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公开(公告)号：CN117482219A
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202311651974.1
申请日：2023-12-05
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: A61K39/012 , A61P33/02
Abstract: 本发明公开了一种球虫病基因工程活疫苗及其构建方法与应用。其中构建方法为将孢子生殖阶段的特异性基因、转录调控基因、高表达基因进行分析与挖掘，构建基因缺失虫株，分析其孢子生殖的效率，筛选相关靶基因及组合；将靶基因利用CRISPR/Cas9技术通过加标签的方式将DDD序列插入至靶基因的3’端，孢子生殖过程中加入DDD功能域的稳定剂，通过传代筛选，获得基因编辑的球虫卵囊，即为基因工程活疫苗虫株。本发明提供的基因工程活疫苗可以减少或杜绝疫苗子代卵囊对动物产生的副作用，具有极高的安全性与免疫效力，具备良好的经济效益、社会效益和广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN115541887A
公开(公告)日：2022-12-30
申请号：CN202210919546.1
申请日：2022-08-02
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及一种检测牛布鲁氏菌病特异性IgG和IgM含量的方法及应用。所述该检测方法由布病间接ELISA(iELISA)和竞争ELISA(cELISA)方法组成。采用布病阳性血清国家标准品(牛源，含量1000IU/mL)对布病iELISA和cELISA方法的检测灵敏度进行定量，使两种方法的检测灵敏度与布病补体结合试验(CFT)检测灵敏度一致，并最终以血清中牛布鲁氏菌病特异性抗体IgG和IgM含量不低于50IU/mL作为阳性临界值判定标准。该方法对同一份牛血清分别用布病iELISA和cELISA检测，可准确将待检牛分为布病阴性牛、布病可疑牛和布病阳性牛，为实施布病净化提供便捷有效的方法。
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公开(公告)号：CN115327100A
公开(公告)日：2022-11-11
申请号：CN202210969928.5
申请日：2022-08-12
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: G01N33/531 , C12N1/20 , G01N33/569 , G01N33/68 , C12R1/35
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体平板凝集抗原及其制备方法与应用。牛支原体平板凝集抗原使用牛支原体XBY01株制成，制备方法为将牛支原体XBY01株传代后制成种子菌液，再接种牛支原体培养基中扩大培养，收获，经活菌计数后，离心收获菌泥，加入1/10倍体积的含0.01％硫柳汞的PBS重悬灭活，按活菌计数结果调整抗原体积，加入终浓度0.03％的结晶紫溶液染色和菌液体积10％的甘油，混匀后分装保存。本发明制备的牛支原体平板凝集抗原，具有较高的敏感性和特异性，操作简单，结果易观察等优点，适合于牧场的牛支原体感染的快速筛查和检测。发明的工艺简单、成本低、稳定性好，适合于规模化生产和应用。
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公开(公告)号：CN115166239A
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN202210920913.X
申请日：2022-08-02
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/532 , G01N33/58 , G01N33/558
Abstract: 本发明涉及一种牛布鲁氏菌病初筛和确诊一体化抗体检测试纸条。所述该试纸条由初筛试纸条(试纸条1)和确诊试纸条(试纸条2)组成，均分别由PVC底板、样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫组成。所述初筛试纸条和确诊试纸条的样品垫相连接，连接处设置有加样孔。使用时，取待检血清滴入加样孔，根据初筛试纸条和确诊试纸条呈现的结果，可现场快速对待检样本做出布病阴性、阳性或可疑的判定。
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公开(公告)号：CN111808826B
公开(公告)日：2022-03-11
申请号：CN202010635269.2
申请日：2020-07-03
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N7/00 , A61K39/125 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供猪A型塞内卡病毒SVA/CH‑Fuj株及其应用。毒株CH‑Fuj具有免疫原性好、培养特性好、效价稳定等优点，将SVA/CH‑Fuj株接种ST细胞，收获培养物，用二乙烯亚胺灭活后，与ISA 201 VG佐剂混合乳化制成猪A型塞内卡病毒灭活疫苗。实验表明，利用本发明提供的猪A型塞内卡病毒灭活疫苗免疫2‑3周龄仔猪能够有效预防由猪A型塞内卡病毒引起的猪水疱性疾病，此疫苗具有安全、起效快、免疫期持久等优点。
