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公开(公告)号：CN106718889A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611089724.3
申请日：2016-12-01
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种高同步化的抗松材线虫病赤松体细胞胚胎发生及植株再生方法，包括胚性愈伤组织的诱导、增殖，体细胞胚的成熟、萌发和转化；所述的体细胞胚的成熟培养采用液—固增殖‑固成熟方式进行。本发明的高同步化的抗松材线虫病赤松体细胞胚胎发生及植株再生方法，以抗松材线虫病赤松的未成熟合子胚为外植体，通过对抗病赤松未成熟合子胚已成功诱导获得的胚性愈伤组织进行体细胞胚成熟、萌发与植株再生等试验，成功获得了成熟的体细胞胚和再生植株，并移栽成活，在成熟培养基上产生体细胞胚的萌发率和植株转化率高，分别为67.2%和46.5%，为抗病赤松的大规模繁殖和工厂化生产提供了重要的科学依据和技术支撑。
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公开(公告)号：CN104372104B
公开(公告)日：2016-03-02
申请号：CN201410742299.8
申请日：2014-12-08
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种樟疫霉菌的LAMP检测引物组合物及其LAMP检测试剂盒和LAMP检测方法。该LAMP检测引物组合物由正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3、正向环引物LF和反向环引物LB组成。本发明的检测方法准确性高、特异性强、操作方便、实用性好、实现了恒温扩增，同时还为樟疫霉菌的检测提供了新的技术平台，可用于樟疫霉菌的高灵敏度快速检测，同时在病害侵染初期鉴定出病原物，能够对田间土壤中的樟疫霉菌进行检测。本发明对樟疫霉菌引起的疫病防治和对减少农药盲目使用，降低生产成本，减少农药的环境污染也具有重要意义。
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公开(公告)号：CN102487822B
公开(公告)日：2013-10-23
申请号：CN201110388418.0
申请日：2011-11-30
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种长期培养无菌松苗的方法，包括：（1）制备PDA平板备用；（2）制备无菌松树成熟种子，移入PDA琼脂平板，25℃，培养至萌发，获得无菌幼苗；（3）制备DCR液体培养基，pH5.8，分装于培养容器；（4）在底部带小孔容器底部垫上脱脂棉，上部填入珍珠岩，将该容器置于盛有DCR液体培养基的培养容器中，121℃高压灭菌，备用；（5）将无菌幼苗移植于珍珠岩中，于温度24~26℃，光照2000Lux、每日光照14~18h条件下长期培养，定期更换新鲜培养液，直至获得所需年龄的无菌松苗。本发明的培育无菌松苗的方法，经多次重复转接结果表明，采用该培养方法对无菌松苗进行转移不会对其根系或上部组织造成伤害，无菌松苗可在无菌的容器中茁壮生长，是一种简易且成功的长期培养无菌松苗的方法。
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公开(公告)号：CN102732435B
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201210235182.1
申请日：2012-07-06
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种马尾松根际解磷真菌泡盛曲霉及其应用，其分类命名为泡盛曲霉（Aspergillusawamori）JP-NJ1，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCCNO：M 2012166，保藏日期为：2012年5月14日。本发明的泡盛曲霉JP-NJ1对难溶性磷酸盐磷酸钙的溶解能力强；通过温室盆栽试验证实，JP-NJ1菌剂能够明显促进马尾松苗木的生长。因此，本发明公开的泡盛曲霉JP-NJ1为开发马尾松促生菌肥提供了优良的菌株资源，具有较好的应用开发前景。
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公开(公告)号：CN102732446B
公开(公告)日：2013-07-10
申请号：CN201210111439.2
申请日：2012-04-16
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种短芽孢杆菌，其分类命名为短芽孢杆菌（Brevibacillusreuszeri）MPt17，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCCNO：M2011433，保藏日期：2011年12月1日。本发明的短芽孢杆菌MPt17具有的优势包括：能够明显促进外生菌根真菌彩色豆马勃Pisolithustinctorius和红绒盖牛肝菌Xerocamuschrysenteron的生长，并通过温室盆栽试验证实，双接种菌根辅助细菌MPt17与彩色豆马勃或红绒盖牛肝菌能明显促进马尾松苗的生长发育。因此，本发明的短芽孢杆菌MPt17能为开发马尾松促生菌肥提供优良的菌株资源，具有较好的应用开发前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102604860B
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201210026711.7
