公开(公告)号：CN115856315A

公开(公告)日：2023-03-28

申请号：CN202211459636.3

申请日：2022-11-17

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 丁显廷 ,  谢海洋 ,  徐丽

IPC: G01N33/68 ,  G01N21/64 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种基于适配体探针的单细胞免疫印迹检测方法，涉及蛋白质检测领域，所述方法使用适配体作为样品检测探针，代替了使用抗体作为探针的传统检测方法，适配体探针体积仅1‑15kDa，扩散快，探针孵育时间更短，成像速度快，节省实验时间，降低人力时间成本，并且具有更高的表位结合密度、更好的表位识别能力和更好的结构识别能力以特异性靶标目标蛋白，可提高目标蛋白质的检测灵敏度，小体积的检测探针更易洗脱多余探针，降低检测背景荧光，易于合成和修饰，价格低廉，免疫原性低。

公开(公告)号：CN115754302A

公开(公告)日：2023-03-07

申请号：CN202211439586.2

申请日：2022-11-17

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 丁显廷 ,  徐丽 ,  谢海洋

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/53 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种基于可淬灭适配体探针的单细胞免疫印迹方法，涉及单细胞蛋白质检测技术领域。包括如下步骤：S1将单细胞悬液样本沉降在复合水凝胶芯片上的微孔阵列中；S2将复合水凝胶芯片放入电泳槽，然后缓缓倒入裂解液，孵育裂解；S3细胞裂解后，在芯片两端施加电场，蛋白在电场的作用下进入芯片表面的凝胶涂层中开始电泳分离；S4凝胶电泳结束后，将芯片放置于紫外灯下曝光，待曝光结束后，取出胶；S5将胶置于靶向结合目标蛋白的适配体探针溶液中，浸泡染色，在激光共聚焦荧光显微镜下，测定目标蛋白分子的荧光信号强度。本发明可提高目标蛋白的检测灵敏度，成像速度快。