酵母展示脂肪酶催化合成维生素A乳酸酯的方法

    公开(公告)号:CN102212602A

    公开(公告)日:2011-10-12

    申请号:CN201110110429.2

    申请日:2011-04-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成维生素A乳酸酯的方法,包括:将维生素A醋酸酯和乳酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,无氧条件下于50~60℃反应10~14小时,分离、纯化制得维生素A乳酸酯;将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;本发明通过将脂肪酶展示在细胞外,利用该酶制剂催化合成维生素A乳酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。

    酵母展示脂肪酶催化合成葡萄糖月桂酸酯的方法

    公开(公告)号:CN102212580A

    公开(公告)日:2011-10-12

    申请号:CN201110110787.3

    申请日:2011-04-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成葡萄糖月桂酸酯的方法,包括:将葡萄糖和月桂酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,于50~60℃反应10~14小时,分离、纯化制得葡萄糖月桂酸酯;将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;本发明通过将脂肪酶展示在细胞外,利用该酶制剂催化合成葡萄糖月桂酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。

    酵母展示脂肪酶催化合成果糖棕榈酸酯的方法

    公开(公告)号:CN102212578A

    公开(公告)日:2011-10-12

    申请号:CN201110109007.3

    申请日:2011-04-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成果糖棕榈酸酯的方法,包括:将果糖和棕榈酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,于50~60℃反应10~14小时,分离、纯化制得果糖棕榈酸酯;将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS 115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;本发明通过将脂肪酶展示在细胞外,利用该酶制剂催化合成果糖棕榈酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。

    酵母展示脂肪酶催化合成淀粉黄原酸酯的方法

    公开(公告)号:CN102212587B

    公开(公告)日:2014-07-16

    申请号:CN201110110789.2

    申请日:2011-04-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成淀粉黄原酸酯的方法,包括:将谷物淀粉溶于水,吸涨后加入CS2和酵母展示脂肪酶,在45~55℃下搅拌反应1~1.5小时,分离、纯化制得淀粉黄原酸酯;所述酵母展示脂肪酶通过如下方法制备:将线性化的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶。本发明通过将脂肪酶展现在细胞外,利用该酶制剂催化合成淀粉黄原酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。

    酵母展示脂肪酶催化合成维生素E油酸酯的方法

    公开(公告)号:CN102226209B

    公开(公告)日:2013-08-14

    申请号:CN201110108739.0

    申请日:2011-04-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成维生素E油酸酯的方法,包括:将维生素E和油酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,无氧条件下于50~60℃反应10~14小时,分离、纯化制得维生素E油酸酯;将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;本发明通过将脂肪酶展示在细胞外,利用该酶制剂催化合成维生素E油酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。

    酵母展示脂肪酶催化合成麦芽糖月桂酸酯的方法

    公开(公告)号:CN102212592B

    公开(公告)日:2013-08-14

    申请号:CN201110108793.5

    申请日:2011-04-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成麦芽糖月桂酸酯的方法,包括:将麦芽糖和月桂酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,于50~60℃反应10~14小时,分离、纯化制得麦芽糖月桂酸酯;将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;本发明通过将脂肪酶展示在细胞外,利用该酶制剂催化合成麦芽糖月桂酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。

    酵母展示脂肪酶催化合成L-抗坏血酸棕榈酸酯的方法

    公开(公告)号:CN102212575B

    公开(公告)日:2013-08-14

    申请号:CN201110110431.X

    申请日:2011-04-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成L-抗坏血酸棕榈酸酯的方法,包括:将L-抗坏血酸和棕榈酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,无氧条件下于50~60℃反应4~8小时,分离、纯化制得L-抗坏血酸棕榈酸酯;将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;本发明通过将脂肪酶展示在细胞外,利用该酶制剂催化合成L-抗坏血酸棕榈酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。

    酵母展示脂肪酶催化合成L-抗坏血酸油酸酯的方法

    公开(公告)号:CN102212572B

    公开(公告)日:2013-08-14

    申请号:CN201110109010.5

    申请日:2011-04-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成L-抗坏血酸油酸酯的方法,包括:将L-抗坏血酸和油酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,无氧条件下于50~60℃反应4~8小时,分离、纯化制得L-抗坏血酸油酸酯;将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;本发明通过将脂肪酶展示在细胞外,利用该酶制剂催化合成L-抗坏血酸油酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。

    一种酵母展示型果胶酶协同超声波破碎紫菜细胞的方法

    公开(公告)号:CN102321598B

    公开(公告)日:2013-07-24

    申请号:CN201110260334.9

    申请日:2011-09-05

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示型果胶酶协同超声波破碎紫菜细胞的方法,包括:将紫菜干粉、酵母展示型果胶酶加入水中混匀,于35~37℃下酶解反应30~45min,再于30~32℃下利用功率为730~750W的超声波破碎65~70min;本发明还公开了一种提取紫菜蛋白和紫菜多糖的方法,将上述紫菜细胞破碎后的细胞破碎液分离即可;本发明还公开了一种制备紫菜降血压肽的方法,即将分离的紫菜蛋白利用蛋白酶在在36~37℃下酶解反应130~133min即可。本发明的方法利用酵母展示果胶酶对紫菜细胞的细胞壁进行降解并协同超声波处理,高效破碎紫菜细胞,提高紫菜细胞破碎率,增加紫菜多糖、紫菜蛋白和紫菜降血压肽的得率。

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