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公开(公告)号：CN102071258B
公开(公告)日：2012-08-29
申请号：CN200910172718.8
申请日：2009-11-25
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了猪细小病毒与猪伪狂犬病毒二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法，设计与合成引物，利用引物检测猪细小病毒与猪伪狂犬病毒的二重SYBR Green I实时荧光PCR检测方法，包括提取样品的DNA后，利用SYBR Green I实时荧光PCR反应体系和SYBR Green I实时荧光PCR扩增程序对样品进行检测。本发明能同时检测猪细小病毒与猪伪狂犬病毒两种病毒，不能检测出猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流感病毒，具有较好的特异性、重复性和敏感性，有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒病的鉴别与诊断。
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公开(公告)号：CN102071257B
公开(公告)日：2012-08-29
申请号：CN200910172717.3
申请日：2009-11-25
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪细小病毒与猪圆环病毒2型二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法，设计与合成引物，利用引物检测猪细小病毒与猪圆环病毒2型的二重SYBR Green I实时荧光PCR检测方法，包括提取样品的DNA后，按如下SYBR Green I实时荧光PCR反应体系和SYBR Green I实时荧光PCR扩增程序对样品进行检测。本发明能同时检测猪细小病毒与猪圆环病毒2型两种DNA病毒，不能检测出猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流感病毒，并且具有较好的特异性、重复性和敏感性。
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公开(公告)号：CN102373297A
公开(公告)日：2012-03-14
申请号：CN201110221715.6
申请日：2011-08-04
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种CSFV、PRRSV与PCV2多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法，CSFV引物的序列如下：上游引物P1：5′-AAACGGAGGGACTAGCCGT-3′；下游引物P2：5′-TGCCATGTACAGCAGAGA-3′；PRRSV引物的序列如下：上游引物P3：5′-AAACCAGTCCAGAGGCAAG-3′；下游引物P4：5′-CCACAGTGTAACTTATCCTC-3′；PCV2引物的序列如下：上游引物P5：5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′；下游引物P6：5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′；本发明分别设计扩增CSFV、PRRSV和PCV2的特异性引物，通过三重SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法能够同时检测CSFV、PRRSV和PCV2。CSFV、PRRSV和PCV2同时检出的极限拷贝数分别为177拷贝/μL，202拷贝/μL，181拷贝/μL。本发明的特异性试验结果良好，只出现三个特异性的峰值，重复性试验具有很好的稳定性并且本试验的最大优势在于能够同时检测CSFV、PRRSV和PCV2三种DNA病毒，有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒的鉴别。
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公开(公告)号：CN101100656A
公开(公告)日：2008-01-09
申请号：CN200610018065.4
申请日：2006-07-03
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 鸡肾型传染性支气管炎HN99株病毒，在电镜下见有冠状病毒粒子，直径90～105nm，有囊膜，周围有长约18nm的梨状突出，呈放射状排列；病毒分离物对NDV La Sota株病毒的繁殖产生干扰；病毒分离物对1％鸡红细胞不产生凝集；回归SPF鸡试验可出现呼吸道症状和肾肿、花斑肾等病变；特异性血清中和结果证明，病鸡的病毒分离物与HN99阳性血清呈阳性反应，而与NDV La Sota株、IBDV B87株、AIV H9N2株均呈阴性反应；HN99株阳性血清与T株、湖北株、天津株和山东株呈阳性反应，与其他株病毒均呈阴性反应。该毒株无外源病原污染，有较好的免疫原性，是一株效果良好的病毒株。
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公开(公告)号：CN118655129A
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202410676400.8
申请日：2024-05-29
