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公开(公告)号：CN102936619B
公开(公告)日：2014-10-22
申请号：CN201210202181.7
申请日：2012-06-15
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种定量检测大肠杆菌RNA的方法及其专用标准品和应用。本发明提供的方法包括如下步骤：（1）按照如下方法制作标准曲线；将RNA标准品配制成各个浓度的标准品稀释液，然后将各个标准品稀释液反转录为cDNA，以cDNA为模板进行实时荧光定量PCR，以实时荧光定量PCR体系中的cDNA对应的RNA拷贝数（也可对拷贝数进行数据处理，如拷贝数以10为底的对数）和Ct值制作标准曲线方程；（2）提取大肠杆菌的总RNA并反转录为cDNA，以cDNA为模板进行实时荧光定量PCR，将Ct值代入所述标准曲线方程，得到大肠杆菌的RNA含量。本发明的方法可用于快速检测环境中少量的大肠杆菌，为快速检测活性大肠杆菌提供技术支持。
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公开(公告)号：CN101813662B
公开(公告)日：2012-11-21
申请号：CN200910077796.X
申请日：2009-02-19
Applicant: 清华大学
IPC: G01N27/407
Abstract: 本发明公开了一种检测水中氨氮含量的方法及其专用装置。本发明的方法包括如下步骤：1)将已知氨氮浓度的溶液的pH值调至11以上，用气敏传感器阵列采集溶液上方的信号，提取所述气敏传感器阵列中的各传感器响应信号的特征值，建立模式识别模型；所述模式识别模型的输入为所述气敏传感器阵列中的每个传感器的响应信号的特征值，输出为溶液中的氨氮浓度；2)将待测液的pH值调至11以上，用气敏传感器采集溶液上方的信号，提取其稳态值，利用模式识别模型对特征值进行计算，得到待测液中氨氮的浓度。该方法简单方便，样品不需预处理，所有操作均自动完成，可实现氨氮的在线自动监测。
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公开(公告)号：CN101382550B
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN200810223492.5
申请日：2008-10-06
Applicant: 北京金达清创环境科技有限公司 , 清华大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/53 , G01N33/543 , C12N15/02
Abstract: 本发明公开了一种检测硝基苯类化合物的酶联免疫试剂盒及其应用。本发明试剂盒包括硝基苯乙胺和抗硝基苯乙胺的特异性抗体；所述特异性抗体为所述硝基苯乙胺的多克隆抗体或单克隆抗体。本发明的试剂盒，具有灵敏度高、结构简单、使用方便、快速、准确的特点，并且还适用于水中、土壤中、动植物水产品(如鱼类、蚌壳类、水藻类等)中硝基苯类物质的定量检测。因此，本发明试剂盒，对于硝基苯类物质大规模样品的快速筛查和预警监测具有非常重要的经济和社会意义。
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公开(公告)号：CN101974632B
公开(公告)日：2012-05-16
申请号：CN201010525975.8
申请日：2010-10-25
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种检测产毒微囊藻的方法及其专用标准品。本发明提供的一种检测样品中产毒微囊藻的标准品，为含有mcyA基因的重组质粒或重组菌或重组细胞；所述mcyA基因的序列是序列表中的序列1。所述重组质粒中的出发质粒是pMD-18T。本发明的检测产毒微囊藻的标准品具有广谱识别和特异性相结合的特点，敏感性高，制备方法简便，可以长期保存，纯度好，线性检测范围宽，可以用于水环境样品中产毒微囊藻的快速定量检测。
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公开(公告)号：CN101974632A
公开(公告)日：2011-02-16
申请号：CN201010525975.8
申请日：2010-10-25
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种检测产毒微囊藻的方法及其专用标准品。本发明提供的一种检测样品中产毒微囊藻的标准品，为含有mcyA基因的重组质粒或重组菌或重组细胞；所述mcyA基因的序列是序列表中的序列1。所述重组质粒中的出发质粒是pMD-18T。本发明的检测产毒微囊藻的标准品具有广谱识别和特异性相结合的特点，敏感性高，制备方法简便，可以长期保存，纯度好，线性检测范围宽，可以用于水环境样品中产毒微囊藻的快速定量检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101666747A
公开(公告)日：2010-03-10
申请号：CN200810119650.2
