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公开(公告)号：CN102071258B
公开(公告)日：2012-08-29
申请号：CN200910172718.8
申请日：2009-11-25
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了猪细小病毒与猪伪狂犬病毒二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法，设计与合成引物，利用引物检测猪细小病毒与猪伪狂犬病毒的二重SYBR Green I实时荧光PCR检测方法，包括提取样品的DNA后，利用SYBR Green I实时荧光PCR反应体系和SYBR Green I实时荧光PCR扩增程序对样品进行检测。本发明能同时检测猪细小病毒与猪伪狂犬病毒两种病毒，不能检测出猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流感病毒，具有较好的特异性、重复性和敏感性，有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒病的鉴别与诊断。
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公开(公告)号：CN102071257B
公开(公告)日：2012-08-29
申请号：CN200910172717.3
申请日：2009-11-25
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪细小病毒与猪圆环病毒2型二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法，设计与合成引物，利用引物检测猪细小病毒与猪圆环病毒2型的二重SYBR Green I实时荧光PCR检测方法，包括提取样品的DNA后，按如下SYBR Green I实时荧光PCR反应体系和SYBR Green I实时荧光PCR扩增程序对样品进行检测。本发明能同时检测猪细小病毒与猪圆环病毒2型两种DNA病毒，不能检测出猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流感病毒，并且具有较好的特异性、重复性和敏感性。
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公开(公告)号：CN102373299B
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201110221752.7
申请日：2011-08-04
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种PCV2、PRV与SIV H9亚型多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法，SIV H9亚型引物的序列如下：上游引物P1：5′-GGAACAACGCTTACCCTG-3′；下游引物P2：5′-GAGACCATTGACAAGAGGC-3′；PRV引物的序列如下：上游引物P3：5′-GGCATCGGCGACTACCT-3′；下游引物P4：5′-CGTCGTGCAGCGTGTAGAG-3′；PCV2引物的序列如下：上游引物P5：5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′；下游引物P6：5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′。本发明分别设计扩增SIV H9亚型、PCV2和PRV的特异性引物，通过三重SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法能够同时检测SIV H9亚型、PCV2和PRV。SIV H9亚型、PCV2和PRV同时检出的极限拷贝数分别为184拷贝/μL，207拷贝/μL，193拷贝/μL。本发明的特异性试验结果良好，只出现三个特异性的峰值，重复性试验具有很好的稳定性并且本试验的最大优势在于能够同时检测SIV H9亚型、PCV2和PRV3种DNA病毒，有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒的鉴别。
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公开(公告)号：CN102071256B
公开(公告)日：2012-08-29
申请号：CN200910172716.9
申请日：2009-11-25
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了猪伪狂犬病毒与猪圆环病毒2型二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法，设计与合成出引物，利用引物检测猪伪狂犬病毒与猪圆环病毒2型的二重SYBRGreen I实时荧光PCR检测方法，包括提取样品的DNA后，利用SYBR Green I实时荧光PCR反应体系和SYBR Green I实时荧光PCR扩增程序对样品进行检测。本发明能够同时检测出猪伪狂犬病毒与猪圆环病毒2型两种DNA病毒，不能检测出猪细小病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流感病毒。本发明具有较好的敏感性、重复性与稳定性，有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒病的鉴别与诊断。
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公开(公告)号：CN102373296A
公开(公告)日：2012-03-14
申请号：CN201110221712.2
申请日：2011-08-04
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种PRRSV、SIV H9亚型与PCV2多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR·引物，SIV H9亚型引物的序列如下：上游引物P1：5′-GGAACAACGCTTACCCTG-3′；下游引物P2：5′-GAGACCATTGACAAGAGGC-3′；PRRSV引物的序列如下：上游引物P3：5′-AAACCAGTCCAGAGGCAAG-3′；下游引物P4：5′-CCACAGTGTAACTTATCCTC-3′；PCV2引物的序列如下：上游引物P5：5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′；下游引物P6：5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′。本发明分别设计扩增PRRSV、SIV H9亚型和PCV2的特异性引物，通过三重SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法能够同时检测出PRRSV、SIV H9亚型和PCV2，PRRSV、SIV H9亚型和PCV2同时检出的极限拷贝数分别为187拷贝/μL，191拷贝/μL，203拷贝/μL。本发明的特异性试验结果良好，只出现三个特异性的峰值，重复性试验具有很好的稳定性并且本试验的最大优势在于能够同时检测PRRSV、SIV H9亚型和PCV23种DNA病毒，有利于这3种病毒的鉴别。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102373299A
