-
公开(公告)号：CN111518777A
公开(公告)日：2020-08-11
申请号：CN202010426012.6
申请日：2020-05-19
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/34 , C12N15/866 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种表达血清4型禽腺病毒纤突蛋白F1的重组杆状病毒的构建方法，包括以下步骤：（1）构建FAdV‑4‑F1基因重组杆状病毒表达载体；（2）表达重组FAdV‑4蛋白的杆状病毒包装和传代；（3）将携带有FAdV‑4‑F1基因的杆状病毒基因组转染进sf9细胞，27℃培养箱中培养5‑7天，观察细胞病变情况；当细胞病变达到70%时收集细胞裂解液，离心去沉淀，作为种毒保存；进行病毒的传代，传至第3代时，作为种毒扩大培养。本发明所述的血清4型禽腺病毒纤突蛋白F1利用该杆状病毒载体表达，且表达水平高，含有His标签，可以方便后期的纯化步骤，可以制备成禽腺病毒4型亚单位疫苗，也可以作为建立FAdV‑4酶联免疫吸附试剂制备研发中的包被用抗原。
-
公开(公告)号：CN110684736A
公开(公告)日：2020-01-14
申请号：CN201910754620.7
申请日：2019-08-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90
Abstract: 本发明涉及到一种基于CRISPR-Cas9编辑技术的敲除鸡Shp-2基因的细胞系及其构建方法，本发明的原理和最核心的关键技术是科学合理的构建了靶向鸡Shp-2基因的sgRNA，然后将sgRNA克隆至带有Cas9基因的lentiCRISPR v2质粒并将质粒转染至细胞中，利用CRISPR-Cas9系统达到基因沉默，通过药物筛选和亚克隆的方法最后获得阳性单克隆细胞株，从而获得鸡源Shp-2敲除的细胞系。本发明目的是构建一种基于CRISPR-Cas9靶向敲除鸡Shp-2基因的方法，及其靶向鸡Shp-2基因的sgRNA，以期获得鸡源Shp-2基因敲除的细胞模型，用于相关疾病的研究。本发明基于CRISPR-Cas9靶向敲除鸡Shp-2基因的细胞系构建在相关领域未见报道，本发明将填补国内外相关技术的空白，具有较大的应用研究价值。
-
公开(公告)号：CN110483637A
公开(公告)日：2019-11-22
申请号：CN201910659588.4
申请日：2019-07-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/10 , C07K16/40 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/16 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种抗禽流感病毒神经氨酸酶N2单克隆抗体、编码基因及其应用，属于生物医学技术领域。抗禽流感病毒神经氨酸酶N2单克隆抗体特异性地识别禽流感病毒神经氨酸酶蛋白N2，具有抑制神经氨酸酶活性和中和病毒能力。本发明还克隆了抗禽流感病毒神经氨酸酶N2单克隆抗体的轻、重链可变区基因序列和氨基酸序列，确认了基因序列和氨基酸序列的唯一性。本发明涉及的单克隆抗体、可变区基因及氨基酸序列可用于N2的禽流感病毒的诊断和治疗药物研发等，具有广泛的临床应用价值。
-
公开(公告)号：CN110423785A
公开(公告)日：2019-11-08
申请号：CN201910455249.4
申请日：2019-05-29
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及到一种利用CRISPR-Cas9特异性靶向获得敲除鸡KPNA3基因的细胞系及其构建方法，本发明的原理和最核心的关键技术是科学合理的构建了靶向鸡KPNA3基因的sgRNA，之后转染带有sgRNA和Cas9基因的lentiCRISPR v2质粒，利用CRISPR-Cas9系统达到基因沉默，通过药物筛选杀死阴性细胞，随后通过亚克隆的方法获得单个细胞株，从而获得鸡源KPNA3敲除的细胞系。通过本发明，本发明基于CRISPR-Cas9靶向敲除鸡KPNA3基因的细胞系构建在相关领域未见报道，本发明将填补国内外相关技术的空白，具有较大的应用研究价值。
-
公开(公告)号：CN107607717A
公开(公告)日：2018-01-19
申请号：CN201710669646.2
申请日：2017-08-08
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535 , C07K14/075 , C12N15/70
Abstract: 本发明公开了一种基于F2蛋白的检测血清4型禽腺病毒抗体的间接ELISA试剂盒，包括包被有纤突蛋白基因F2表达产物的ELISA酶标板，阳性阴性对照，HRP标记的兔抗鸡二抗，样品稀释液、显色液以及洗涤液。本发明建立的FAdV-4抗体的间接ELISA试剂盒能特异性的检测出FAdV-4抗体，而与抗流感病毒血清(AIV)、抗马立克病毒血清(MDV)、抗新城疫病毒血清(NDV)、抗禽网状内皮组织增生症病毒血清(REV)以及SPF鸡血清不反应(图6)。因此，该试剂盒具有良好FAdV-4的特异性，能用于FAdV-4感染及免疫状况流行病学调查。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106349348A
