多拷贝高效表达重组菌丝霉素的毕赤酵母

    公开(公告)号:CN102409003B

    公开(公告)日:2013-05-15

    申请号:CN201010291818.5

    申请日:2010-09-26

    摘要: 本发明公开了一种多拷贝表达重组菌丝霉素的毕赤酵母的制备方法。该方法包括:根据毕赤酵母翻译的密码子偏爱性,设计出菌丝霉素表达基因的序列;将优化的菌丝霉素基因融合在表达载体pPICZαA的α-因子信号肽C端,构建单拷贝表达载体,该载体含有由起始信号元件醇氧脱氢酶强启动子(AOX)、α-因子信号肽基因及融合在其C端的菌丝霉素基因和终止信号元件AOX(TT)等组成的菌丝霉素表达盒;利用限制性内切酶BglII和BamHI粘性末端能互补的原则,通过反复酶切、连接和转化操作,获得含菌丝霉素基因的不同拷贝串联表达盒的重组质粒,电转化毕赤酵母后,在甲醇诱导下能高效分泌表达菌丝霉素,表达量与菌丝霉素基因拷贝数之间存在线性关系。本发明所构建的多拷贝高表达酵母细胞可用于提高产量、降低成本,适于菌丝霉素的规模化生产。

    一种酵母表达的牛乳铁蛋白衍生抗菌片段BLfA及其制备方法

    公开(公告)号:CN102408480A

    公开(公告)日:2012-04-11

    申请号:CN201010286875.4

    申请日:2010-09-20

    IPC分类号: C07K14/79 C12N15/12 C12N15/81

    摘要: 本发明涉及的是一种基因工程抗菌蛋白的制备方法,具体地说是一种牛乳铁蛋白衍生抗菌片段BLfA的真核表达蛋白及其制备方法。从荷斯坦奶牛乳腺组织中克隆了BLfA编码基因并构建重组表达载体,实现其在毕赤酵母中表达,摇瓶和5升发酵罐最大表达量分别为485和499mg/L;利用透明颤菌血红蛋白VHb在宿主菌胞内与rBLfA共表达,表达量提高了23%,达613mg/L;rBLfA经亲和纯化,纯度为93.8%;铁结合实验表明,rBLfA的Fe3+结合能力为0.330,释放Fe3+的pH范围为7.0-3.5;rBLfA具有抑制金黄色葡萄球菌生长的功能,MIC为6.5μmol/L。

    一种高抗氧化低致敏性饲用发酵豆粕的制备方法

    公开(公告)号:CN101990984A

    公开(公告)日:2011-03-30

    申请号:CN200910169666.9

    申请日:2009-08-31

    IPC分类号: A23K1/00 A23K1/14

    CPC分类号: Y02P60/877

    摘要: 本发明涉及生物发酵技术领域,以豆粕和麸皮为原料,利用微生物发酵技术有效去除豆粕中的大豆抗营养因子,同时得到富含分子量低于15KDa的多肽的优质发酵豆粕,尤其是一种固态发酵的制备高抗氧化低致敏性豆粕的微生物发酵工艺。原始出发菌株米曲霉(Aspergillus oryzae,CICC 40188)1株经过活化,扩大培养后,用含有0.12%土温(Tween)80的无菌水制备孢子数目为106/ml的孢子悬浮液,作为豆粕发酵接种液。以10%的接种量接种到豆粕发酵基料中(豆粕粉碎过20目,豆粕∶麸皮=3∶1,料水比=1∶0.9),混合均匀,于28℃发酵48h。于60℃烘干,对发酵前后的豆粕进行营养成分分析。