公开(公告)日：2012-03-14
申请号：CN201110221752.7
申请日：2011-08-04
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种PCV2、PRV与SIV H9亚型多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法，SIV H9亚型引物的序列如下：上游引物P1：5′-GGAACAACGCTTACCCTG-3′；下游引物P2：5′-GAGACCATTGACAAGAGGC-3′；PRV引物的序列如下：上游引物P3：5′-GGCATCGGCGACTACCT-3′；下游引物P4：5′-CGTCGTGCAGCGTGTAGAG-3′；PCV2引物的序列如下：上游引物P5：5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′；下游引物P6：5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′。本发明分别设计扩增SIV H9亚型、PCV2和PRV的特异性引物，通过三重SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法能够同时检测SIV H9亚型、PCV2和PRV。SIV H9亚型、PCV2和PRV同时检出的极限拷贝数分别为184拷贝/μL，207拷贝/μL，193拷贝/μL。本发明的特异性试验结果良好，只出现三个特异性的峰值，重复性试验具有很好的稳定性并且本试验的最大优势在于能够同时检测SIV H9亚型、PCV2和PRV3种DNA病毒，有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒的鉴别。
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公开(公告)号：CN102071257A
公开(公告)日：2011-05-25
申请号：CN200910172717.3
申请日：2009-11-25
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪细小病毒与猪圆环病毒2型二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法，设计与合成引物，利用引物检测猪细小病毒与猪圆环病毒2型的二重SYBR Green I实时荧光PCR检测方法，包括提取样品的DNA后，按如下SYBR Green I实时荧光PCR反应体系和SYBR Green I实时荧光PCR扩增程序对样品进行检测。本发明能同时检测猪细小病毒与猪圆环病毒2型两种DNA病毒，不能检测出猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流感病毒，并且具有较好的特异性、重复性和敏感性。
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公开(公告)号：CN102071258A
公开(公告)日：2011-05-25
申请号：CN200910172718.8
申请日：2009-11-25
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了猪细小病毒与猪伪狂犬病毒二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法，设计与合成引物，利用引物检测猪细小病毒与猪伪狂犬病毒的二重SYBR Green I实时荧光PCR检测方法，包括提取样品的DNA后，利用SYBR Green I实时荧光PCR反应体系和SYBR Green I实时荧光PCR扩增程序对样品进行检测。本发明能同时检测猪细小病毒与猪伪狂犬病毒两种病毒，不能检测出猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流感病毒，具有较好的特异性、重复性和敏感性，有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒病的鉴别与诊断。
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公开(公告)号：CN102071259B
公开(公告)日：2012-08-29
申请号：CN200910172719.2
申请日：2009-11-25
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪伪狂犬病毒、猪细小病毒与猪圆环病毒2型多重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法，设计合成出引物，利用引物检测猪伪狂犬病毒、猪细小病毒与猪圆环病毒2型的多重SYBR Green I实时荧光PCR检测方法，包括提取样品的DNA后，利用SYBR Green I实时荧光PCR反应体系和SYBR Green I实时荧光PCR扩增程序对样品进行检测。本发明的有益效果是能够同时有效诊断和检测出猪伪狂犬病毒、猪细小病毒与猪圆环病毒2型三种病毒，不能检测出非特异的猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流感病毒，有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒的鉴别与诊断，并且具有的较好敏感性、重复性和稳定性。
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公开(公告)号：CN102071259A
公开(公告)日：2011-05-25
申请号：CN200910172719.2
申请日：2009-11-25
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪伪狂犬病毒、猪细小病毒与猪圆环病毒2型多重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法，设计合成出引物，利用引物检测猪伪狂犬病毒、猪细小病毒与猪圆环病毒2型的多重SYBR Green I实时荧光PCR检测方法，包括提取样品的DNA后，利用SYBR Green I实时荧光PCR反应体系和SYBR Green I实时荧光PCR扩增程序对样品进行检测。本发明的有益效果是能够同时有效诊断和检测出猪伪狂犬病毒、猪细小病毒与猪圆环病毒2型三种病毒，不能检测出非特异的猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流感病毒，有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒的鉴别与诊断，并且具有的较好敏感性、重复性和稳定性。
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