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公开(公告)号：CN112680477A
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN202011629470.6
申请日：2020-12-30
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于生物领域，公开了一种基于无缝克隆技术的H9N2亚型禽流感病毒的拯救方法，包括如下步骤：步骤1：提取H9N2亚型禽流感病毒的RNA，并根据RNA获得病毒的cDNA；步骤2：以cDNA为模板采用8对引物扩增得到H9N2亚型禽流感病毒8个片段的PCR产物；步骤3：将PHW2000质粒进行酶切得到线性化片段；步骤4：将H9N2亚型禽流感病毒8个片段的PCR产物分别与线性化的PHW2000载体进行同源重组得到8种重组质粒；步骤5：将8种重组质粒共同转染293T及MDCK混合培养细胞，得到重组的H9N2病毒；其中，8对引物的序列分别为如序列表SEQ ID NO：2至SEQ ID NO：17所示。该方法的优势在于：操作简单、重组精确、拯救效率高。
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公开(公告)号：CN111621596A
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN202010374676.2
申请日：2020-05-06
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于病毒检测技术领域，具体涉及一种猪圆环病毒3型实时荧光定量PCR检测引物探针组、试剂盒及方法。本发明首次通过在PCV3 cap蛋白上设计引物增强了检测的准确性；该检测方法实现了全闭管式操作，减少了假阳性现象的出现，同时TaqMan探针技术的高特异性和光谱技术的高敏感性既克服了常规PCR技术只能实现定性检测的不足，又解决了SYBR Green法特异性不强等缺点，更加适应临床检测；该方法灵敏度高，特异性和重复性较好，最低检测下限为11.8拷贝/μL，与其他荧光定量PCR检测方法相比检测更灵敏。
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公开(公告)号：CN111073841A
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN201911163531.1
申请日：2019-11-25
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种可有效表达外源蛋白的棒状杆菌ATCC 13032改良菌种，其特征在于，所述改良菌种为谷氨酸棒状杆菌ATCC 13032的基础上敲除谷氨酸棒状杆菌ATCC 13032中的cglIM基因、前噬菌体基因组得到的菌种。该改良菌种通过敲除前噬菌体基因、敲除限制性酶修饰系统基因使之能有效地表达外源蛋白。同时，本发明还公开了该改良菌种的构建方法。
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公开(公告)号：CN110128545A
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201910321941.8
申请日：2019-04-22
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/81 , A61K39/295 , A61K39/235 , A61K39/145 , A61P31/16 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于兽用生物制品技术领域，公开了一种融合基因，碱基序列如序列表SEQ ID NO：1所示；该融合基因采用禽流感H9亚型HA基因、腺病毒4型fiber2基因、特异性连接肽片段基因进行融合，该基因对应的表达蛋白抗原能够诱导家禽产生高水平的特异性抗体，保护家禽免受禽流感和禽腺病毒的感染，同时，本发明还公开了一种重组表达载体、抗原及其制备方法和应用。
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公开(公告)号：CN109966484A
公开(公告)日：2019-07-05
申请号：CN201910331019.7
申请日：2019-04-23
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: A61K39/39 , A61K39/145 , A61P31/16 , A61P37/04
Abstract: 本发明属于兽用生物制品技术领域，公开了一种免疫增强剂，包括囊素五肽和黄芪多糖；所述的囊素五肽和黄芪多糖的重量比为1:5～1:20；该免疫增强剂能够有效的提高疫苗免疫的抗体滴度表达水平。并且该免疫增强剂制备简单，工业应用前景好，同时，本发明还公开了该免疫增强剂的制备方法、采用该免疫增强剂的禽流感疫苗和在禽流感疫苗方面的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108300704A
公开(公告)日：2018-07-20
申请号：CN201810129825.1
申请日：2018-02-08
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种用传代细胞系悬浮培养传染性支气管炎病毒的方法，包括：步骤1：取EB66细胞进行复苏与传代培养；步骤2：对步骤1所得EB66细胞进行鸡传染性支气管炎病毒的接种培养；步骤3：接毒后的EB66细胞每隔6-12h进行取样，测定病毒的EID50，在病毒EID50达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的鸡传染性支气管炎病毒。本发明采用EB66细胞作为鸡传染性支气管炎病毒的培养基质，利用提供用全悬浮传代细胞系EB66细胞进行高效的病毒生产，有效提高支气管炎病毒的培育滴度，从而为实现鸡传染性支气管炎病毒疫苗的大规模培养，降低病毒的培育成本。
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公开(公告)号：CN108220227A
公开(公告)日：2018-06-29
申请号：CN201711439182.2
申请日：2017-12-27
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
Abstract: 一种通过全悬浮传代细胞系悬浮培养新城疫病毒的方法，所述方法如下：取生长密度为8×106细胞/mL‑16×106细胞/mL的全悬浮EB66细胞系通过二阶培养法进行新城疫病毒的接种，接毒后继续培养，并每隔12h取样，以测定病毒的EID50，在病毒的滴度最高时收获病毒并保存，完成新城疫病毒的培养。本发明通过采用鸭胚胎干细胞EB66传代细胞系进行鸡新城疫病毒培养，有效提高所得到病毒的滴度及纯度，进而使生产出的疫苗具有较高品质，并降低生产成本。
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公开(公告)号：CN119193645A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411360740.6
申请日：2024-09-27
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明涉及兽用生物制品领域，公开了一种禽致病性大肠杆菌基因缺失株的构建方法，先根据NCBI网站上公布的hfq基因序列设计引物组，所述引物组包括上游引物hfq‑kan‑F、下游引物hfq‑kan‑R，所述上游引物hfq‑kan‑F的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述下游引物hfq‑kan‑R的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，再通过Red重组技术以pKD4质粒为模板结合步骤1得到的引物组得到用于敲除hfq基因的打靶DNA片段；随后将打靶DNA片段导入禽致病性大肠杆菌内，并依次置于含卡那霉素、含氨苄霉素的培养基中培养，培养后挑选同时不具有氨苄霉素、卡那霉素的转换子，得到禽致病性大肠杆菌基因缺失株，此外，本申请还公开了一种禽致病性大肠杆菌基因缺失株及其用途和一种禽致病性大肠杆菌疫苗。
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公开(公告)号：CN114028350B
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202111369823.8
申请日：2021-11-18
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明公开了一种减轻猫应激组合物，按照质量份数计包括：加巴喷丁微囊包被物130～150份，风味剂60～70份，赋形剂37～43份，粘合剂21.7～25份，润滑剂4.6～5.4份，所述加巴喷丁微囊包被物含有加巴喷丁和崩解剂。本发明还公开了一种减轻猫应激组合物的制备方法。采用本发明，能有效掩盖加巴喷丁的苦味，提高猫的适口性，减少喂药的抗拒及应激反应。
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公开(公告)号：CN115927458A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202210830662.6
申请日：2022-07-14
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程及疫苗制备技术领域，公开了一种表达ASFV E183L基因的重组PRRSV的拯救方法和应用。所述拯救方法包括以扩增的pBR322‑CMV‑linear作为载体，segment4A、P54、segment4B作为插入片段进行同源重组，得到pBR322‑CMV‑segment4‑P54质粒；以扩增的pBR322‑CMV‑linear作为载体，PRRSV JXA1R株基因组五个PCR扩增片段作为插入片段进行同源重组，得到pBR322‑CMV‑rJXA1R‑P54质粒，然后转染细胞表达，得到重组PRRSV。本发明方法病毒拯救成功率高，可用于开发非洲猪瘟及其它猪病疫苗。
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