    一种水产养殖亚硝酸盐在线监测设备和监测方法

    公开(公告)号:CN118518584A

    公开(公告)日:2024-08-20

    申请号:CN202410608654.6

    申请日:2024-05-16

    IPC分类号: G01N21/01 G01N21/31 G01N21/78

    摘要: 本发明涉及一种水产养殖亚硝酸盐在线监测设备,包括柜子、过滤装置、过滤水体及试剂供给装置、分光光度测量装置、阀门组件和控制装置,过滤装置的出液端与过滤水体及试剂供给装置的进液端相连,过滤水体及试剂供给装置的出液端与分光光度测量装置的进液端相连,过滤水体及试剂供给装置的出液端、分光光度测量装置的进液端及出液端分别设有阀门组件,控制装置分别与过滤装置、过滤水体及试剂供给装置、分光光度测量装置和阀门组件相连。本申请能够实现检测水体亚硝酸盐浓度,并将数据发送到物联网平台或者手机等手持设备上,替代人工对养殖水质进行定期监测,方便技术人员随时随地进行查看和提供解决方案。

    一种吲哚-3-丙酸的合成方法
    58.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118239878A

    公开(公告)日:2024-06-25

    申请号:CN202410328012.0

    申请日:2024-03-21

    IPC分类号: C07D209/18

    摘要: 本发明公开了一种吲哚‑3‑丙酸的合成方法,属于有机合成技术领域。包括如下步骤:(1)在催化剂存在下,使得吲哚与式A所示化合物反应,得到式B所示化合物;(2)在碱性条件下,使得式B所示化合物发生水解反应,得到吲哚‑3‑丙酸。所述催化剂为ZrCl4、AlCl3和SnCl4中至少一种。本发明方法操作简单,副产物少,产率高,产品纯度高。本发明方法对设备要求低,试剂毒性小,价格低廉,便于工业化放大生产。本发明方法试剂来源广泛,生产周期短,可在短时间内大量生产。#imgabs0#

    一种鲸杆菌荚膜多糖及其在预防水产病毒病中的应用

    公开(公告)号:CN118165133A

    公开(公告)日:2024-06-11

    申请号:CN202410253079.2

    申请日:2024-03-06

    摘要: 本发明公开了一种鲸杆菌荚膜多糖及其在预防水产病毒病中的应用。所述鲸杆菌荚膜多糖的重均分子量与数均分子量的比值为1.04,数均分子量为4.12×105Da;其制备方法包括如下步骤:S1、将萃取液加入至鲸杆菌菌体中,搅拌后加入沉淀剂,继续搅拌,离心得上清液A;S2、向上清液A中加入分离液至无沉淀;加入无菌水,离心得上清液B;S3、向上清液B中加入解离液,离心得上清液C,向上清液C中加入保存液,混匀后于‑70~‑80℃下预冻2~24h后冷冻干燥。本发明提供的鲸杆菌荚膜多糖能够有效预防水产动物病毒病,如由鲤春病毒血症病毒引起的病毒病,并通过无菌斑马鱼和细胞模型验证了该效果的有效性,从而为预防水产病毒病提供了一种新的思路和手段。

    一种检测斑马鱼肠道氧分压的方法及其应用

    公开(公告)号:CN117660588A

    公开(公告)日:2024-03-08

    申请号:CN202311781281.4

    申请日:2023-12-22

    IPC分类号: C12Q1/10 C12R1/19

    摘要: 本发明公开了一种检测斑马鱼肠道氧分压的方法及其应用。本发明属于微生物应用技术和生物技术领域,具体涉及一种检测斑马鱼肠道氧分压的方法及其应用。本发明用于检测斑马鱼肠道氧分压的复合菌剂由大肠杆菌A和大肠杆菌B组成,大肠杆菌A为兼性好氧的大肠杆菌,含有质粒A,质粒A是表达抗生素A抗性基因的质粒;大肠杆菌B为大肠杆菌A的有氧呼吸缺陷突变体,含有质粒B,质粒B是表达抗生素B抗性基因的质粒。通过将复合菌剂接种至斑马鱼肠道中,测定复合菌剂在肠道中丰度的比值,根据比值确定斑马鱼肠道内氧分压水平。本研究的检测方法利用大肠杆菌定量测定斑马鱼肠道氧分压,能够为斑马鱼及其他鱼类肠道氧分压的相关研究提供方法学支撑。