一种提高枯草芽孢杆菌脂肪酶A的热稳定性的方法

    公开(公告)号:CN103966186A

    公开(公告)日:2014-08-06

    申请号:CN201410137657.2

    申请日:2014-04-08

    CPC classification number: C12N9/96 C12N9/20 C12Y301/01003

    Abstract: 本发明属于酶工程技术领域,涉及一种提高枯草芽孢杆菌脂肪酶A热稳定性的方法。本发明以枯草芽孢杆菌脂肪A为研究对象,首先从RCSB数据库中获取其晶体结构,再利用分子动力学分析其不同Loop区域的柔性;经由上述理性分析,并结合“脯氨酸效应”理论,将筛选得到柔性较高Loop区域的甘氨酸残基突变为脯氨酸;再通过分子动力学模拟验证筛选得到的突变结果;最终,通过枯草芽孢杆菌脂肪酶A突变株的热稳定性实验,验证热稳定性改造的热点残基。

    一种功能化离子液体修饰的脂肪酶及其修饰方法

    公开(公告)号:CN103013952B

    公开(公告)日:2014-07-23

    申请号:CN201310005284.9

    申请日:2012-01-16

    Inventor: 胡燚 黄和 贾儒

    Abstract: 本发明公开了一种功能化离子液体修饰的脂肪酶及其修饰方法。将含氨基的功能化离子液体、NHS、EDC·HCL与脂肪酶按摩尔比100-300:1:1-3:1溶于MES,在0-4℃混合反应3-10h,即得所述的功能化离子液体修饰的脂肪酶。本发明在脂肪酶表面分别引入带有氨基的功能化离子液体,通过与脂肪酶分子氨基酸残基发生共价结合,影响了酶活性中心的空间结构,强化了脂肪酶的催化性能。

    一种提高枯草芽孢杆菌脂肪酶A热稳定性的方法

    公开(公告)号:CN103243078A

    公开(公告)日:2013-08-14

    申请号:CN201310208383.7

    申请日:2013-05-29

    Abstract: 本发明属于酶工程技术领域,涉及一种提高枯草芽孢杆菌脂肪酶A热稳定性的方法。本发明以枯草芽孢杆菌脂肪A为研究对象,首先筛选突变热点区域;再确定位于蛋白质表面且柔性较大区域的氨基酸位点;结合上述两步理性分析,筛选得到的氨基酸位点突变成天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸四种氨基酸残基的任意一种,并以该氨基酸为中心,在4Å范围内寻找上述4种氨基酸中带相反电荷的氨基酸残基,从而确定突变位点及突变残基;基于对酶结构与功能关系的认知,再解析离子键引入对稳定枯草芽孢杆菌脂肪脂肪酶A蛋白结构的作用机制;最终,通过枯草芽孢杆菌脂肪酶A突变株的热稳定性实验,验证热稳定性改造的热点残基。

    一种功能化离子液体修饰的脂肪酶及其修饰方法

    公开(公告)号:CN103013952A

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201310005284.9

    申请日:2012-01-16

    Inventor: 胡燚 黄和 贾儒

    Abstract: 本发明公开了一种功能化离子液体修饰的脂肪酶及其修饰方法。将含氨基的功能化离子液体、NHS、EDC·HCL与脂肪酶按摩尔比100-300:1:1-3:1溶于MES,在0-4℃混合反应3-10h,即得所述的功能化离子液体修饰的脂肪酶。本发明在脂肪酶表面分别引入带有氨基的功能化离子液体,通过与脂肪酶分子氨基酸残基发生共价结合,影响了酶活性中心的空间结构,强化了脂肪酶的催化性能。

    一种功能化离子液体修饰的介孔分子筛在酶固定化中的应用

    公开(公告)号:CN101724619B

    公开(公告)日:2012-02-01

    申请号:CN200910264822.X

    申请日:2009-12-24

    Abstract: 本发明属于固定化酶载体领域,公开了一种功能化离子液体修饰介孔分子筛在酶固定化中的应用。该介孔分子筛表面能与酶氨基酸残基作用结合的来自于功能化离子液体的有机官能团。本发明利用离子液体的可设计性,在介孔材料表面分别引入带有烷基、氨基、羧基、羟基等官能团的功能化离子液体,通过这些基团与酶分子氨基酸残基发生静电、氢键、疏水键等作用,增强了载体与酶的结合力,改变了酶所处的微环境,改善了固定化酶的催化性能。本发明将功能性离子液体修饰介孔材料用于酶的固定化,不仅仅是提出了一个全新的概念,更丰富了介孔材料的表面修饰方法,也拓展了离子液体和介孔材料在酶工程领域中的应用。

    一种氨基葡萄糖硫酸盐的制备方法

    公开(公告)号:CN102276663A

    公开(公告)日:2011-12-14

    申请号:CN201110142458.7

    申请日:2011-05-30

    Inventor: 胡燚 黄和 贾儒

    Abstract: 本发明提供了一种氨基葡萄糖硫酸盐的制备方法。该方法所述的水解为将壳聚糖与含硫酸氢盐的酸性离子液体在水中水解反应2~5小时;其中,壳聚糖与含硫酸氢盐的酸性离子液体的质量体积比1∶3~5,水的用量为壳聚糖质量的3~6倍,反应温度为80~140℃。该方法生产过程中无酸雾及尾气,并且产品不含有氯离子,安全无污染;本发明使用了含硫酸氢盐的酸性离子液体,反应时间短,收率高,离子液体可多次重复使用,整个生产工艺简单,得到产品的纯度及产率高,成本低,是绿色环保高效的生产工艺。

    一种在低共熔溶剂中酶法合成葡萄糖酯的方法

    公开(公告)号:CN118547026A

    公开(公告)日:2024-08-27

    申请号:CN202410726129.4

    申请日:2024-06-06

    Inventor: 胡燚 亓媛 年彬彬

    Abstract: 本发明提供了一种在低共熔溶剂中酶法催化合成葡萄糖月桂酸酯的方法。以环己酮为氢键供体,月桂酸为氢键受体,两者以2:1的摩尔比进行加热搅拌,以此生成实验所需的低共熔溶剂。该方法所制的低共熔溶剂不仅具有保持酶活性能的优点,而且溶剂性能较好,可用于葡萄糖酯的酶法合成。步骤包括:葡萄糖和月桂酸乙烯酯加入到15mL反应管中,然后加入诺维信435,以及环己酮:月桂酸(2:1)溶剂,于60℃,300r/min条件下进行搅拌反应。反应48小时后以液相监测反应收率,葡萄糖月桂酸酯的收率为98.85%。本发明为葡萄糖酯的酶法合成提供了新思路。

    一种温和条件下钴催化脲基导向芳烃的高选择性单烯基化的方法

    公开(公告)号:CN115677539A

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202211354100.5

    申请日:2022-11-01

    Abstract: 本发明公开了一种温和条件下钴催化脲基导向芳烃的高选择性单烯基化的方法,将含有式Ⅰ所示的1,1‑二甲基‑3‑苯基脲类化合物、式Ⅱ所示烯烃、五甲基环戊二烯羰基二碘钴,氧化剂,添加剂,金属活化剂双三氟甲烷磺酰亚胺银盐的混合溶液进行反应,即得如Ⅲ所示的反应产物。本发明方法具有反应条件温和、副反应少、反应选择性高等特点,并且在反应过程中使用廉价的金属催化剂和非金属氧化剂催化,反应节能高效,生产成本低,环境友好,适于推广应用。

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