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公开(公告)号：CN103592167B
公开(公告)日：2015-08-26
申请号：CN201310578673.0
申请日：2013-11-18
申请人： 华中农业大学
摘要： 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及一种基于荧光素酶标记基因工程菌的氟喹诺酮类药物残留的检测方法和应用。本发明包含一种能同时检测11种氟喹诺酮类药物残留的荧光素酶标记基因工程菌的构建及应用。该工程菌为大肠杆菌(Escherichia coli)pK12，保藏号为CCTCC NO：M2013385，由含有recA启动子和荧光素酶报告基因luxCDABE的质粒pRecAlux3转化大肠杆菌K12所得。与现有技术相比，本发明构建的基因工程菌可以同时识别多种氟喹诺酮类药物，拓宽了现有技术的检测对象，具有简单、快速、灵敏、准确和半定量功能等突出优点。
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公开(公告)号：CN103421019B
公开(公告)日：2015-08-26
申请号：CN201210434826.X
申请日：2012-11-02
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C07D493/10
摘要： 本发明涉及生物毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇的微量氚标记的制备法。其包括以脱氧雪腐镰刀菌烯醇为原料，以苯硼酸保护7α,15位的两个羟基，通过斯文氧化（Swern Oxidation）将3位羟基氧化。然后以异丙醇为溶剂，采用氚标记硼氢化钠选择性还原3位羰基，得到氚标记脱氧雪腐镰刀菌烯醇。本发明的合成方法原料易得、反应条件温和、易操作，获得的氚标记化合物标记位点明确、稳定。产物的化学纯度和放化纯度均不低于98%，比活度为2.52Ci/mmol。本发明为深入开展脱氧雪腐镰刀菌烯醇的毒作用机制及食品安全性评价提供了重要的物质基础。
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公开(公告)号：CN104597243A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201410830693.7
申请日：2014-12-26
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： G01N33/577 , G01N33/542
CPC分类号： G01N33/543
摘要： 本发明公开了一种检测食品中磺胺类药物残留的抗体芯片试剂盒，包括芯片、抗体、Cy3标记的二抗、提取试剂，所述抗体是由保藏号为CCTCC NO:C201148的杂交瘤细胞株4E5所分泌的单克隆抗体，所述芯片固定了磺胺类包被原。本发明还公开了一种用于检测食品中磺胺类药物残留的抗体芯片方法，该方法可以同时检测16种磺胺类药物，从而为食品中的磺胺类药物残留检测提供了一个快速、灵敏、高通量的方法。本发明所建立的检测方法准确度高，精密度好、检测效率高，与现有的方法相比，可以节省大量的时间和成本，具有更好的市场应用价值。
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公开(公告)号：CN104558182A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201410829812.7
申请日：2014-12-26
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C07K16/44 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/543
摘要： 本发明公开了一种能识别邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸甲苯基丁酯的特异性单克隆抗体，本发明还公开了一种用于检测邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸甲苯基丁酯的酶联免疫方法及试剂盒。本发明的单克隆抗体是由保藏号为CCTCC NO:C201497的杂交瘤细胞株DBP3B2所分泌的。与现有技术相比，本发明制备的单克隆抗体可以同时识别邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸甲苯基丁酯，对DBP的最低检测限(IC50)仅为44.33μg/L，对BBP的最低检测限仅为62.59μg/L，而且对BBP具有较高的交叉反应率，因此对DBP和BBP这两种邻苯二甲酸酯塑化剂有较高的检测灵敏度和特异性。
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公开(公告)号：CN103288960B
公开(公告)日：2015-01-07
申请号：CN201210049798.X
申请日：2012-02-29
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C07K16/44 , C12N15/13 , G01N33/543
摘要： 本发明公开了一种吉他霉素残留检测用基因工程抗体及制备方法和应用，其步骤：A、取液氮保存的杂交瘤细胞株KA/2A9，提取脾细胞总RNA，得到mRNA，在逆转录得到cDNA。B、扩增得到重链可变区、轻链可变区基因；以重链和轻链抗体片段互为引物，利用多肽链将抗体重链和轻链连接；C、将酶切scFv连接入E.coliTG1中，加入M13K07培养，得到吉他霉素特异性抗体的噬菌体抗体文库。D、将噬菌体加入到处于对数生长期的E.coliHB2151中，IPTG诱导，得到特异性噬菌体抗体。E、验证的大肠杆菌表达菌株测序，得到单链抗体氨基酸和核苷酸序列。方法易行，操作简便，便于基因工程抗体的大批量生产。广泛应用于动物可食性组织中吉他霉素的残留检测，提供动物可食性组织中吉他霉素的残留量信息。
