公开(公告)号：CN108753642A

公开(公告)日：2018-11-06

申请号：CN201810441314.3

申请日：2018-05-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 李恒 ,  史劲松 ,  郝瑶 ,  许正宏 ,  龚劲松 ,  李会 ,  季珂 ,  杨敏

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/88 ,  C12P19/12 ,  C12P19/00 ,  C12R1/20

Abstract: 本发明公开了一株产褐藻胶裂解酶的约氏黄杆菌，属于生物技术领域。本发明从土壤及河水样品中分离出约氏黄杆菌(Flavobacterium johnsoniae)WX‑11，即约氏黄杆菌CGMCC No.14444，该菌株营养要求简单，发酵时间短，应用于褐藻胶裂解酶生产中可显著缩短生产周期，降低生产成本。本发明还公开了利用此菌种制备褐藻胶裂解酶及对含有褐藻酸盐的高粘原料的降粘处理。本发明提供的约氏黄杆菌WX‑11所产的褐藻胶裂解酶可降解海藻酸钠，生成具有生物活性的褐藻寡糖，可广泛应用于农业、食品、饲料添加、医药及海藻加工等领域。

公开(公告)号：CN107365726A

公开(公告)日：2017-11-21

申请号：CN201710666935.7

申请日：2017-09-28

Applicant: 江南大学

Inventor： 龚劲松 ,  许正宏 ,  董婷婷 ,  史劲松 ,  李恒 ,  窦文芳 ,  蒋敏

IPC: C12N1/20 ,  C12N13/00 ,  C12N15/01 ,  C12P17/12 ,  C12R1/40

CPC classification number: C12R1/40 ,  C12N13/00 ,  C12N15/01 ,  C12P17/12

Abstract: 本发明的目的是提供一种结合ARTP诱变和OPC-TCA微量酶反应法高通量筛选腈类底物耐受性提升的产腈水解酶恶臭假单胞菌突变体的方法，属于工业生物技术领域。经OPC-TCA微量酶反应初筛、摇瓶复筛及传代最终获得一株突变体mut-D3，在较高底物终浓度为125mM情况下，该菌株的底物耐受性显著提高，同时突变体的腈水解酶酶活是野生菌的1.51倍，经20次传代后酶活仍保持稳定。该突变株能高效转化3-氰基吡啶合成烟酸，烟酸累积产量相比野生菌明显提高。本发明完全符合工业化腈水解酶产生菌株的诱变和筛选需要，并可应用于烟酸的生物合成，具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN106086103A

公开(公告)日：2016-11-09

申请号：CN201610542267.2

申请日：2016-07-11

Applicant: 江南大学

Inventor： 许正宏 ,  龚劲松 ,  史劲松 ,  窦文芳 ,  董婷婷

IPC: C12P17/12 ,  C12N11/00 ,  A23K20/174 ,  C07D213/80 ,  C07D213/803 ,  C12R1/125

CPC classification number: Y02P20/588 ,  C12P17/12 ,  C07D213/80 ,  C07D213/803 ,  C12N11/00

Abstract: 本发明公开了一种利用多级膜分离法和喷雾干燥技术从生物转化液中分离提取饲料级烟酸的方法，包括以固定化细胞为催化剂，以3‑氰基吡啶为底物，进行生物转化获得含烟酸的反应液，采用100nm‑10μm的微滤膜、截留分子量为1000‑3000Da的超滤膜、200‑300Da的纳滤膜等多级膜分离技术去除转化液中颗粒物、可溶性杂蛋白、色素等杂质，同时使转化液浓缩，在喷雾干燥机进行干燥，进口温度为210‑240℃，出口温度为60‑100℃，经过喷雾干燥即获得烟酸产品，烟酸提取总收率可达到85％以上。该方法操作简便、成本低廉、产品收率高、污染废水排量少，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN105819912A

