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公开(公告)号：CN115856315A
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202211459636.3
申请日：2022-11-17
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种基于适配体探针的单细胞免疫印迹检测方法，涉及蛋白质检测领域，所述方法使用适配体作为样品检测探针，代替了使用抗体作为探针的传统检测方法，适配体探针体积仅1‑15kDa，扩散快，探针孵育时间更短，成像速度快，节省实验时间，降低人力时间成本，并且具有更高的表位结合密度、更好的表位识别能力和更好的结构识别能力以特异性靶标目标蛋白，可提高目标蛋白质的检测灵敏度，小体积的检测探针更易洗脱多余探针，降低检测背景荧光，易于合成和修饰，价格低廉，免疫原性低。
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公开(公告)号：CN115754302A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202211439586.2
申请日：2022-11-17
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种基于可淬灭适配体探针的单细胞免疫印迹方法，涉及单细胞蛋白质检测技术领域。包括如下步骤：S1将单细胞悬液样本沉降在复合水凝胶芯片上的微孔阵列中；S2将复合水凝胶芯片放入电泳槽，然后缓缓倒入裂解液，孵育裂解；S3细胞裂解后，在芯片两端施加电场，蛋白在电场的作用下进入芯片表面的凝胶涂层中开始电泳分离；S4凝胶电泳结束后，将芯片放置于紫外灯下曝光，待曝光结束后，取出胶；S5将胶置于靶向结合目标蛋白的适配体探针溶液中，浸泡染色，在激光共聚焦荧光显微镜下，测定目标蛋白分子的荧光信号强度。本发明可提高目标蛋白的检测灵敏度，成像速度快。
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公开(公告)号：CN112920174A
公开(公告)日：2021-06-08
申请号：CN202110143602.2
申请日：2021-02-02
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07D405/04 , G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种光敏感型化合物及其制备方法和应用，涉及蛋白质核酸共固定技术领域，光敏感型化合物是一种聚丙烯酰胺化合物，包括四唑基团和呋喃基团；由N‑(3‑氨基丙基)氨基甲酸叔丁酯、甲基丙烯酰氯呋喃‑2‑基硼酸和[羟基(苯基)‑λ3‑碘基]4‑甲基苯磺酸盐等原料制备而成；可制成蛋白质核酸共固定电泳凝胶，定量或半定量检测单细胞或多细胞中蛋白质与核酸；还可以用于微芯片电泳迁移率分析、蛋白免疫印迹、核酸印迹杂交、单细胞蛋白免疫印迹、单细胞northern/southern印迹杂交或毛细管电泳蛋白免疫印迹。本发明的蛋白质核酸共固定凝胶可同时原位固定蛋白质与核酸来研究蛋白质与DNA相互作用。
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公开(公告)号：CN106970132B
公开(公告)日：2019-02-22
申请号：CN201610021350.5
申请日：2016-01-13
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种测定过氧化物酶活性的电泳滴定方法，所述方法包括：将芯片的通道部分灌满凝胶，阳极池中注入盐酸溶液与背景电解质溶液的混合溶液a，阴极池中注入化学发光底液与背景电解质溶液的混合溶液b；将过氧化物酶溶液注入阴极池中，使之催化化学发光底液反应生成激发态鲁米诺阴离子L*；酶催化反应稳定后，施加电场，使阴极池中生成的激发态鲁米诺阴离子L*与阳极池中的氢离子H+形成MRB,生成的MRB移向阳极；根据MRB移动速率与过氧化物酶活性存在的函数关系，测得过氧化物酶活性指标。本发明的方法能够有效地对过氧化物酶的各项酶学指标进行快速测定，并且无需复杂光学检测设备。
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公开(公告)号：CN113617403A
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN202110895748.2
申请日：2021-08-05
Applicant: 上海交通大学
IPC: B01L3/00 , G01N27/447 , G01N33/53
Abstract: 本发明公开了一种新型单细胞western blot的微流控芯片，涉及生物技术领域，微流控芯片包括：边梁、整流柱、导流三角、细胞捕获栏、基板；基于单缝微阱单细胞捕获结构，包括可分离的滑动芯片结构，微流控芯片的主体为开放式结构，上方覆盖一层透明玻璃，形成闭合微流控通道。本发明既有闭合微流控通道的高细胞捕获率优势，又兼容单细胞western原有的开放式的蛋白质电泳。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113358875A
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN202110441094.6
申请日：2021-04-23
