猪骨骼肌特异性表达基因myoz1启动子的克隆及应用

    公开(公告)号:CN103421790A

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201310214909.2

    申请日:2013-05-31

    Abstract: 本发明属于动物基因工程技术领域,具体涉及一种猪的骨骼肌特异性表达基因myoz1的不同长度启动子区域的分离鉴定和功能验证。从猪的基因组中克隆了骨骼肌特异表达基因tnnc2上游六个不同长度的启动子,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:6所示;结果表明648bp的myoz1-Q4片段具有独立的启动活性兼肌肉组织特异性,其核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示。公开了六个不同缺失启动子片段的制备方法、双荧光素酶活性检测系统和定量PCR方法对启动子活性分析的应用。

    一种在猪肌肉组织高效表达的融合启动子

    公开(公告)号:CN103421787A

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201310145821.X

    申请日:2013-04-24

    Inventor: 蒋思文 靳玮

    Abstract: 本发明具体涉及一种在猪肌肉组织高效表达的融合启动子的分离鉴定。从梅山猪中克隆了MEF2C基因上游4个不同启动子缺失片段,将这些片段构建至pGL3-Basic载体中后确定它的活性,其中pGL3-MEF2CP3的活性相对较强,该启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。通过替换pGL3-Basic载体luc片段为PPAR gama CDS序列,其核苷酸序列如SEQID NO:2所示,构建融合启动子载体pGL3-MEF2CP3-PPAR gama。通过半定量PCR及蛋白质印迹验证PPAR gama的表达均有提高。

    猪脂肪组织特异性表达基因plin启动子及应用

    公开(公告)号:CN103421780A

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201210229852.9

    申请日:2012-07-04

    Inventor: 蒋思文 高瑞娟

    Abstract: 本发明属于动物基因工程技术领域,具体涉及到猪的脂肪组织特异性表达基因plin不同长度启动子区域的分离鉴定和功能验证。从猪的基因组中克隆了脂肪组织特异性表达基因plin上游6个不同长度的启动子,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO:2-7所示;结果表明-130bp到-910bp和-435bp到-896bp有独立的启动活性。本发明同时公开了6个不同缺失启动子片段、相应重组表达载体的制备方法及双荧光素酶活性检测系统对启动子活性分析的应用。

    猪骨骼肌特异性表达基因α-actin启动子的克隆及应用

    公开(公告)号:CN102453716B

    公开(公告)日:2013-01-02

    申请号:CN201010518585.8

    申请日:2010-10-21

    Inventor: 蒋思文 刘京鸽

    Abstract: 本发明属于动物基因工程技术领域,具体涉及到猪的骨骼肌特异性表达基因α-actin的不同长度启动子区域的分离鉴定和功能验证。从猪的基因组中克隆了骨骼肌特异表达基因α-actin(GeneBank登录号为100154254)上游八个不同长度的启动子,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO:2-SEQ ID NO:9所示;结果表明长度为249bp的区域具有独立的启动活性兼肌肉组织特异性,它的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:9所示。本发明同时公开了八个不同缺失启动子片段的获得、相应重组表达载体的制备方法及双荧光素酶活性检测系统对启动子活性分析的应用。

    猪miR-27a前体侧翼序列SNP作为猪产仔数性状的遗传标记及应用

    公开(公告)号:CN101818195B

    公开(公告)日:2012-04-18

    申请号:CN200910272588.5

    申请日:2009-11-02

    Abstract: 本发明属于猪遗传标记制备与应用技术领域,具体涉及一种猪miR-27a前体侧翼基因片段作为猪产仔数性状的遗传标记,其制备方法与应用。本发明获得了一种与猪产仔数性状相关的遗传标记,它包含猪miR-27a前体侧翼基因片段,它是序列表SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列;在序列表SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5序列的461bp处有一个C461-T461的碱基突变,该突变导致PCR-HpaII-RFLP多态性。设计了扩增miR-27a前体侧翼基因片段的引物,其核苷酸序列如SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7所示。本发明公开了该遗传标记的制备方法及其在猪标记辅助选择中的应用。