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公开(公告)号：CN104130197A
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201410368086.3
申请日：2014-07-29
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C07D239/50
CPC分类号： C07D239/50
摘要： 本发明属于化学合成技术领域，具体涉及一种2,4,6-三氨基-5-氰基嘧啶的化学合成方法。该产物是动物专用体外抗寄生虫药地昔尼尔在体内代谢物。本发明的特征是，以双氰胺钠和丙二腈为原料，经过亲核加成反应得到1-氨基-1-氰氨基-2,2-二氰基乙烯钠盐，在酸性条件下经环化后得到2-氯-4,6-二氨基-5-氰基嘧啶，最后氨解反应得到2,4,6-三氨基-5-氰基嘧啶。本发明具有合成工艺路线设计合理、操作简单和产率较高等优点。
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公开(公告)号：CN104119413A
公开(公告)日：2014-10-29
申请号：CN201410366468.2
申请日：2014-07-29
申请人： 华中农业大学
摘要： 本发明属于化学合成技术领域，具体涉及一种土拉霉素残留标示物，名称为3-脱克拉定糖-9-脱氧-9-二氢-9a-氮杂-9a-同型红霉素A的化学合成方法。本发明的特征是，以红霉素A(E)肟为原料，经过贝克曼重排反应得到红霉素A6,9-亚胺醚，经硼氢化钠还原即得氮红霉素，然后在酸性条件下水解脱掉克拉定糖得到3-脱克拉定糖-9-脱氧-9-二氢-9a-氮杂-9a-同型红霉素A粗品，经反复重结晶后制得其纯品，HPLC纯度达99.5％以上。本发明工艺简便，反应产率高，产品纯度高，可以作为土拉霉素残留标示物的标准物质候选物。
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公开(公告)号：CN102766212B
公开(公告)日：2014-06-04
申请号：CN201210176496.9
申请日：2012-05-31
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C07K16/44 , G01N33/577
摘要： 本发明公开了一种能识别氟喹诺酮类药物的特异性单克隆抗体，所述单克隆抗体是由杂交瘤细胞5B11所分泌的，该杂交瘤细胞保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC？NO：C201149。本发明还公开了检测氟喹诺酮类药物残留的酶联免疫方法与试剂盒及其在氟喹诺酮类药物残留检测中的应用。与现有技术相比，本发明制备得到的单克隆抗体能识别15种氟喹诺酮类药物，特别是能够同时识别二氟沙星和沙拉沙星，因此适用范围广。本发明建立的酶联免疫方法与试剂盒灵敏度、精密度高、准确性好。
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公开(公告)号：CN102766211B
公开(公告)日：2014-06-04
申请号：CN201210176485.0
申请日：2012-05-31
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C07K16/44 , G01N33/577
摘要： 本发明公开了一种能识别阿散酸、硝苯胂酸和卡巴胂的特异性单克隆抗体,？它是由杂交瘤细胞株4F2所分泌的，所述的杂交瘤细胞株4F2，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC？No：C201248。本发明还公开了检测阿散酸、硝苯胂酸和卡巴胂残留的酶联免疫方法及其试剂盒。与现有技术相比，本发明制备的单克隆抗体可以同时识别阿散酸、硝苯胂酸和卡巴胂，本发明的酶联免疫方法和试剂盒一次测定即可检出动物饲料或可食性动物组织中的残留，具有简便、快速、灵敏、准确等优点，同时具有样品处理方法简单，易操作，对操作者身体健康危害小等优点。
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公开(公告)号：CN103421856A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201210246546.6
申请日：2012-07-17
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12P17/18 , C07D493/10 , C12R1/77
CPC分类号： Y02P20/582
摘要： 本发明属于兽医药理学技术领域，具体涉及一种T-2毒素的制备方法。以玉米颗粒为原料，经产毒镰刀菌复苏，产分生孢子，接种玉米产毒培养基培养，在产毒高峰期对培养基采用乙醇液提取、二氯甲烷萃取、一步柱层析和结晶等工艺过程，获得T-2毒素结晶的提取方法。整个提取效率可达89%，所得毒素经核磁和质谱结构鉴定正确无误，测定含量不低于95.66%，稳定性至少4个月以上。与传统提取工艺比较，本发明采用一步法柱层析即可分离纯化出大量T-2毒素，步骤简单快捷产量高，所制备的毒素性质稳定纯度高，整个提取方法极大的降低了毒素合成成本，简化了毒素合成工艺，合成的毒素可以广泛应用于毒理学、代谢实验等各种毒素相关科研领域。
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