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/531 , G01N21/33 , G01N21/35
Abstract: 本发明提供了一种孔径可控的复合型聚丙烯酰胺凝胶及其制备方法。本发明第一方面提供了一种孔径可控的复合型聚丙烯酰胺凝胶的制备方法，包括如下步骤：将氧化石墨烯、丙烯酸、二氯亚砜、对苯二酚和三乙胺混合，并在保护气体氛围下合成丙烯酸功能化石墨烯；将丙烯酸功能化石墨烯溶于二甲基甲酰胺中，得到功能化石墨烯的二甲基甲酰胺溶液；将功能化石墨烯的二甲基甲酰胺溶液、丙烯酰胺、N‑异丙基丙烯酰胺水溶液、Tris‑HCl、SDS、TritonX‑100、光敏化合物MAP‑mPyTC以及APS和TEMED混合得到复合型聚丙烯酰胺凝胶。根据本发明提供的制备方法制备得到的复合型聚丙烯酰胺凝胶，可根据温度调控其尺寸，并且凝胶尺寸调控可逆，所需变化时间短。
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公开(公告)号：CN106970132A
公开(公告)日：2017-07-21
申请号：CN201610021350.5
申请日：2016-01-13
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N27/447
CPC classification number: G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种测定过氧化物酶活性的电泳滴定方法，所述方法包括：将芯片的通道部分灌满凝胶，阳极池中注入盐酸溶液与背景电解质溶液的混合溶液a，阴极池中注入化学发光底液与背景电解质溶液的混合溶液b；将过氧化物酶溶液注入阴极池中，使之催化化学发光底液反应生成激发态鲁米诺阴离子L*；酶催化反应稳定后，施加电场，使阴极池中生成的激发态鲁米诺阴离子L*与阳极池中的氢离子H+形成MRB,生成的MRB移向阳极；根据MRB移动速率与过氧化物酶活性存在的函数关系，测得过氧化物酶活性指标。本发明的方法能够有效地对过氧化物酶的各项酶学指标进行快速测定，并且无需复杂光学检测设备。
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公开(公告)号：CN117805309A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202410014807.4
申请日：2024-01-04
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种活细胞内无膜细胞器蛋白质组学的质谱鉴定方法，使用邻近标记酶即PL酶对液‑液相分离液滴即LLPS液滴中的目的蛋白进行标记，具体使用邻位标记技术，使用过氧化物酶进行生物素标记，可以对液液相分离液滴中蛋白质进行短时间快速稳定的标记，本发明使用链霉亲和素磁珠富集蛋白质，由于标签是生物素标签，天然具有和链酶亲和素的结合能力，能够快速有效的从细胞裂解液中分离发生了液液相分离的蛋白质。
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公开(公告)号：CN115558708A
公开(公告)日：2023-01-03
申请号：CN202211403976.4
申请日：2022-11-10
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/6844 , C08F220/60 , C08F220/56 , C08F222/38
Abstract: 本发明公开了一种基于光敏凝胶的痕量核酸检测方法，涉及核酸检测技术领域。包括如下步骤：S1：根据目标基因的核酸序列设计合成核酸探针和扩增引物；S2：将待测样品滴加到表面覆盖有光敏凝胶的芯片模板上，进行电泳，电泳结束后，通过UV交联固定蛋白质和/或核酸；S3：以DNA为模板，利用扩增引物进行滚环扩增，得到扩增的线性DNA序列；S4：向扩增的线性DNA序列中加入末端带有标记抗体的核酸探针，通过核酸探针特异性结合线性DNA序列，产生用于检测的局部特异性信号，通过观察荧光信号实现痕量核酸检测。本发明是光敏凝胶固定核酸强力高效，固定稳固，不会影响DNA的活性，不影响探针的互补配对，可显著提升原方法的灵敏度，且检测效率高，较为经济。
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公开(公告)号：CN112964881B
公开(公告)日：2022-12-06
申请号：CN202110244958.5
申请日：2021-03-05
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/543 , G01N21/31 , G01N21/64 , G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种高通量高灵敏度的单细胞转染蛋白质分析芯片，涉及微芯片分析平台领域，所述芯片由载体与光敏感型蛋白质固定凝胶涂层组成，其中所述涂层由疏水隔带分隔为一个以上的检测区域，所述检测区域中设置细胞阱。本发明选用四氮唑为光敏基团的聚丙烯酰胺凝胶作为光敏感型蛋白质固定凝胶，易通过紫外光照与蛋白质交联，对低丰度蛋白质具有灵敏、精准的检测效果，可以真正实现对转染单细胞及稀有细胞的基因表达检测；且区域化的微芯片设计，可以实现多靶点、多目标的同时检测，对外源基因表达的分析及转染条件的评估研究具有重要意义。
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