    猪柠檬酸脱氢酶基因IDH3β启动子的分离克隆和鉴定

    公开(公告)号:CN101974527A

    公开(公告)日:2011-02-16

    申请号:CN201010278620.3

    申请日:2010-09-10

    Abstract: 本发明属于猪的动物生物技术与育种领域,具体涉及猪异柠檬酸脱氢酶基因IDH3β的启动子的克隆、活性分析和启动子区突变研究。本发明的步骤包括:从猪血液中提取基因组DNA,设计引物,采用TAIL-PCR技术经过两轮扩增获得猪IDH3β基因上游5’侧翼2447bp的基因组碱基序列,并进行序列比较分析和遗传变异检测;采用5’端缺失策略扩增IDH3β基因上游5’侧翼区,将获得的DNA序列构建荧光素酶报告基因载体,测定其启动子活性,鉴定IDH3β基因启动子。本发明克隆的猪异柠檬酸脱氢酶基因IDH3β的启动子的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:4所示。本发明为猪的遗传改良应用提供了基因资源。

    表达肠毒素大肠杆菌黏附素基因的重组菌及其在卵黄抗体饲料中的应用

    公开(公告)号:CN100537749C

    公开(公告)日:2009-09-09

    申请号:CN200710052615.9

    申请日:2007-07-02

    Inventor: 彭健 王劼 蒋思文

    Abstract: 本发明属于动物营养与饲料科学技术领域,同时涉及动物分子生物学技术的应用。具体地,本发明涉及一种表达猪肠毒素大肠杆菌K88和F18黏附素基因faeG和fedF的重组大肠杆菌的构建及其在制备卵黄抗体饲料中的应用。该表达肠毒素大肠杆菌K88ac黏附素基因faeG和F18ac黏附素基因fedF重组质粒的大肠杆菌是利用连接肽构建faeG和fedF融合基因,并将此融合基因插入原核表达载体pET28a中构建而成的。本发明的重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-8818,保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏号为CCTCC NO:M207090。本发明还公开了保藏号为CCTCC NO:M207090的重组大肠杆菌在制备卵黄抗体饲料中的应用。

    包含Z9CCK蛋白的重组大肠杆菌及卵黄抗体与应用

    公开(公告)号:CN101307104A

    公开(公告)日:2008-11-19

    申请号:CN200810048379.8

    申请日:2008-07-11

    Abstract: 本发明公开了一种包含Z9CCK蛋白的重组大肠杆菌及卵黄抗体与应用,一种经大肠杆菌偏爱密码子优化后的猪胆囊收缩素-33(CCK-33)基因多串联体重组质粒的构建,猪CCK-33多串联体重组蛋白在大肠杆菌中的表达,Z9CCK(猪CCK-33九串联体)重组蛋白的纯化及其在制备卵黄抗体制品中的应用。利用多串联体构建技术等基因工程技术构建了重组质粒pRSET-Z9CCK,将所述的重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导重组大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)/pRSET-Z9CCK表达Z9CCK蛋白,从3个方面验证了Z9CCK重组蛋白具有良好的抗原性。利用所述的Z9CCK重组蛋白主动免疫生长肥育猪,研究了其对猪生长性能及部分血液生化指标的影响;利用所述的Z9CCK重组蛋白主动免疫产蛋鸡,制备了CCK卵黄抗体全蛋粉,利用所述的CCK卵黄抗体提高哺乳期母猪的采食量、仔猪的生长性能。

    猪黑素皮质素-3受体基因及其单核苷酸多态性检测方法

    公开(公告)号:CN1480532A

    公开(公告)日:2004-03-10

    申请号:CN02139001.0

    申请日:2002-09-04

    Abstract: 本发明属于猪分子生物学技术领域,具体涉及猪黑素皮质素-3受体(melanocortin-3 receptor,MC3R)基因及其单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)检测技术领域。其步骤包括:从猪血液基因组提取DNA、根据人和鼠MC3R基因保守区设计引物、PCR扩增、PCR产物直接测序、序列比较分析、单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)检测。本发明公开了猪MC3R基因DNA序列和SNP分型的检测技术,为猪的标记辅助育种提供了新的标记。

    一种减少母猪异常行为的福利玩具

    公开(公告)号:CN210008399U

    公开(公告)日:2020-02-04

    申请号:CN201920326248.5

    申请日:2019-03-14

    Abstract: 本实用新型公开了一种减少母猪异常行为的福利玩具,包括悬挂吊件和普通木头,还包括离心管和气味固体,所述普通木头两端安装有悬挂吊件,普通木头上开设有多个纵向贯穿的插装孔,插装孔内嵌装有离心管,离心管内填充有气味固体。本实用新型坚固耐用,制作成本低,易于清洁和消毒,应用本实用新型可以增加母猪咀嚼、啃咬、磨牙、玩耍等天性行为的表达,减少母猪咬耳、咬背、咬肩、咬尾、争斗等异常行为,提高母猪的受胎率,改善猪的健康和生产性能。

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