申请日：2012-02-07
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种分离自松树根际土壤、高效溶解难溶性无机磷和有机磷的多噬伯克霍尔德氏菌及其应用。其分类命名为多噬伯克霍尔德氏菌（Burkholderiamultivorans）WS-FJ9，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号是CCTCCNO：M2011435，保藏日期：2011年12月1日。本发明的多噬伯克霍尔德氏菌WS-FJ9菌株在液体摇培的情况下，对磷酸三钙、磷酸铝和卵磷脂具有较强的溶解效果，与对照相比差异显著；WS-FJ9菌株对松枯梢病原菌（Sphaeropsissapinea）具有较强的拮抗活性；将WS-FJ9制成菌剂接种湿地松能明显促进苗木的生长。本发明为开发松树生物菌肥提供了优良的菌株资源。
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公开(公告)号：CN102181544B
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN201110088765.1
申请日：2011-04-11
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种用于检测外生菌根真菌（Ectomycorrhizalfungi,EMF）彩色豆马勃（Pisolithustinctorius）的分子检测方法及其应用，所述的引物包括引物PtF和引物PtR，引物PtF序列为：5'-GGGACCTGTGCGTTTCGT-3'；引物PtR序列为：5'-CATGCCCACCCGCTAATG-3'；所述应用为特异性引物在快速检测林木外生菌根真菌彩色豆马勃中的应用。引物PtF和引物PtR具有很强的特异性，巢式PCR检测灵敏度能够达到常规PCR的1000倍。本发明以待测样品DNA为模板，以引物PtF和引物PtR为特异性引物，进行巢式PCR反应，产物进行电泳检测后即可快速检测外生菌根真菌彩色豆马勃。该方法为林木EMF彩色豆马勃的检测提供了一种准确、快速的途径。
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公开(公告)号：CN102732446A
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201210111439.2
申请日：2012-04-16
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种短芽孢杆菌，其分类命名为短芽孢杆菌（Brevibacillusreuszeri）MPt17，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO：M2011433，保藏日期：2011年12月1日。本发明的短芽孢杆菌MPt17具有的优势包括：能够明显促进外生菌根真菌彩色豆马勃Pisolithustinctorius和红绒盖牛肝菌Xerocamuschrysenteron的生长，并通过温室盆栽试验证实，双接种菌根辅助细菌MPt17与彩色豆马勃或红绒盖牛肝菌能明显促进马尾松苗的生长发育。因此，本发明的短芽孢杆菌MPt17能为开发马尾松促生菌肥提供优良的菌株资源，具有较好的应用开发前景。
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公开(公告)号：CN102643801A
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201210145537.8
申请日：2012-05-10
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种适用于全基因组测序的产糖被细菌基因组DNA的提取方法，向产糖被细菌的培养物中加入提取缓冲液和溶菌酶，37℃下静置10min，再加入蛋白酶K，65℃下静置1h；加入苯酚-氯仿-异戊醇的混合溶液，抽提；加入氯仿-异戊醇混合溶液，抽提；加入冷乙醇和醋酸钠，离心，沉淀经乙醇洗涤后室温干燥，加DNA提取缓冲液溶解；加入RNA酶，37℃下静置10min；加入PEG6000，混匀，50℃下静置10min；加入苯酚-氯仿-异戊醇的混合溶液，抽提；加入氯仿-异戊醇混合溶液，抽提；加入冷乙醇和醋酸钠溶液，离心，沉淀经乙醇洗涤后室温干燥，加ddH2O或者TE缓冲液溶解，即为提取到的DNA溶液。
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公开(公告)号：CN101914469A
公开(公告)日：2010-12-15
申请号：CN201010227990.4
申请日：2010-07-15
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一株外生菌根辅助细菌蜡状芽孢杆菌HB12，其分类命名为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)，已保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，其保藏编号是CCTCC NO：M 209025，保藏日期：2009年2月18日。本发明的蜡状芽孢杆菌HB12为植物根际促生细菌，对黑树生长具有促进作用，能够促进外生菌根真菌美味牛肝菌的生长，其与美味牛肝菌双接种对黑松的促生效果优于两者单接种处理；蜡状芽孢杆菌HB12对松树苗木猝倒病病原丝核菌具有抑制作用；温室防治试验表明，蜡状芽孢杆菌HB12菌株能有效防治松树苗木猝倒病。
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