公开(公告)日：2016-08-03

申请号：CN201610144697.9

申请日：2016-03-14

Applicant: 扬州日兴生物科技股份有限公司 ,  江南大学

Inventor： 张超 ,  史劲松 ,  丁振中 ,  冯小海 ,  柳志强 ,  孙达锋 ,  胡忠策 ,  谢志刚 ,  李鹏 ,  龚劲松 ,  张晓娟 ,  方祥 ,  赵耀

IPC: C05F11/08 ,  C12N1/14 ,  C12R1/885

CPC classification number: C05F11/08 ,  C12N1/14

Abstract: 本发明公开了一种富含多糖、富含解磷解钾的生态菌肥的生产方法，包括如下步骤：1)木霉种子培养；2)发酵培养；3)酶解提取。本发明中菌肥制作由于前面工序的酶法水解，水液体中含有大量碳源、氮源可供利用，带渣水解液经挤压，固形物干燥待用，液体经成分调配和pH调配后进入发酵罐，接种胶质或枯草、短小等芽孢杆菌进行发酵，结束后过滤获得菌体，添加到已干燥好的固体物料中，拌料后晾干或低温干燥获得生态菌肥。

公开(公告)号：CN105177089A

公开(公告)日：2015-12-23

申请号：CN201510482649.6

申请日：2015-08-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 史劲松 ,  龚劲松

IPC: C12P19/26 ,  C12R1/885

Abstract: 本发明涉及一种利用木霉属菌种二次发酵提升菌丝体废渣中几丁质含量的方法。采用生长旺盛、代谢能力强、产纤维素酶能力突出的木霉菌种，以工业柠檬酸发酵中废弃玉米菌丝体废渣为基本培养基，并在其中添加适量硫酸铵等氮源，进行二次固态发酵，提升菌丝体废渣中的几丁质含量，本发明技术方案不仅为大宗发酵产品柠檬酸发酵菌丝体废渣的资源化利用提供了一条新途径，而且为重要工业原料几丁质的生物法生产提供了新的思路。该方法所得几丁质产品生产成本低、产量高、环境友好，而且使柠檬酸发酵废弃残渣得以有效利用，提高了资源综合利用价值，减少了环境污染，有利于环境保护。

公开(公告)号：CN102936590B

公开(公告)日：2014-04-16

申请号：CN201210433096.1

申请日：2012-11-05

Applicant: 江南大学 ,  江西省德兴市百勤异VC钠有限公司

Inventor： 许正宏 ,  朱小燕 ,  李恒 ,  史劲松 ,  龚劲松 ,  钱建瑛 ,  孙文敬 ,  周强

IPC: C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12R1/40

Abstract: 本发明涉及一种新型腈水解酶及其基因的克隆和表达。从恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）XY4（编号CGMCC 3830）的总DNA获得腈水解酶基因SEQIDNO:1，该基因全长1113个核苷酸，编码370个氨基酸SEQIDNO:2。本发明还公开了重组腈水解酶的构建、高效表达和纯化的方法，以及纯化重组腈水解酶的最适作用温度和pH。以质粒pET28a(+)为表达载体，以E.coli Rosetta-gami(DE3)为表达宿主，实现腈水解酶基因的高效表达。重组腈水解酶最适作用温度为55℃，最适作用pH为7.5，能高效转化3-氰基吡啶为烟酸，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。

公开(公告)号：CN102936590A

公开(公告)日：2013-02-20

申请号：CN201210433096.1

申请日：2012-11-05

Applicant: 江南大学

Inventor： 许正宏 ,  朱小燕 ,  李恒 ,  史劲松 ,  龚劲松 ,  钱建瑛

IPC: C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12R1/40

Abstract: 本发明涉及一种新型腈水解酶及其基因的克隆和表达。从恶臭假单胞菌（Pseudomonasputida）XY4（编号CGMCC No.3830）的总DNA获得腈水解酶基因SEQ ID NO:1，该基因全长1113个核苷酸，编码370个氨基酸SEQ ID NO:2。本发明还公开了重组腈水解酶的构建、高效表达和纯化的方法，以及纯化重组腈水解酶的最适作用温度和pH。以质粒pET28a(+)为表达载体，以E.coliRosetta-gami(DE3)为表达宿主，实现腈水解酶基因的高效表达。重组腈水解酶最适作用温度为55℃，最适作用pH为7.5，能高效转化3-氰基吡啶为烟酸，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。