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于纳米酶检测水体环境中残留抗生素的方法，涉及污染物检测技术领域。该方法包括将待检水体样本、TMB、纳米酶、H2O2和缓冲液混合均匀得到反应体系，将所述反应体系进行反应后，测定652nm的吸光度得到OD652nm，将所述OD652nm代入标准曲线，得到所述抗生素在所述待检水体样本中含量的步骤。该方法操作简便，便携能力强，检测周期短，不仅能够实现定性和定量检测，而且优化了检测步骤，加快了反应时间，扩大了使用场景范围，在水体环境中抗生素的现场即时检测方面具有巨大的潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112899239B
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202110376120.1
申请日：2021-04-08
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及杂交瘤细胞株及其分泌的抗体，特别是指一株抗猪δ冠状病毒（PDCoV）N蛋白抗原表位的单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其分泌的抗体和应用。所述抗原表位的氨基酸序列为326‑QDWEWDDA‑333，杂交瘤细胞株的分类命名为：杂交瘤细胞株PDCoV‑N‑6B7，保藏编号：CCTCC NO：C202178，保藏日：2021.3.26，保藏地址：中国，武汉，武汉大学。6B7单克隆抗体针对的抗原表位保守性强，是线性表位，属于免疫显性表位，有利于待检血清中的抗体结合，因此利用针对该表位的单克隆抗体建立阻断ELISA试剂盒会更加灵敏。
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公开(公告)号：CN117929729A
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202410120420.7
申请日：2024-01-29
Applicant: 河南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种快速检测猪δ冠状病毒IgG抗体的免疫磁珠检测试剂盒及其应用，属于生物技术领域。本发明将待检血清样本与试剂盒中的免疫磁珠共同孵育，免疫磁珠将PDCoV‑N蛋白特异性抗体从反应液中精准捕获，HRP标记的羊抗猪多克隆抗体作为检测抗体与免疫磁珠上PDCoV‑N蛋白的特异性抗体结合，于免疫磁珠上形成“PDCoV‑N蛋白‑PDCoV‑N特异性IgG抗体‑酶标记抗体”三聚体复合物，加入TMB底物液发生显色反应，通过颜色变化和吸光度值的测定可直接判定结果。本发明的试剂盒用于临床检测，结果与中和抗体试验的结果一致，灵敏度为92％，特异度为100％。本发明为猪δ冠状病毒的快速检测和防控提供新方法。
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公开(公告)号：CN117723368A
公开(公告)日：2024-03-19
申请号：CN202311729822.9
申请日：2023-12-15
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于类器官回收固定的石蜡切片包埋方法，涉及组织病理学与生物技术领域。该包埋方法包括以下步骤：通过溶解基质胶，将类器官释放于多聚甲醛(PFA)固定液中，得到类器官的PFA悬液；对所述类器官的PFA悬液进行脱水处理后，再经透明处理，之后离心得到类器官沉淀；在所述类器官沉淀中加入融化的石蜡快速重悬，之后进行浸蜡处理，然后吸弃上清，用融化的石蜡再次快速重悬，转移至柱模中，之后凝固，脱模，得到柱形蜡块；将所述柱形蜡块放入模具中，利用石蜡进行包埋，脱模以及切片处理，得到所述石蜡切片。该包埋方法可以实现类器官的高效、高速和高质量回收固定及石蜡包埋，为类器官的切片技术提供最佳手段与前期保障。
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公开(公告)号：CN117305254A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311499401.1
申请日：2023-11-13
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及猪δ冠状病毒，特别是指一种猪δ冠状病毒突变体病毒rPDCoV及其拯救方法和应用。本发明利用基因工程方法，对PDCoV野生毒株基因组进行改造，改造的氨基酸位点为病毒S蛋白S173→P和Y179→C，将改造后的病毒基因组克隆到pGF载体上，通过单酶切，体外转录以及电转染LLC‑PK1细胞，成功拯救出猪δ冠状病毒突变体病毒rPDCoV。本发明将PDCoV HNZK‑02株生物基因组分为6个片段，基于酵母转化相关同源重组的方法一步得到感染性克隆，避免了传统反向遗传学技术中需要将病毒基因组各片段逐一连接，也避免了传统的连接方法中酶切连接效率低下的问题，大大提高了连接效率。
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公开(公告)号：CN116411101A
公开(公告)日：2023-07-11
申请号：CN202310239796.5
申请日：2023-03-14
Applicant: 河南农业大学 , 安徽强英食品集团有限公司 , 宿州市动物疫病预防与控制中心(宿州市畜牧兽医技术推广中心)
Abstract: 本发明涉及一种鸭疫里默氏杆菌检测的特异性引物及其应用，属于生物工程技术领域，涉及微生物检测方法，所述特异性引物的核苷酸序列为：上游引物：5’TAGCATCTCTTGGATTCCCTTC3’，下游引物：5’CCAGTTTTTAACC ACCATTACCC3’；本发明提供一种鸭疫里默氏杆菌检测的特异性引物及其应用，通过这种实验室检测方法可快速、准确诊断鸭疫里默氏杆菌感染，即能在鸭疫里默氏杆菌感染病害显症前进行检测，又可对病害的发生进行早期预警，防治病害的扩散蔓延。对于该病的诊断、预警和防治具有重要意义。
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