公开(公告)日：2017-01-25
申请号：CN201610937104.4
申请日：2016-11-01
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C07K14/005 , C12N15/70 , C12N2750/10022 , C12N2800/101
Abstract: 本发明提供了一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法。该方法基于重组酶ExnaseTM II将线性化的pGEX-6p-1载体与GyV7病毒VP3基因片段PCR产物不经酶切连接反应，直接重组克隆技术；并转化到大肠杆菌，实现VP3蛋白表达；其中，用于PCR扩增GyV7病毒VP3基因的上、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。该方法操作简单、快速高效，获得的GyV7病毒VP3表达及纯化的蛋白，可直接提供VP3蛋白作为GyV7诊断抗原；作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体；为开展GyV7流行病学调查提供有效诊断试剂；并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。
-
公开(公告)号：CN106018780A
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201610327488.8
申请日：2016-05-17
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: G01N33/5302 , G01N21/6486
Abstract: 本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种基于F1蛋白的检测4型禽腺病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒。该试剂盒包括表达F1蛋白的293T细胞，FITC标记的羊抗鸡抗体，样品稀释液，洗涤液。本发明试剂盒具有良好的特异性；该试剂盒不仅能用于血清4型禽腺病毒感染状况流行病学调查，而且能有效用于监测免疫鸡群血清4型禽腺病毒抗体水平，用于评价免疫保护性抗体水平等。
-
公开(公告)号：CN105973854A
公开(公告)日：2016-09-28
申请号：CN201610327763.6
申请日：2016-05-17
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: G01N21/6486 , G01N33/5302
Abstract: 本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种基于F2蛋白的检测4型禽腺病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒。该试剂盒包括表达F2蛋白的293T细胞，FITC标记的羊抗鸡抗体，样品稀释液和洗涤液。本发明试剂盒具有良好的特异性。该试剂盒不仅能用于血清4型禽腺病毒感染状况流行病学调查，而且能有效用于监测免疫鸡群血清4型禽腺病毒抗体水平，用于评价免疫保护性抗体水平等。
-
公开(公告)号：CN118894915A
公开(公告)日：2024-11-05
申请号：CN202411032283.8
申请日：2024-07-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种可溶性鸡源PML蛋白及其高效原核表达方法和应用，所述PML蛋白命名为PML‑P2，如SEQ ID NO:1所示。本发明筛选的蛋白PML‑P2不仅高效表达，其融合蛋白免疫小鼠产生的多抗血清，不仅能够与鸡源PML发生特异性反应，还能有效识别人、犬的细胞中内源性PML蛋白，表现出优异的广谱反应性，同时该多抗血清还能在免疫沉淀试验中高效地将外源高表达的鸡PML蛋白进行免疫沉淀。本发明表达载体构建及纯化的PML‑P2融合蛋白将为探究鸡源PML生物学功能及其在疾病中的作用提供有效的免疫学试剂，也为其他物种相关生物学研究提供了有效生物学材料。
-
公开(公告)号：CN118879777A
公开(公告)日：2024-11-01
申请号：CN202410983164.4
申请日：2024-07-22
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9敲除鸡EphrinA2基因的细胞系的构建方法，包括如下步骤：设计特异性靶向鸡源EphrinA2基因的sgRNA；构建含有Cas9蛋白基因和特异性靶向鸡源EphrinA2基因的sgRNA的敲除质粒；对细胞进行转染，利用CRISPR‑Cas9系统达到基因沉默，随后通过亚克隆获得鸡源EphrinA2敲除细胞。本发明获得鸡源EphrinA2基因敲除的细胞模型，不仅方法成本低、效率高、简单易用，并且所构建的敲除鸡EphrinA2基因细胞系细胞活性显著降低，为解析EphrinA2在鸡体内中的功能作用及其在某些病毒入侵宿主中的作用与机制提供帮助。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
65
records
(took 0.026 seconds)