申请日：2008-09-04
Applicant: 北京金达清创环境科技有限公司 , 清华大学
Abstract: 本发明提出了一种阵列光纤倏逝波生物传感器系统，包括：激光发射装置(1)；激光传输光路(2，601，603)；光纤探头(9)；荧光接收光路(602，603)；光电探测器(4)；以及处理单元(11)。其中，激光传输光路(2，601，603)的输入端与激光发射装置(1)耦合，输出端耦合至光纤探头(9)；荧光接收光路(602，603)的输入端与光纤探头(9)耦合，输出端耦合至光电探测器(4)；处理单元(11)与光电探测器(4)以及激光发射装置(1)连接。其中，激光传输光路(2，601，603)和荧光接收光路(602，603)至少部分地由光纤构成。通过本发明，实现了传感系统结构简单、光传递效率高，仪器紧凑和小型化。
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公开(公告)号：CN100535012C
公开(公告)日：2009-09-02
申请号：CN200610113100.0
申请日：2006-09-11
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌多克隆抗体及其制备方法与应用，其目的是提供一种大肠杆菌多克隆抗体及其制备方法与其在检测大肠杆菌中的应用。该制备方法包括以下步骤：1)从生活污水中分离出大肠杆菌；2)培养后灭活，得到大肠杆菌全菌体抗原；3)将大肠杆菌全菌体抗原免疫动物；4)从经免疫的动物中分离、纯化抗血清，得到大肠杆菌多克隆抗体。用本发明方法制备的大肠杆菌多克隆抗体具有特异性高，纯度及效价高(大于1∶1×105)，可长期保存的优点，将其用于环境及食品检测领域中大肠杆菌的免疫检测中，将具有精确性、灵敏度高和检测步骤少(采用未经破碎的全菌体作为抗原)的优势，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN100535009C
公开(公告)日：2009-09-02
申请号：CN200610113827.9
申请日：2006-10-18
Applicant: 清华大学
IPC: C07K16/12 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌菌体多克隆抗体及其制备方法与应用。该制备方法包括以下步骤：1)分离大肠杆菌；2)将大肠杆菌置于含无菌玻璃珠和/或钢珠的生理盐水中，摇动，在80-120℃下孵育1.5-3小时，离心，弃上清，用PBS重悬后对其进行灭菌，得到大肠杆菌菌体抗原；3)将大肠杆菌菌体抗原免疫动物；4)从经免疫的动物中分离、纯化抗血清，得到大肠杆菌菌体多克隆抗体。用本发明方法制备的大肠杆菌菌体多克隆抗体具有特异性高，纯度及效价高(大于6400)，可长期保存的优点，将其用于环境及食品检测领域中大肠杆菌的免疫检测中，将具有精确性、灵敏度高和检测步骤少的优势，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN100535008C
公开(公告)日：2009-09-02
申请号：CN200610113826.4
申请日：2006-10-18
Applicant: 清华大学
IPC: C07K16/12 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌菌毛多克隆抗体及其制备方法与应用，其目的是提供一种大肠杆菌菌毛多克隆抗体及其制备方法与其在检测大肠杆菌中的应用。该制备方法包括以下步骤：1)分离出大肠杆菌；2)感作离心后得到大肠杆菌菌毛抗原；3)将大肠杆菌菌毛抗原免疫动物；4)从经免疫的动物中分离、纯化抗血清，得到大肠杆菌菌毛多克隆抗体。用本发明方法制备的大肠杆菌菌毛多克隆抗体具有特异性高，纯度及效价高(大于6400)，可长期保存的优点，将其用于环境及食品检测领域中大肠杆菌的免疫检测中，将具有精确性、灵敏度高和检测步骤少的优势，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN100509656C
公开(公告)日：2009-07-08
申请号：CN200710175738.1
申请日：2007-10-11
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种浓集污水或污水处理厂尾水中病毒的方法。该病毒浓集的方法，包括以下步骤：1)调节水样条件：取污水或污水处理厂尾水水样，加入Al3+，使Al3+终浓度为0.5-1mol/L，将pH值调节至3.0-3.5；2)吸附：在步骤1)的水样中，加入硅胶颗粒，搅拌吸附；3)洗脱：收集步骤2)吸附后的硅胶，用pH 3.0-3.5H2SO4溶液冲洗后，放入pH值为9.0-9.5的尿素-赖氨酸缓冲液中振荡涡漩，离心收集上清液得到洗脱液；4)洗脱液浓缩：将步骤3)得到的洗脱液超滤浓缩。本发明的方法不仅具有回收率相对较高、处理水量大、效果稳定、操作简单、成本低廉等优点，还可以将浓集后的样品直接用于分子生物学操作，为快速准确检测水环境中的病毒提供了强有力的技术支持。
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