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公开(公告)号：CN112964871A
公开(公告)日：2021-06-15
申请号：CN202110169040.9
申请日：2021-02-07
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543 , C12N15/70 , C12N15/41 , C07K14/085
Abstract: 本发明涉及一种猪脑心肌炎间接ELISA诊断试剂盒及其制备方法。本发明所述试剂盒以猪脑心肌炎病毒2A纯化蛋白作为ELISA抗体检测板上的包被抗原。本发明公开了制备及纯化2A蛋白的方法，即利用猪脑心肌炎病毒HB10株基因组DNA为模板，用特异性引物进行PCR扩增，扩增产物经酶切后构建原核表达载体pET28a‑2A，再进行诱导表达2A蛋白。本发明的ELISA诊断方法特异性强，结果稳定可靠，可特异性地检测出猪脑心肌炎病毒抗体，完全适用于猪脑心肌炎病毒感染后的诊断。
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公开(公告)号：CN112063596A
公开(公告)日：2020-12-11
申请号：CN202010872170.4
申请日：2020-08-26
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明提供一种鸽副黏病毒1型PPMV‑1/BJ‑C株及其应用。弱毒株PPMV‑1/BJ‑C是在鸽瘟病毒强毒株PPMV‑1/BJ基础上，将其F蛋白裂解位点突变为La Sota株对应位点，构建得到的。PPMV‑1/BJ‑C具有免疫原性好、培养特性好、效价稳定等优点，将鸽瘟病毒PPMV‑1/BJ‑C株经尿囊腔接种于9～11日龄SPF鸡胚，收获感染鸡胚尿囊液，用二乙烯亚胺灭活后，加入氢氧化铝佐剂制成鸽瘟病毒灭活疫苗。用PPMV‑1/BJ‑C株制备的灭活疫苗能产生较高的抗体，可预防鸽瘟病毒引起的ND，该疫苗具有安全、起效快、免疫期持久等优点，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN106191242B
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201610540114.4
申请日：2016-07-11
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种特异性表达人CD46转基因猪的实时荧光LAMP检测方法及试剂盒，通过筛选6条特异性引物对特异性表达人CD46转基因猪进行实时荧光LAMP检测，并优化了检测体系和反应条件。所述方法适用于现场快速筛查，闭管检测荧光扩增信号，避免了反应后的开盖操作，降低了气溶胶污染的风险，大大减少了发生假阳性的可能。同时，缩短了反应时间，45min内可以得出判定结果。
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公开(公告)号：CN107299088A
公开(公告)日：2017-10-27
申请号：CN201710560592.6
申请日：2017-07-10
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N7/00 , A61K39/265 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了牛传染性鼻气管炎病毒IBRV-B株及应用，本发明的牛传染性鼻气管炎病毒IBRV-B株具有免疫原性好、培养特性好等优点，将本发明的牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV-B株)接种MDBK细胞，收获培养物，用β-丙内酯(β-propiolactone)灭活后，与法国赛比克公司的商品化MontanideTM ISA15AVG佐剂混合乳化制成牛传染性鼻气管炎病毒灭活疫苗。实验证明，使用本发明制备得到的牛传染性鼻气管炎病毒灭活疫苗免疫断奶健康阴性牛能够预防由牛传染性鼻气管炎病毒引起的疾病，而且此疫苗具有安全、产生抗体快、免疫期持久等优点。
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公开(公告)号：CN106191242A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610540114.4
申请日：2016-07-11
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种特异性表达人CD46转基因猪的实时荧光LAMP检测方法及试剂盒，通过筛选6条特异性引物对特异性表达人CD46转基因猪进行实时荧光LAMP检测，并优化了检测体系和反应条件。所述方法适用于现场快速筛查，闭管检测荧光扩增信号，避免了反应后的开盖操作，降低了气溶胶污染的风险，大大减少了发生假阳性的可能。同时，缩短了反应时间，45min内可以得出判定结果。
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