一种FGFR3突变体的重组表达载体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN105368861B

    公开(公告)日:2018-11-09

    申请号:CN201510819481.3

    申请日:2015-11-23

    Abstract: 本发明公开了一种FGFR3突变体的重组表达载体,它含有缺失外显子7、8和9的突变体FGFR3Δ7‑9,所述突变体FGFR3Δ7‑9缺失的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。此外,本发明还公开了该FGFR3突变体的重组表达载体的构建方法,包括如下步骤:(1)采用搭桥法扩增FGFR3突变体的DNA片断;(2)扩增产物凝胶电泳后行目的基因切胶回收;(3)PCR产物双酶切;(4)连接目的片段和载体片段。此外,本发明还公开了该FGFR3突变体的重组表达载体的应用。实验显示,该重组表达载体在鉴定FGF1/FGF2和FGFR3及其突变体的亲和力、鉴定FGFR3及其突变体形成二聚体的能力,以及鉴定FLAG‑FGFR3 IIIc、FLAG‑FGFR3 Δ7‑9和FLAG‑FGFR3 AT‑I酪氨酸激酶区的激活中均具有良好的应用价值。

    一种FGFR3突变体的重组表达载体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN105368861A

    公开(公告)日:2016-03-02

    申请号:CN201510819481.3

    申请日:2015-11-23

    Abstract: 本发明公开了一种FGFR3突变体的重组表达载体,它含有缺失外显子7、8和9的突变体FGFR3Δ7-9,所述突变体FGFR3Δ7-9缺失的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。此外,本发明还公开了该FGFR3突变体的重组表达载体的构建方法,包括如下步骤:(1)采用搭桥法扩增FGFR3突变体的DNA片断;(2)扩增产物凝胶电泳后行目的基因切胶回收;(3)PCR产物双酶切;(4)连接目的片段和载体片段。此外,本发明还公开了该FGFR3突变体的重组表达载体的应用。实验显示,该重组表达载体在鉴定FGF1/FGF2和FGFR3及其突变体的亲和力、鉴定FGFR3及其突变体形成二聚体的能力,以及鉴定FLAG-FGFR3 IIIc、FLAG-FGFR3 Δ7-9和FLAG-FGFR3 AT-I酪氨酸激酶区的激活中均具有良好的应用价值。

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