PCV2、PRV与SIVH9亚型多重SYBRGreenⅠ实时荧光PCR引物及其检测方法

    公开(公告)号:CN102373299B

    公开(公告)日:2013-09-04

    申请号:CN201110221752.7

    申请日:2011-08-04

    Abstract: 本发明公开了一种PCV2、PRV与SIV H9亚型多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法,SIV H9亚型引物的序列如下:上游引物P1:5′-GGAACAACGCTTACCCTG-3′;下游引物P2:5′-GAGACCATTGACAAGAGGC-3′;PRV引物的序列如下:上游引物P3:5′-GGCATCGGCGACTACCT-3′;下游引物P4:5′-CGTCGTGCAGCGTGTAGAG-3′;PCV2引物的序列如下:上游引物P5:5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′;下游引物P6:5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′。本发明分别设计扩增SIV H9亚型、PCV2和PRV的特异性引物,通过三重SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法能够同时检测SIV H9亚型、PCV2和PRV。SIV H9亚型、PCV2和PRV同时检出的极限拷贝数分别为184拷贝/μL,207拷贝/μL,193拷贝/μL。本发明的特异性试验结果良好,只出现三个特异性的峰值,重复性试验具有很好的稳定性并且本试验的最大优势在于能够同时检测SIV H9亚型、PCV2和PRV3种DNA病毒,有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒的鉴别。

    CSFV、PCV2与PRV多重SYBRGreenⅠ实时荧光PCR引物及其检测方法

    公开(公告)号:CN102382902B

    公开(公告)日:2013-08-21

    申请号:CN201110221771.X

    申请日:2011-08-04

    Abstract: 本发明公开了一种CSFV、PCV2与PRV多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法,CSFV引物的序列如下:上游引物P1:5′-AAACGGAGGGACTAGCCGT-3′;下游引物P2:5′-TGCCATGTACAGCAGAGA-3′PRV引物的序列如下:上游引物P3:5′-CTCGCCATCGTCAGCAA-3′;下游引物P4:5′-GCTGCTCCTCCATGTCCTT-3′;PCV2引物的序列如下:上游引物P5:5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′;下游引物P6:5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′。本发明通过猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒三重SYBR Green Ⅰ定量PCR检测方法,能够同时检测CSFV、PRV和PCV2 3种DNA病毒,能最少检测183拷贝猪瘟病毒、231拷贝猪伪狂犬病毒和203拷贝猪圆环病毒2型;本发明的特异性试验结果良好,只出现三个特异性的峰值,重复性试验具有很好的稳定性,为有效检测和鉴别混合感染提供了一种成本低、快速、灵敏、特异、准确的新方法,有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒的鉴别。

    PCV2、PRV与SIVH9亚型多重SYBRGreenⅠ实时荧光PCR引物及其检测方法

    公开(公告)号:CN102373299A

    公开(公告)日:2012-03-14

    申请号:CN201110221752.7

    申请日:2011-08-04

    Abstract: 本发明公开了一种PCV2、PRV与SIV H9亚型多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法,SIV H9亚型引物的序列如下:上游引物P1:5′-GGAACAACGCTTACCCTG-3′;下游引物P2:5′-GAGACCATTGACAAGAGGC-3′;PRV引物的序列如下:上游引物P3:5′-GGCATCGGCGACTACCT-3′;下游引物P4:5′-CGTCGTGCAGCGTGTAGAG-3′;PCV2引物的序列如下:上游引物P5:5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′;下游引物P6:5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′。本发明分别设计扩增SIV H9亚型、PCV2和PRV的特异性引物,通过三重SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法能够同时检测SIV H9亚型、PCV2和PRV。SIV H9亚型、PCV2和PRV同时检出的极限拷贝数分别为184拷贝/μL,207拷贝/μL,193拷贝/μL。本发明的特异性试验结果良好,只出现三个特异性的峰值,重复性试验具有很好的稳定性并且本试验的最大优势在于能够同时检测SIV H9亚型、PCV2和PRV3种DNA病毒,有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒的鉴别。

    CSFV、PCV2与PRV多重SYBRGreenⅠ实时荧光PCR引物及其检测方法

    公开(公告)号:CN102382902A

    公开(公告)日:2012-03-21

    申请号:CN201110221771.X

    申请日:2011-08-04

    Abstract: 本发明公开了一种CSFV、PCV2与PRV多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法,CSFV引物的序列如下:上游引物P1:5′-AAACGGAGGGACTAGCCGT-3′;下游引物P2:5′-TGCCATGTACAGCAGAGA-3′PRV引物的序列如下:上游引物P3:5′-CTCGCCATCGTCAGCAA-3′;下游引物P4:5′-GCTGCTCCTCCATGTCCTT-3′;PCV2引物的序列如下:上游引物P5:5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′;下游引物P6:5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′。本发明通过猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒三重SYBR Green Ⅰ定量PCR检测方法,能够同时检测CSFV、PRV和PCV2 3种DNA病毒,能最少检测183拷贝猪瘟病毒、231拷贝猪伪狂犬病毒和203拷贝猪圆环病毒2型;本发明的特异性试验结果良好,只出现三个特异性的峰值,重复性试验具有很好的稳定性,为有效检测和鉴别混合感染提供了一种成本低、快速、灵敏、特异、准确的新方法,有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒的鉴别。

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