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公开(公告)号:CN109536590A
公开(公告)日:2019-03-29
申请号:CN201811427223.0
申请日:2018-11-27
Applicant: 中国科学院上海微系统与信息技术研究所
IPC: C12Q1/686
Abstract: 本发明提供一种基于微孔阵列芯片的单细胞基因检测方法,包括以下步骤:1)提供一种包含若干微孔单元的微孔阵列芯片;2)将细胞悬液滴加于微孔阵列芯片上,通过离心实现单细胞在单个微孔单元中的定位;3)在微孔阵列芯片上粘贴PCR封装膜,进行第一次封装,离心,高温加热,揭掉PCR封装膜;4)在微孔阵列芯片上滴加PCR预混液,采用聚丙烯双面胶膜粘贴微孔阵列芯片,离心,将玻璃盖板与聚丙烯双面胶膜上层贴合,实现第二次封装;以及5)将第二次封装完成的微孔阵列芯片放置于PCR原位仪上进行PCR,反应结束后,显微镜下观察荧光信号,分析单细胞基因表达水平。根据本发明提供的方法实现了单细胞水平的高通量、一体化和快速检测。
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公开(公告)号:CN106824313A
公开(公告)日:2017-06-13
申请号:CN201710099338.0
申请日:2017-02-23
Applicant: 中国科学院上海微系统与信息技术研究所
CPC classification number: B01L3/502715 , B01L3/502792 , B01L3/52 , B01L2200/0689 , B01L2200/10 , B01L2300/14
Abstract: 本发明提供了一种数字PCR芯片,包括盖片与玻璃基片贴合而成的液滴产生模块和与液滴产生模块一面紧贴的液滴收集模块,其中盖片上具有液相进样口和油相进样口这两个通孔,与玻璃基片贴合的盖片的一面上刻蚀有与液相进样口或油相进样口连通的微流沟道,两微流沟道分别分岔为两条分沟道,所述分沟道两两相交于液滴产生接口;液滴收集模块包括一两边开口的腔体,液滴产生接口均紧贴其中一个开口的内侧。本发明提供的数字PCR芯片具有独立的液滴收集模块,PCR反应和结果的观察都在芯片内进行,大大降低了被污染和破乳的可能性,同时PCR的结果置于荧光显微镜下统一观察,在芯片内不需要逐个进行的信号读取,大大缩短了信号读取时间。
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公开(公告)号:CN103389237B
公开(公告)日:2016-03-30
申请号:CN201310330143.4
申请日:2013-07-31
Applicant: 中国科学院上海微系统与信息技术研究所
IPC: G01N1/28
Abstract: 本发明公开了一种简易低成本微阵列芯片点样器及使用方法,所述点样器由一个包含微通孔阵列和一组微管道的硅橡胶芯片构成,芯片上每个微通孔至少与一条微管道相通,各条微管道之间相互独立,且每条微管道至少连接一个进样口。使用时,首先将点样器置于真空环境中进行脱气处理,然后将脱气处理后的点样器与待点样基片贴合,点样器中包含微通孔阵列的一面接触待点样基片,并在各进样口滴加相应待固定样品,利用脱气硅橡胶块体吸收微管道中空气形成的负压驱动进样口液样充满微管道和微通孔阵列,经过一定时间的静置,待微通孔阵列中液样与基片表面完成交联反应后,剥离点样器,并清洗基片,即可得到完成点样的微阵列芯片。
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公开(公告)号:CN104946739A
公开(公告)日:2015-09-30
申请号:CN201510192242.X
申请日:2015-04-20
Applicant: 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 , 上海济远生物科技有限公司
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种用于EGFR基因突变检测试剂盒及其应用,其特征在于本试剂盒包含用于EGFR基因突变位点20条特异性扩增的引物、5条野生序列的高效封阻探针,4条EGFR基因特异性TaqMan荧光探针。该试剂盒可以检测突变拷贝数低至5~10拷贝,突变含量低至0.1%的标本。本发明可同时检测EGFR基因5种基因突变,灵敏度高,操作简单,检测廉价,临床应用范围广,样本可以为新鲜的病理组织,石蜡包埋组织、胸腔液、血清或血浆,检测速度快,检测过程只需要90分钟即可完成。
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公开(公告)号:CN104404142A
公开(公告)日:2015-03-11
申请号:CN201410631409.3
申请日:2014-11-11
Applicant: 中国科学院上海微系统与信息技术研究所
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q2525/301 , C12Q2531/113 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明涉及一种用于荧光定量PCR反应的荧光探针。其特征在于所述的探针包含一条寡核苷酸序列,其5’端为扩增靶序列特异性寡核苷酸序列,并修饰荧光基团,3’端为一段与5’序列反向互补回文结构核苷酸序列,并修饰荧光淬灭基团。在一定条件下,该探针形成分子内二级结构,荧光基团与淬灭基团靠近从而淬灭荧光基团释放的荧光信号。所述的探针与一般荧光单针相比,特异性高,灵敏度高,荧光淬灭效率低,因此反应的信噪比更高,可应用于实时荧光定量PCR检测反应以及所有终点荧光检测反应。
