万古霉素结合聚乙二醇修饰的磁性纳米粒子快速富集分离单增李斯特菌的方法

    公开(公告)号:CN106957841A

    公开(公告)日:2017-07-18

    申请号:CN201710088530.X

    申请日:2017-02-20

    Applicant: 南昌大学

    CPC classification number: C12N13/00 C12N1/02 C12N1/20

    Abstract: 本发明公开了一种致病菌的分离方法,主要涉及单增李斯特菌的分离,该方法为单增李斯特菌后续研究提供基础,涉及生物技术领域。方法包括磁性纳米粒子与聚乙二醇的偶联、万古霉素偶联聚乙二醇包被的磁性纳米粒子、聚乙二醇和万古霉素共修饰的磁性纳米粒子复合物捕获样品液中的单增李斯特菌,在外加磁场的作用下,将捕获的单增李斯特菌与样品液进行分离,并进行重悬等步骤。磁分离捕获到的单增李斯特菌可以直接进行后续分析,与传统的细菌磁分离方法相比,该方法可以对食品基质和血液中的革兰氏阳性菌进行磁分离,不仅提高了样品中单增李斯特菌分离效率,同时也降低了成本。

    一种灵敏检测玉米赤霉烯酮的方法

    公开(公告)号:CN106568752A

    公开(公告)日:2017-04-19

    申请号:CN201610944797.X

    申请日:2016-11-02

    Applicant: 南昌大学

    CPC classification number: G01N21/643

    Abstract: 本发明提供了一种灵敏检测玉米赤霉烯酮的方法,该方法利用包埋有量子点的荧光微球替代常规的酶载体与玉米赤霉烯酮偶联,以偶联产物作为竞争抗原执行直接竞争ELISA。在技术路线中,本发明首先依据发光特性选择了适宜的量子点,进一步设计了基于荧光微球技术的量子点包埋方法,在此基础上,将量子点荧光微球经BSA包被后与玉米赤霉烯酮偶联,从而得到了性能更好的竞争性抗原。该技术方案中,荧光微球通过高聚物载体包埋了大量的量子点,因而具有更高的发光强度,可有效地提高检测的灵敏度;而且,由于荧光微球具有较大的粒径,因此可在一定程度上降低竞争抗原与包被抗体之间过高的亲和力,从而提升检测的灵敏度。

    一种针对乙肝表面抗原的检测方法

    公开(公告)号:CN105842447A

    公开(公告)日:2016-08-10

    申请号:CN201610157006.9

    申请日:2016-03-18

    Applicant: 南昌大学

    Abstract: 本发明提供了一种针对乙肝表面抗原的检测方法,该方法先将乙肝表面抗原与包被的多克隆抗体结合,接着连接生物素化的单克隆抗体,再连接链霉亲和素标记的触酶C100,通过触酶催化双氧水分解,降低对巯基丙酸修饰的碲化镉量子点的荧光淬灭,根据荧光强度的高低来判断样品中乙肝表面抗原的浓度。该方法基于双抗夹心酶联免疫技术,并采用了生物素?亲合素系统用于反应的放大。更为重要的是,由于本发明采用了新的抗体标记酶(触酶C100)和更为灵敏的荧光底物(碲化镉量子点),并匹配了有效的反应条件,使得检测灵敏性得到显著提升,同时降低成本、提升检测效率,因此具有良好的推广前景。

    一种针对单增李斯特菌的检测方法

    公开(公告)号:CN105842442A

    公开(公告)日:2016-08-10

    申请号:CN201610156077.7

    申请日:2016-03-18

    Applicant: 南昌大学

    CPC classification number: G01N33/56911 G01N2333/32

    Abstract: 本发明提供了一种针对单增李斯特菌(LM)的检测方法,该方法先将LM与包被的单克隆抗体结合,接着连接生物素化的多克隆抗体,再连接链霉亲和素标记的触酶C100,通过触酶催化双氧水分解,降低对巯基丙酸修饰的碲化镉量子点的荧光淬灭,根据荧光强度的高低来判断样品中LM的浓度。该方法基于双抗夹心酶联免疫技术,并采用了生物素?亲合素系统用于反应的放大。更为重要的是,由于本发明采用了新的抗体标记酶(触酶C100)和更为灵敏的荧光底物(碲化镉量子点),并匹配了有效的反应条件,使得检测灵敏性得到显著提升,同时降低成本、提升检测效率,因此具有良好的推广前景。

    一种针对沙门氏菌的检测方法

    公开(公告)号:CN105823876A

    公开(公告)日:2016-08-03

    申请号:CN201610157051.4

    申请日:2016-03-18

    Applicant: 南昌大学

    CPC classification number: G01N33/56916 G01N2333/255

    Abstract: 本发明提供了一种针对沙门氏菌的检测方法,该方法先将沙门氏菌与包被的单克隆抗体结合,接着连接生物素化的多克隆抗体,再连接链霉亲和素标记的触酶C100,通过触酶催化双氧水分解,降低对巯基丙酸修饰的碲化镉量子点的荧光淬灭,根据荧光强度的高低来判断样品中沙门氏菌的浓度。该方法基于双抗夹心酶联免疫技术,并采用了生物素?亲合素系统用于反应的放大。更为重要的是,由于本发明采用了新的抗体标记酶(触酶C100)和更为灵敏的荧光底物(碲化镉量子点),并匹配了有效的反应条件,使得检测灵敏性得到显著提升,同时降低成本、提升检测效率,因此具有良好的推广前景。

    高效纯化量子点与IgG类单克隆抗体偶联物的方法

    公开(公告)号:CN103665159B

    公开(公告)日:2016-05-04

    申请号:CN201310637480.8

    申请日:2013-12-03

    Applicant: 南昌大学

    Abstract: 本发明公开了一种适合规模化高效纯化水溶性量子点与IgG类单克隆抗体偶联物的新方法,属生物技术领域。针对目前量子点抗体偶联物纯化工艺复杂,回收率低,难以实现规模化生产的弊端,本发明通过采用氨基葡萄糖封闭量子点与抗体偶联物的残留羧基,降低偶联产物的表面ζ电位,通过调整溶液pH值至4.5~5.0,进一步降低偶联产物在溶液中的净电荷含量、实现普通高速离心法规模化高效纯化量子点与抗体偶联物。本发明简化了量子点与抗体偶联物的实验操作流程,降低了对分离设备的要求,适合大批量纯化量子点IgG类单克隆抗体偶联物,得率在85%以上,且偶联产物的荧光特性以及生物活性未见明显变化。

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