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公开(公告)号：CN119061093A
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202411409620.0
申请日：2024-10-10
Applicant: 江南大学 , 山东焦点福瑞达生物股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种利用全细胞催化技术制备低分子透明质酸寡糖的方法，其特征在于，包括：制备全细胞催化酶液，酶解反应，后处理；所述制备全细胞催化酶液，将重组大肠杆菌菌泥按加入重悬Buffer进行菌泥重悬，得到全细胞催化酶液；所述酶解反应，将纯水加热至36‑38℃，加入全细胞催化酶液、透明质酸钠底物，在密封条件下，在36‑38℃下进行酶解反应，得到酶解液；本发明的方法无需进行菌体破碎，无需进行层析纯化，发酵周期短，制备工艺简单，成本较低，适合大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN118581053A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410635546.8
申请日：2024-05-22
Applicant: 江苏集萃未来食品技术研究所有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酶活性提高的谷胱甘肽双功能合成酶突变体及应用，属于基因工程和发酵工程技术领域。所述谷胱甘肽双功能合成酶突变体将136位亮氨酸突变为赖氨酸，并将498位缬氨酸突变为半胱氨酸，得到了酶活提高的突变体L136K/V498C，其比酶活较亲本提高了86.80％，在37℃半衰期为134min，其相对热稳定性较亲本提高了40.95％，说明该突变体的酶活和热稳定性得到大大提升；所述突变体L136K/V498C全细胞催化合成谷胱甘肽产量为24.17mM。本申请提供的酶突变体，在生产谷胱甘肽以及构建生产谷胱甘肽的基因工程微生物中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN118440939A
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202410523410.8
申请日：2024-04-28
Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 , 江南大学 , 国药赛诺根生物科学(北京)有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12P19/30 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开一种启动子突变体及其应用。本发明基于启动子PsrfA，通过对其核心区域以及两核心区域的间隔序列进行突变，获得了诱导表达活性较野生型提高的PsrfA启动子突变体，同时还提供了含所述启动子突变体的载体。利用本发明所述启动子突变体或所述载体，可提高所表达的蛋白的表达量，在蛋白表达领域具有广阔应用前景。同时，在所述启动子突变体的基础上，本发明还提供了一种NADH焦磷酸酶表达量提高的重组质粒和重组菌，可将其用于还原型烟酰胺单核苷酸的生物催化反应中，有利于还原型烟酰胺单核苷酸的大规模高效生产。
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公开(公告)号：CN114075556B
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202111395664.9
申请日：2021-11-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种可羟基化维生素D3C‑1和C‑25的P450酶及其基因、表达载体、重组菌与应用，本发明的P450维生素D3羟化酶CYP109A2‑H和重组菌及应用，与现有技术相比，本发明的P450维生素D3羟化酶CYP109A2‑H，经与已报道来源于DSM319的CYP109A2氨基酸序列比对，同源性为95.53％；本发明的P450酶能够在枯草芽孢杆菌中高效表达，且重组菌能够在37℃转化维生素D3为25(OH)VD3和1α，25(OH)2VD3，转化率达87.64％，25(OH)VD3和1α，25(OH)2VD3产量分别为7.78mg/L和10.62mg/L，产物中1α，25(OH)2VD3产量高于25(OH)VD3，产物的生物活性高，对于活性羟基维生素D3的生产具有重要作用。
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公开(公告)号：CN116286764A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310217653.4
申请日：2023-03-08
Applicant: 江南大学 , 山东焦点福瑞达生物股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种透明质酸裂解酶及其重组菌与应用。本发明提供了一种来源于弗氏柠檬酸杆菌的透明质酸裂解酶，克隆了其编码基因并在大肠杆菌体系实现了重组表达，经过启动子优化后酶活为2.64×104U/mL，蛋白分子量为87kDa。酶学性质表征实验表明其为内切酶，能够在pH 5‑8范围内发挥透明质酸降解作用，最适反应pH为5.5，最适反应温度为37℃。该酶具有良好的热稳定性，pH稳定性与耐盐性，可以耐受1.5M的氯化钠溶液。该酶对透明质酸有着较高的底物特异性。本发明利用优化的培养基，在5‑L发酵罐中，重组菌产透明质酸裂解酶的最高活性在14h可达2.65×106U/mL。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114574469B
