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公开(公告)号：CN104762242A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201410001181.X
申请日：2014-01-02
Applicant: 清华大学
CPC classification number: C12N9/0006 , C12N9/1025 , C12P7/42 , C12Y101/01034 , C12Y203/0301
Abstract: 本文涉及一种甲羟戊酸的生产菌以及生产甲羟戊酸的方法。具体来说涉及一种用于以甲醇为原料生产甲羟戊酸的细菌，其中所述细菌属于甲基杆菌属(Methylobacterium)，并且所述细菌经过修饰以表达HMG-CoA合成酶(HMGS)和HMG-CoA还原酶(HMGR)。本文还涉及利用该表达HMG-CoA合成酶(HMGS)和HMG-CoA还原酶(HMGR)的甲基杆菌属(Methylobacterium)的细菌来生产甲羟戊酸的方法。
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公开(公告)号：CN101942025B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201010259913.7
申请日：2010-08-20
Applicant: 清华大学 , 北京思清源生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种肝素酶III融合蛋白及其编码基因与表达方法。本发明提供的融合蛋白(命名为MBP-HepC)，是如下a)或b)的蛋白：a)序列表中序列2的第1-1028所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)在序列表中序列2的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有肝素酶III活性的由a)衍生的蛋白质。上述蛋白的编码基因也属于本发明的保护范围之内。将上述基因导入重组大肠杆菌中表达的蛋白肝素酶酶活可达1776.3IU/L发酵液，表达量可达240mg/L发酵液，比酶活可达7.39IU/mg。本发明还可通过亲和分离实现了该融合蛋白的一步纯化。
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公开(公告)号：CN101942024B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201010259905.2
申请日：2010-08-20
Applicant: 清华大学 , 北京思清源生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种肝素酶II融合蛋白及其编码基因与表达方法。本发明提供的融合蛋白(命名为MBP-HepB)，是如下a)或b)的蛋白：a)序列表中序列2的第1-1118所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)在序列表中序列2的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有肝素酶活性的由a)衍生的蛋白质。上述蛋白的编码基因也属于本发明的保护范围之内。将上述基因导入重组大肠杆菌中表达的蛋白肝素酶酶活可达118.4IU/L发酵液，表达量可达179mg/L发酵液，比酶活可达0.66IU/mg。本发明还可通过亲和分离实现了该融合蛋白的一步纯化。
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公开(公告)号：CN101608194B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN200810115176.6
申请日：2008-06-18
Applicant: 清华大学
CPC classification number: Y02E50/343
Abstract: 本发明公开了一种降解木质纤维生物质的方法。该方法是对待降解的木质纤维生物质进行蒸汽爆破处理，向得到的蒸汽爆破处理物中接入厌氧污泥进行厌氧发酵。降解过程改变了木质素和纤维素、半纤维素的空间结构，并将大部分可利用糖都被降解出来。而且，降解得到的糖有较少的抑制物产生，非常有利于下一步生物燃料的生物转化生成，在工业上有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN101608179B
公开(公告)日：2011-05-18
申请号：CN200910090167.0
申请日：2009-07-29
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种融合肝素酶。该融合肝素酶是如下a)或b)的蛋白：a)序列表中序列1的第8-1016所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)在序列表中序列1的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有肝素酶活性的由a)衍生的蛋白质。上述蛋白的编码基因也属于本发明的保护范围之内。本发明产生的三重融合蛋白的酶活通过摇瓶培养可达723.1IU/L培养基，比酶活可达1.548IU/mg蛋白。本发明可以利用GFP蛋白实现菌体浓度和酶活的快速在线检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101638632B
