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公开(公告)号：CN116240258A
公开(公告)日：2023-06-09
申请号：CN202211736595.8
申请日：2022-12-31
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明涉及一种醋酸可的松的微生物发酵制备方法，所述方法包括：将含有3‑甾酮‑1‑脱氢酶的微生物接种至发酵培养基，加入底物醋酸可的松，并添加细胞壁干扰剂和表面活性剂，进行微生物发酵，发酵完成后，于发酵液中获得所述醋酸可的松。本发明的有益效果主要体现在：本发明采用细胞壁干扰剂提高了细胞壁的通透性，显著提高对甾醇的转化效率；本发明将底物与表面活性剂混合后破碎，增加了底物的分散性，从而提高甾体进出细胞膜的能力，进一步提高了转化率；本发明采用采用分批投料，有效的缓解了底物对菌体的毒害作用，有利于转化。
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公开(公告)号：CN116179459A
公开(公告)日：2023-05-30
申请号：CN202211704774.3
申请日：2022-12-29
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明涉及一种多酶协同表达重组基因工程菌，以及其在生物催化制备L‑2‑氨基丁酸中的应用。本发明通过构建亮氨酸脱氢酶基因和甲酸脱氢酶基因共表达体系，转化至表达菌中得到重组基因工程菌，以经发酵培养的重组基因工程菌活细胞作为催化剂应用于制备L‑2‑氨基丁酸的催化反应体系中，生产效率高，当L‑苏氨酸投料量为300g/L时，反应12h，转化率达99％以上，有效提高了催化高浓度底物生成L‑2‑氨基丁酸的能力。本发明使用全细胞作为催化剂，避免了酶的纯化，避免了破碎细胞，操作简便；两个酶在一个细胞中，可减少空间位阻，加快反应速度；以去离子水为反应介质构成反应体系，反应产物提纯方便；反应过程中底物浓度高，节约生产成本和时间。
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公开(公告)号：CN113621592B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202110560336.3
申请日：2021-05-21
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种转氨酶突变体以及其编码基因，以及其在微生物催化2‑羰基‑4‑[羟基(甲基)膦酰基]丁酸为底物不对称合成L‑草铵膦中的应用。所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID:1所示，其突变体是将SEQ ID:1所示的氨基酸序列的第138和141位中的一个进行单位点突变或组合突变获得的。本发明实现了高转化率转氨酶活力突变体基因的高效表达，酶活最高可达3827U/g。本发明转氨酶突变体在温度40℃，以pH 8.0缓冲液为反应介质进行生物催化反应获得L‑草铵膦，收率高达99％，产物e.e.值达到99％，具有较好应用前景。
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公开(公告)号：CN111100834B
公开(公告)日：2023-03-31
申请号：CN201911418780.0
申请日：2019-12-31
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明涉及一种提高基因工程菌泛酸产量的构建方法及菌株，以及该基因工程菌在微生物发酵制备D‑泛酸中的应用。本发明通过(1)加强lpd基因的表达(2)敲除glk、galP破坏葡萄糖非PTS转运系统，加强ptsG基因的表达而加强葡萄糖PTS转运系统(3)敲除yfbQ、ppsA基因(4)敲除poxB、pflB、ldhA基因(4)敲除ilvE基因(5)在质粒上引入异源的乙酰乳酸合酶基因alsS(6)在质粒上引入异源的泛酸转运体panT，最终得到最优的D‑泛酸高产大肠杆菌基因工程菌株。D‑泛酸效价从2.76g/L提高到6.33g/L。
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公开(公告)号：CN115820791A
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202211483955.8
申请日：2022-11-24
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明提供了一种基于麦角固醇为靶标筛选高产赤霉素菌株的方法，通过筛选靶标麦角固醇抗生素的耐药菌株，可以更容易得到高产赤霉素突变菌株。本发明的有益效果主要体现在：本发明提供了一种基于麦角固醇为靶标筛选高产赤霉素菌株的方法，该方法使用麦角固醇为靶标的抗生素对进化工程菌株进行初筛，能淘汰大量与麦角固醇代谢途径不相关的突变株，由于麦角固醇与赤霉素为同一代谢路径上的分支代谢途径，该筛选大幅度缩小筛选范围，可更高效地得到高产赤霉素菌株；本方法通过验证少量的突变菌株即可获得高产的突变菌，是实用可行的筛选策略。