公开(公告)日：2023-06-02
申请号：CN202210298614.7
申请日：2022-03-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于定向进化改造的角蛋白酶突变体及其应用，本发明提供了一种基于易错PCR技术，定向进化获得高酶活突变体的方法。本发明共获得了9个酶活提高的突变体，其中突变体T8(R72S/F107Y/N291S/N295D)的酶活水平最高，为2382U/mL，是对照菌酶活的2.1倍。采用培养基组分优化及7L发酵罐扩大培养的发酵研究策略，实现了突变菌产酶量的提升，角蛋白酶活力可达8448U/mL，本发明为角蛋白酶的高效表达及产酶研究提供了一种有效的策略。采用角蛋白酶与胰蛋白酶复配降解角蛋白废弃物，探究酶解法的最佳条件，为实际生产中高效利用羽毛、提高蛋白利用率提供了理论基础。
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公开(公告)号：CN111763676B
公开(公告)日：2022-10-04
申请号：CN202010700315.2
申请日：2018-08-16
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12N9/50 , C12R1/125 , C12R1/085 , C12R1/10 , C12R1/11 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种提高角蛋白酶异源表达酶活的启动子及其应用，属于工业生物技术领域。本发明成功构建了携带16种不同启动子序列的角蛋白酶重组菌，其中7种能够提高角蛋白酶表达量，PaprE启动子改造重组菌的酶活水平最高，达到2605U/mL，相比对照菌提高20倍。在5L发酵罐上发酵液中角蛋白酶活力高达7176U/mL，是目前文献报道重组角蛋白酶表达的最高水平，能更好地服务于实际应用。本发明为角蛋白酶的高效表达及产酶研究提供了一种有效策略。传统基因工程改造通常需构建高通量筛选方法，进行大量文库筛选，工作量大、周期长、成本高，该改造方法相比传统方法极大的减小了工作量，提高了高表达效率。
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公开(公告)号：CN114920826A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210685024.X
申请日：2022-06-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种III型类人胶原蛋白及其编码基因、表达载体和重组酵母菌，本发明在保持人源Ⅲ型胶原蛋白的Gly‑X‑Y基本骨架基础上对其进行改造，提供一种亲水性较好的Ⅲ型类人胶原蛋白(hlCOLⅢ)，该Ⅲ型类人胶原蛋白能够在毕赤酵母中可溶性分泌表达，并进一步通过启动子改造、高拷贝菌株筛选、发酵优化及高密度发酵等技术实现hlCOLⅢ的高产。
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公开(公告)号：CN106895687B
公开(公告)日：2022-06-28
申请号：CN201710221221.5
申请日：2017-04-06
Applicant: 扬州日兴生物科技股份有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种氨糖制备用的干燥系统，包括喷雾干燥塔、喷雾管、进风管道、风机、加热装置、旋风分离器和除尘器；所述喷雾干燥塔的夹层内具有螺旋冷却管，喷雾干燥塔内侧壁的内侧面还固定有上圆环部和下圆环部，上、下圆环部之间连接有多个圆环柱形管，上圆环部具有腔室，腔室通过第三管路与第一管路连通，第三管路上具有第一阀门，每个圆环柱形管的顶端开口均与腔室连通，圆环柱形管的侧壁具有多个出气通孔。本发明的干燥系统，喷雾干燥塔能够防粘壁，干燥效果好。
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公开(公告)号：CN110904004B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN201911237743.X
申请日：2019-12-05
Applicant: 江苏博扬生物制品有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株产海藻糖水解酶的细菌C1及其选育方法和应用，该产海藻糖水解酶菌C1，经鉴定为神户肠杆菌(Enterobacter kobei)，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2019年3月25日，保藏编号为CGMCC No.17444。本发明首次筛选到一株可产生海藻糖酶的神户肠杆菌C1，可以有效地大量生产海藻糖水解酶，以5％终浓度的海藻糖为底物测得该菌株全细胞酶活可达到31.18U/mL。该酶的最适温度和pH分别为35℃和pH5.0，在pH偏酸性条件下该酶仍表现出较高酶活和稳定性，在工业和医学领域具有较好的应用价值。
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