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公开(公告)号:CN103451313A
公开(公告)日:2013-12-18
申请号:CN201310451535.6
申请日:2013-09-27
Applicant: 中国科学院上海微系统与信息技术研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明提供一种基因芯片的金沉积检测方法,其特征在于所述方法包括将已知的DNA序列点样到微阵列上制备基因芯片,在待测核酸的5’端预先修饰一种生物大分子,以及在纳米金上标记与待测核酸上修饰分子匹配的另一生物大分子构建纳米金复合探针,然后将修饰好的待测核酸和标记好的所述纳米金复合探针与所述基因芯片混合,孵育,洗去未反应的所述纳米金复合探针,加入双氧水金增强反应液观察。本发明提供的基因芯片的金沉积检测方法最大的特点及优点为:灵敏度高,检测方便,操作简便,耗时短,成本低,目视化检测,检测及信号读取设备依赖程度低。
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公开(公告)号:CN103343092A
公开(公告)日:2013-10-09
申请号:CN201310306080.9
申请日:2013-07-19
Applicant: 中国科学院上海微系统与信息技术研究所
Abstract: 本发明拟涉及一种基于矿物油饱和PDMS材料数字PCR芯片的制备方法。其特征在于将一定量矿物油(液体石蜡)的PDMS单体制备PDMS数字PCR芯片,芯片包括乳滴生成结构、乳滴收集结构两部分。乳滴在同一芯片上制作、收集,然后在同一芯片上进行PCR扩增。该芯片避免了PDMS对数字PCR体系中油相的吞噬,有利于维持PCR反应过程中乳滴及PCR反应的稳定性。而且与目前数字PCR芯片技术相比,成本低,操作简便,应用前景非常广泛。
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公开(公告)号:CN101812529B
公开(公告)日:2013-06-26
申请号:CN201010156014.4
申请日:2010-04-23
Applicant: 中国科学院上海微系统与信息技术研究所
Abstract: 本发明涉及一种纳米复合探针及其在基因芯片膜转印的检测方法,其特征在于所述的纳米复合探针为三条探针共同标记的纳米颗粒,其中所述的三种探针分别为检测探针DP2和两种长短不同的信号探针SP1和SP2,三种探针的长度DP2≥SP1>SP2,且SP1碱基长度比SP2长10mer以上;DP2、SP1和SP2混合的比例为DP2/(SP1+SP2)=1∶5-1∶30,其中SP1与SP2的比例在1∶5-1∶30之间。所述的三条探针共同标记纳米颗粒所形成的空间立体结构降低杂交及生物素——键亲和素反应的空间位阻,提高检测灵敏度。采用杂交和显色的方法用于检测合成靶DNA分子和结核分枝杆菌,具有灵敏度高和探眼可分辨的特点。
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公开(公告)号:CN1680586A
公开(公告)日:2005-10-12
申请号:CN200510023584.5
申请日:2005-01-26
Applicant: 中国科学院上海微系统与信息技术研究所
IPC: C12Q1/25 , G01N27/447
Abstract: 本发明涉及一种微流体芯片电泳分离检测同工酶活性的方法,其特征在于首先通过微加工工艺制作石英介质的微流体芯片,然后在芯片微管道中加入同工酶反应所需要的辅酶、底物、缓冲液及筛分介质等各种成分,并在加样池中加入待检测样品,最后将加样后的微流体芯片,置于光学检测平台上,各池中插入相应电极,施加适当时序和幅值的电压进行分离、反应及检测。与常规同工酶分离检测技术相比,本发明具有样品和试剂消耗量少,检测速度快,成本低等优点。
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公开(公告)号:CN1648662A
公开(公告)日:2005-08-03
申请号:CN200510023894.7
申请日:2005-02-06
Applicant: 中国科学院上海微系统与信息技术研究所
Abstract: 本发明涉及一种玻璃微流控芯片的低温键合方法,其特征在于具体包括(1)在腐蚀出相应图形和完成储液池打孔加工后基片进行表面清洗;(2)基片预键合,清洗后的基片和盖片用去离子水冲洗后,直接在去离子水中将基片和盖片的键合面贴合在一起,转移到培养皿中,然后放置到真空干燥箱中,干燥温度为90-110℃,抽真空使真空度达60-90Pa并保持真空2 h完成基片预键合;(3)基片预键合后退火,提高键合强度,在预键合好的基片上面施加0.2-0.4MPa的压力,同时将真空干燥箱的温度设定为180-210℃,抽真空真空度为60-90Pa保持6h后关闭电源,自然冷却至室温。键合过程在非净化条件下完成,基片预键合仅需真空干燥箱中施加一定压力实现高温键合与退火。
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