公开(公告)日：2011-04-27
申请号：CN200910092358.0
申请日：2009-09-07
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种甲烷氧化混合菌的保存方法。本发明提供的甲烷氧化混合菌的保存方法，包括如下步骤：将甲烷氧化混合菌加入NMS培养基中，于密封瓶中2-6℃保存；初始时，所述密封瓶中，NMS培养基、甲烷和空气的体积比为(5-30)∶(5-40)∶(30-80)。本发明提供的方法没有引入其他碳源，可以稳定地保持混合菌群的结构和功能，并且操作方便，可以快速启动。将在甲烷氧化混合菌的保存及其工业化应用中发挥巨大作用，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN101942025A
公开(公告)日：2011-01-12
申请号：CN201010259913.7
申请日：2010-08-20
Applicant: 清华大学 , 北京思清源生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种肝素酶III融合蛋白及其编码基因与表达方法。本发明提供的融合蛋白(命名为MBP-HepC)，是如下a)或b)的蛋白：a)序列表中序列2的第1-1028所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)在序列表中序列2的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有肝素酶III活性的由a)衍生的蛋白质。上述蛋白的编码基因也属于本发明的保护范围之内。将上述基因导入重组大肠杆菌中表达的蛋白肝素酶酶活可达1776.3IU/L发酵液，表达量可达240mg/L发酵液，比酶活可达7.39IU/mg。本发明还可通过亲和分离实现了该融合蛋白的一步纯化。
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公开(公告)号：CN101319219B
公开(公告)日：2010-12-01
申请号：CN200810116601.3
申请日：2008-07-11
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种生产脱氧紫色杆菌素的方法及其专用重组菌。该方法是将脱氧紫色杆菌素合成相关基因簇导入大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RIL中获得的重组菌，该重组菌以色氨酸为底物发酵生产脱氧紫色杆菌素。其中，脱氧紫色杆菌素合成相关基因簇，是将由VioA、VioB、VioC、VioD和VioE组成的紫色杆菌素合成基因簇中的VioD基因敲除，获得重组基因簇。所述重组菌是将所述的基因簇导入大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RIL中获得的产脱氧紫色杆菌素的重组菌。本发明生产脱氧紫色杆菌素的方法产率较高，可以达到0.17g/L发酵液，且提取方便，分离纯化简单。
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公开(公告)号：CN101670238A
公开(公告)日：2010-03-17
申请号：CN200910092346.8
申请日：2009-09-07
Applicant: 清华大学
CPC classification number: Y02A50/2358 , Y02P20/59
Abstract: 本发明公开了一种去除环境中甲烷的方法。本发明提供的方法包括如下步骤：1)采集煤矿或垃圾填埋场的土样；2)将步骤1)的土样加入NMS培养基中，于密封瓶中培养；初始时，所述密封瓶中，NMS培养基、甲烷和空气的体积比为(5-30)∶(5-40)∶(30-80)；每24-72小时向密封瓶中置换入甲烷，使所述密封瓶中，NMS培养基、甲烷和空气的体积比为(5-30)∶(5-40)∶(30-80)；3)每8-12天接种步骤2)的培养液至新的NMS培养基，进行传代；步骤2)的培养液与NMS培养基的体积比为(5-15)∶(95-85)；传至10代以上，得到甲烷氧化混合菌；4)培养步骤3)得到的甲烷氧化混合菌，从而去除环境中的甲烷。本发明中所提供的去除甲烷的方法操作简单，去除甲烷的能力强，应用范围广。本发明对于煤矿瓦斯气体去除和垃圾填埋场填埋气减排等有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN101638632A
公开(公告)日：2010-02-03
申请号：CN200910092358.0
申请日：2009-09-07
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种甲烷氧化混合菌的保存方法。本发明提供的甲烷氧化混合菌的保存方法，包括如下步骤：将甲烷氧化混合菌加入NMS培养基中，于密封瓶中2-6℃保存；初始时，所述密封瓶中，NMS培养基、甲烷和空气的体积比为(5-30)∶(5-40)∶(30-80)。本发明提供的方法没有引入其他碳源，可以稳定地保持混合菌群的结构和功能，并且操作方便，可以快速启动。将在甲烷氧化混合菌的保存及其工业化应用中发挥巨大作用，应用前景广阔。
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