胺基、疏水作用以及静电作用可以有效地吸附胆红素;该吸附剂表面及内部丰富的孔径增大了滤过面积,提高了吸附效率。

    一种大孔径胆红素吸附剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN102441364B

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201110299183.8

    申请日:2011-09-29

    Abstract: 本发明公开了一种大孔径胆红素吸附剂及其制备方法和应用。它是在壳聚糖单体与胺化剂乙二胺反应并保护游离胺基后加入交联剂戊二醛,在高压静电环境下喷入低温冻存器内快速成型。所得的大孔径胆红素吸附剂颗粒大小均一,直径约500μm,吸附剂颗粒表面以及内部孔径丰富、直径约40μm并且相互交通。本发明的大孔径胆红素吸附剂的原材料生物相容性好,冻干后三次洗涤,未见化学残基遗留,对胆红素的吸附作用增加,其制备过程吸附剂颗粒直径可调控。使用该吸附剂进行体外血浆灌洗或者共培养时,胺基、疏水作用以及静电作用可以有效地吸附胆红素;该吸附剂表面及内部丰富的孔径增大了滤过面积,提高了吸附效率。

    离体肝脏灌注保存液
    9.
    发明公开

    公开(公告)号:CN101569302A

    公开(公告)日:2009-11-04

    申请号:CN200810036928.X

    申请日:2008-04-30

    Abstract: 本发明公开了一种离体肝脏灌注保存液,其中含有各种电解质、氨基酸、维生素以及氯化胆碱、葡萄糖、三磷酸腺苷、腺苷、血浆白蛋白、低分子右旋糖酐、红细胞、维拉帕米、地塞米松、谷胱甘肽、别嘌呤醇、乌司他丁、可溶性TNF-α及可溶性IL-I等组分。本发明保存液不仅可以提供充分的氧气,而且能提供充足的能量供给,从而可有效地应用于离体肝脏的0~4℃保存,具有生产成本低、黏滞度适当、灌注保存时间较长、对肝脏损害小和并发症少的特点;还可以防止低温导致的缺血性损伤、细胞水肿及其继发损伤,提高移植物在宿主内的存活率;此外,可以有效降低器官移植过程中的宿主抗移植物和移植物抗宿主反应,延长移植物的存活时间。

    细胞冷冻装置
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN101085979A

    公开(公告)日:2007-12-12

    申请号:CN200710042638.1

    申请日:2007-06-26

    Abstract: 本发明涉及一种细胞冷冻装置,包括置于低温箱的样品架上的控温管和温度测控装置,其特点是:控温管由铜管,绝缘层,电加热丝组成,其中铜管套置在样品管上,铜管外覆盖一层绝缘层,绝缘层上面绕有电加热丝;温度测控装置由温度数据采集器和温度控制装置组成,其中温度数据采集器包括控温管,热电偶,热电偶插在控温管内,热电偶的热电信号经过温度控制装置后对电加热丝进行控制。该装置能解决生物细胞降温和复温控制的技术问题,具有样品温度的均匀性高,具备有效复温控制装置,反应及时迅速、适合于各种冷源环境下降温、小巧、造价低廉、操作方便等特点,可广泛用于各种生物材料低温保存的程序降温与复温。

Patent Agency Ranking