公开(公告)号：CN120060221A

公开(公告)日：2025-05-30

申请号：CN202510235821.1

申请日：2025-02-28

Applicant: 江南大学

Inventor： 龚劲松 ,  卞诗倩 ,  史劲松 ,  许正宏 ,  苏畅 ,  李恒 ,  刘仪琳 ,  吴矗懋

IPC: C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P7/40 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及提高脂肪腈水解酶底物特异性和催化活性的改造方法及改造获得的突变体，属于酶工程技术领域。本发明以氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的待改造亲本腈水解酶出发，将其与脂肪腈底物结合，确定蛋白质识别通道中与底物结合相关的待改造位点，综合定点突变、饱和突变、组合突变和迭代突变，结合半理性设计和机器学习的方法，确定亲本腈水解酶中与底物结合相关的关键位点及与其协同发挥作用的临近位点，筛选得到一系列对脂肪腈底物特异性和催化活性提升的腈水解酶突变体，对3‑氯丙腈底物的转化率达99％以上，酶活性最高为58.35U/mL，分5个批次添加3‑氯丙腈后转化在190分钟内完成，累计产物浓度达到108.52g/L，实现了脂肪腈底物的高效转化。

公开(公告)号：CN119979388A

公开(公告)日：2025-05-13

申请号：CN202510113006.8

申请日：2025-01-24

Applicant: 上海韬睿生物科技有限公司 ,  江南大学

Inventor： 王康 ,  王真真 ,  马旭东 ,  陆剑文 ,  彭思明 ,  谢楠 ,  钱建瑛 ,  史劲松 ,  龚劲松 ,  苏畅 ,  徐凌锋 ,  许正宏

IPC: C12N1/20 ,  A23J3/34 ,  C12N9/52 ,  C12N5/077 ,  C12N5/00 ,  C12P1/04 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明涉及一株副短短芽孢杆菌及其在组织分离中的应用，属于生物技术领域。本发明的副短短芽孢杆菌(Brevibacillusparabrevis)JN‑6，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.29951，保藏日期为2024年03月07日。本发明所述的副短短芽孢杆菌具有胶原蛋白降解能力，所产出的胶原蛋白酶能够用于脂肪组织分离，进一步培养为脂肪干细胞。使用所产胶原酶进行消化分离，可获得细胞数6.17×106/mL，可对脂肪干细胞进行有效的分化，具有很好的应用前景。

公开(公告)号：CN118995556A

公开(公告)日：2024-11-22

申请号：CN202411340374.8

申请日：2024-09-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 李恒 ,  位薇 ,  史劲松 ,  龚劲松 ,  蒋敏 ,  苏畅 ,  许正宏

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/56 ,  C12N9/38 ,  C12N15/70 ,  C12P19/14 ,  C12P19/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种分泌表达β‑半乳糖苷酶的大肠杆菌及其应用，属于基因工程技术领域。本发明公开的大肠杆菌在出发菌株中使用pET28a载体异源表达德氏乳杆菌保加利亚亚种来源的β‑半乳糖苷酶，核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。表达体系中添加8‑30mM浓度的乳糖诱导16‑28小时，使该重组大肠杆菌胞外表达β‑半乳糖苷酶，制备得到的β‑半乳糖苷酶水解活性最高达到1.3×105U/mL，能够应用于以乳糖为底物合成低聚半乳糖，乳糖的转化率达到98％，低聚半乳糖的生成率达到71％，且具有良好的聚合度。本发明提供的大肠杆菌及其分泌表达的高活性β‑半乳糖苷酶具有广阔的应用前景。