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公开(公告)号：CN115820443A
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202211253301.6
申请日：2022-10-13
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种高产S‑腺苷‑L‑蛋氨酸的酿酒酵母工程菌及其应用，所述酿酒酵母工程菌以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZJ10041菌株为底盘菌株，将其基因组中的SOD1基因敲除，获得高产S‑腺苷‑L‑蛋氨酸的酿酒酵母ZJ10041‑△SOD1菌株。本发明构建的酿酒酵母工程菌ZJS10041△SOD1在500mL摇瓶发酵中产量提高在20％以上。优化后的500mL摇瓶发酵培养基培养ZJS10041△SOD1菌株的发酵生产，S‑腺苷‑L‑蛋氨酸的产量提高至1.73±0.02g/L。ZJS10041△SOD1菌株在5L发酵罐72h发酵中产量提高到了7.43g/L。
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公开(公告)号：CN115786137A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211504379.0
申请日：2022-11-28
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种中国被毛孢固体培养基及其制备方法和应用，解决中国被毛孢产孢少，培养周期较长的问题。固体培养基成分主要由玉米浸粉、可溶性淀粉、琼脂粉、水分组成。本发明的有益之处在于：本发明提供的中国被毛孢固体培养基及其培养方法，能够促进中国被毛孢固体培养的芽生孢子生长速率，并且固体培养基原料易得，成本低，制作方法简便，制作方法要求低，适于推广使用。
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公开(公告)号：CN112458127B
公开(公告)日：2022-12-30
申请号：CN202011403739.9
申请日：2020-12-04
申请人： 浙江华康药业股份有限公司 , 浙江工业大学
摘要： 本发明涉及一种提升生物质高固酶解率的方法，通过筛分生物质底物的粒度，对粗、细颗粒生物质底物采用不同的水分控制方式，再控制粗、细颗粒生物质底物混合后整体含水量，以达到降低酶解初期粘度，提升液化速度，最终提升生物质高固酶解率。本发明的酶解体系易于构建，降低设备要求，节省能耗，提升酶解效率，操作过程简单，利于工业化生产和应用。
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公开(公告)号：CN115261367A
公开(公告)日：2022-11-01
申请号：CN202210646849.0
申请日：2022-06-08
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种纤维二糖差向异构酶突变体及其应用，所述突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第335位或第271位进行突变获得。本发明筛选得到一种耐高温纤维二糖差向异构酶突变体，增强了70℃下的酶半衰期，提高了酶对合成乳果糖所用底物乳糖的底物亲和力和转化效率。运用含有改造酶的基因工程菌进行生物转化，产物乳果糖得率显著增加。本发明展示了纤维二糖差向异构酶在合成乳果糖绿色环保、毒性低，副产物少和产物得率高的技术优势，经过分子改造获得的纤维二糖差向异构酶突变体扩展了相对稀少的乳果糖异构酶酶库，展示了重要的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN112852635B
公开(公告)日：2022-10-25
申请号：CN202110063583.2
申请日：2021-01-18
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明涉及一株通过UV‑ARTP诱变方法筛选到的生长周期明显缩短的筑波链霉菌及其应用。所述菌株为筑波链霉菌ZJBN2001(Streptomyces tsukubensisZJBN2001)，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期2020年12月10日，保藏编号CCTCC NO：M 2020883，保藏地址为中国武汉，武汉大学，邮编430072。本发明的有益效果主要体现在：(1)本发明通过UV‑ARTP诱变的方法得到了一株生长周期明显缩短的菌株；(2)采用本发明方法诱变育种获得的筑波链霉菌ZJBN2001，相对原始菌株S1，他克莫司产量提高了100％，能够作为基因工程菌的原始菌株。(3)通过本发明方法可以得到发酵周期显著缩短的菌株，对于工业生产有着巨大的意义。
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