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公开(公告)号:CN101955910A
公开(公告)日:2011-01-26
申请号:CN201010138753.0
申请日:2010-03-31
Applicant: 安徽农业大学
Inventor: 张运海 , 曹鸿国 , 章孝荣 , 李运生 , 殷慧群 , 孙雪萍 , 薛奕杰 , 张卫琴 , 黄伟玲 , 陈涛 , 宋锐 , 陶勇 , 刘亚 , 方富贵 , 刘旭光 , 任春环 , 张子军 , 殷宗俊 , 丁建平
IPC: C12N5/073 , C12N15/62 , C12N15/867 , C12N7/01
Abstract: 本发明公开了一种猪诱导性多能干细胞诱导方法,利用外源限定因子与增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)报告基因构建融合蛋白慢病毒表达载体用于猪诱导性多能干细胞的诱导,对表达外源限定因子融合蛋白的猪胎儿成纤维细胞进行培养传代,逐步分离培养出集落边缘界限清晰的细胞克隆,细胞集落生长状态稳定,核型正常,碱性磷酸酶检测为阳性,免疫细胞化学检测显示Oct4、Nanog、SSEA-1蛋白表达为阳性,体内能够分化形成含有三个胚层的畸胎瘤,分离培养的细胞克隆得到猪诱导性多能干细胞。
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公开(公告)号:CN101940550A
公开(公告)日:2011-01-12
申请号:CN201010273948.6
申请日:2010-09-02
Applicant: 安徽农业大学 , 合肥博大牧业科技开发有限责任公司
Abstract: 本发明涉及促性腺激素释放激素脂质体的制备方法。该方法的具体操作步骤是:将磷脂酰胆碱和胆固醇按照3∶1(w/w),加入6ml混合有机溶剂(氯仿∶甲醇1∶1,V/V)溶解或6ml无水乙醇溶解,在氮气流下加入促性腺激素释放激素(GnRH)溶液,在旋转蒸发仪上旋转预热30min,然后在水浴式超声仪中进行低温超声分散后,将得到的脂质体悬液进行滤菌处理,即可制得促性腺激素释放激素(GnRH)脂质体。本发明制得的促性腺激素释放激素脂质体可作为哺乳动物免疫去势的药物制剂,用于各种哺乳动物的免疫去势。本发明制剂使用方便,效果显著,安全可靠,稳定性好,易于保存。
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公开(公告)号:CN118621030A
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202410871033.7
申请日:2024-07-01
Applicant: 安徽农业大学 , 蒙城县畜牧兽医水产发展中心
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及动物分子育种技术领域,公开了PLCB3基因SNP标记在湖羊产羔中的应用,包括一种与湖羊产羔数相关的SNP位点,所述SNP位点位于PLCB3基因序列上;所述SNP位点为g.41767323T>G位点;所述g.41767323T>G位点的TT基因型湖羊个体产羔数显著高于TG基因型和GG基因型个体。本发明提供的SNP标记与湖羊的产羔数显著相关,该SNP标记可以用于湖羊产羔数的辅助选择,筛选具有产多羔潜能的湖羊,对进一步提高湖羊繁殖力和利用特定湖羊为素材进行品种或品系选育具有重要的实际应用价值,便于养殖人员对湖羊进行育种培育。
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公开(公告)号:CN115948326B
公开(公告)日:2024-07-05
申请号:CN202310168473.1
申请日:2023-02-27
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种猪睾丸支持细胞和睾丸间质细胞的同步分离方法,包括S1猪睾丸的消毒、S2睾丸组织分离、S3第一次酶消化、S4第一次物理分离、S5第二次酶消化、S6第二次物理分离、S7细胞鉴定等步骤,从而实现猪睾丸支持细胞和睾丸间质细胞的同步分离方法的整个过程。本发明一种猪睾丸支持细胞和睾丸间质细胞的同步分离方法,操作简单方便,分离出来的猪睾丸支持细胞和睾丸间质细胞均一度较高,无需其他纯化措施后续培养稳定性好,分离效率高;同时在细胞污染、分离纯化和鉴定、细胞质数量及量、分离法成本等方面均能够得到有效控制,有利于推广应用。
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公开(公告)号:CN111619839B
公开(公告)日:2021-12-03
申请号:CN202010556987.0
申请日:2020-06-18
Applicant: 安徽农业大学
IPC: A01N1/02
Abstract: 本发明公开了一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法,通过S1精液预稀释、S2精液冻存基础液的配置、S3精液冻存Ⅰ液的配置、S4精液冻存Ⅱ液的配置、S5鲜精灌装液的配置、S6手动灌装、S7精液冷冻等步骤,从而完成细管冻精生产中精液手动罐装的整个过程。本发明一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法,方便快捷,效率高,可靠性高,价格便宜,非常适合于广大的中小型畜牧企业使用。
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公开(公告)号:CN110016483A
公开(公告)日:2019-07-16
申请号:CN201910315164.6
申请日:2019-04-18
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N15/867 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种研究卵母细胞体外成熟中卵丘细胞基因功能的方法,包括如下步骤:成熟碟的制备:取20.83uL成熟液于200uL离心管中,再加入1uL慢病毒,吹打混匀;将混匀后的成熟液在培养皿中做培养滴,并加入3mL矿物油,将培养皿放在培养箱平衡3-5h;慢病毒转染COCs:从卵泡中的挑选出COCs,再用成熟液IVM将COCs清洗三遍;把清洗好的COCs转染30-50h,本发明的慢病毒转染卵丘-卵母细胞复合物来发明卵母细胞成熟中卵丘基因功能的方法,通过慢病毒转染实现干扰卵丘细胞中目的基因或蛋白的表达,有效地解决卵丘细胞不能进行显微注射的问题,又能很好地发挥卵丘基因在卵母细胞成熟过程中发挥的作用。
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公开(公告)号:CN109975264A
公开(公告)日:2019-07-05
申请号:CN201910315163.1
申请日:2019-04-18
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种慢病毒转染囊胚滋养层细胞研究其基因功能的方法,包括如下步骤:培养碟的制备:取20.83uL胚胎培养液置于离心管中,加入1uL慢病毒,吹打混匀;再将胚胎培养液在培养皿中做培养滴,并加入3mL矿物油,将培养皿放在培养箱平衡3‑5h。慢病毒转染囊胚:用胚胎培养液将去除透明带后的囊胚清洗干净;清洗好的囊胚置于培养碟中,转染10‑14h;用DPBS液体将囊胚清洗干净,并用4%PFA固定10‑30min,再用DPBS清洗干净;DAPI染核,压片。本发明通过慢病毒转染实现干扰滋养层细胞中目的基因表达,从而有效地解决滋养层细胞中基因不能敲低或过表达的问题。
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公开(公告)号:CN109112182A
公开(公告)日:2019-01-01
申请号:CN201811027188.3
申请日:2018-09-04
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明公开了一种猪单个卵母细胞基因定量表达的方法,通过S1:引物池的准备、S2:逆转录反应体系的配置、S3:PCR聚合酶链式反应、S4:模版DNA稀释、S5:qPCR定量聚合酶链式反应等步骤,从而实现猪单个卵母细胞的基因定量表达。本发明,采用单细胞定量PCR,实现了RNA提取纯化、逆转录和PCR反应在同一管内完成,不需额外操作,具有减少试验误差、降低污染、提高灵敏度等优势;使用单个细胞进行定量PCR,大大减少了样品需求量,缩短了时间和精力,降低了花费,同时也解决了定量PCR技术在珍贵样品中应用的局限性。本发明方法,操作简单,成本低,误差小,准确度高,效果好。
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公开(公告)号:CN108925550A
公开(公告)日:2018-12-04
申请号:CN201811027186.4
申请日:2018-09-04
Applicant: 安徽农业大学
IPC: A01N1/02
Abstract: 本发明公开了一种简单经济高效的精液运输方法,包括如下步骤:17℃保温瓶的准备,将热水倒入保温瓶,缓慢加入凉水,直至保温瓶内的水温稳定在17℃,盖好盖子备用;精液的运输,将从猪场刚取出的精液装入精液瓶中;对保温瓶内的水温进行再次确认及微调;将精液瓶放入17℃保温瓶中,确保水可以没过精液瓶的瓶身,再将装有精液的保温瓶放在温度为23.8-24.2℃的车内,并于2h内运回实验室。这种运输方法可以保证在17℃下,精子仍具有较好的精子活力,可以有效地减少精子的死亡和损失,可以在较低的经济成本下保证精液的品质,是一种理想的精液运输方法。
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公开(公告)号:CN106962219A
公开(公告)日:2017-07-21
申请号:CN201710205458.4
申请日:2017-03-31
Applicant: 安徽农业大学
IPC: A01K9/00
CPC classification number: A01K9/00
Abstract: 本发明公开一种自动温控流动式羔羊哺乳器,包括支撑装置和放置于支撑装置上的哺乳箱:哺乳箱包括箱体、箱盖、控制装置和吸奶装置,箱盖扣合在箱体上,在箱盖上设置控制装置,控制装置包括控制面板、温度感应器、加热丝、吸水泵、蓄电池、进奶管和出奶管,控制面板上设置显示屏和操作按钮,温度感应器与控制面板连接,控制面板用于控制加热丝和吸水泵,温度感应器设置在加热丝的前端,进奶管和出奶管连通,吸奶装置设置在箱体的底部;支撑装置包括托盘、支撑架、焊接在支撑架上部的固定圆环和设置在支撑架底部的车轮,每个支撑架中部依次设置若干个圆孔,圆孔用于安装固定栓,托盘放置于固定栓上。本发明使奶液温度恒定,使奶液不沉淀、不结块。
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