公开(公告)号：CN117757709A

公开(公告)日：2024-03-26

申请号：CN202311783408.6

申请日：2023-12-22

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘立明 ,  倪平 ,  高聪 ,  陈修来 ,  刘佳 ,  宋伟 ,  吴静 ,  周怡雯 ,  胡贵鹏

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P7/18 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一株产1,4‑丁二醇的重组大肠杆菌及其构建方法与应用，属于生物工程技术领域。本发明以E.coli FMME N‑5为出发菌株，过表达羧酸还原酶基因Car、醇还原酶基因YqhD和4’‑磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶基因Sfp，筛选Car基因的来源，通过RBS序列调控了YqhD基因和Sfp基因的表达强度，在5L发酵罐中验证1,4‑丁二酸产量在48小时达到了38.5g/L，具有工业化生产潜力。

公开(公告)号：CN113637654B

公开(公告)日：2023-08-08

申请号：CN202111145733.0

申请日：2021-09-28

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴静 ,  齐娜 ,  刘立明 ,  宋伟 ,  胡贵鹏 ,  周怡雯 ,  陈修来 ,  刘佳 ,  高聪

IPC: C12N9/16 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P7/6481 ,  C12P13/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种重组磷脂酶D突变体及其在合成磷脂酰丝氨酸中的应用，属于生物工程技术领域。本发明先通过构建重组磷脂酶，所述重组磷脂酶是在来源于穗产色链霉菌的磷脂酶的基础上，在PLD的C端去掉信号肽并通过连接肽加上标签MBP获得的，所述重组磷脂酶突变体，是将重组磷脂酶的第379位、第169位、第185位的氨基酸中的一个或多个进行突变得到的。本发明的重组磷脂酶突变体表现出较高的转磷脂酰活性，磷脂酰胆碱的转化率可达85.8％，磷脂酰丝氨酸产率可达72.12％，磷脂酰丝氨酸的产量可以达到57.69g/L。采用本发明的方法，提高了单位催化剂的生产能力和催化剂的反应效率，降低了反应的成本。

公开(公告)号：CN114015634B

公开(公告)日：2022-12-02

申请号：CN202111299764.1

申请日：2021-11-04

Applicant: 江南大学 ,  淮北创新生物新材料有限责任公司

Inventor： 刘立明 ,  罗旭 ,  王学明 ,  陈修来 ,  刘佳 ,  唐文秀 ,  徐祖伟 ,  高聪 ,  郭亮 ,  胡贵鹏 ,  宋伟

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/90 ,  C12N15/53 ,  C12N15/31 ,  C12N15/55 ,  C12P7/46 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种生物工程技术领域，尤其涉及一种高产琥珀酸的重组大肠杆菌及其构建方法和应用。其中，高产琥珀酸的重组大肠杆菌是将编码大肠杆菌中甲酸脱氢酶的基因fdhF替换为来自假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的外膜蛋白调节器OmpR。本发明采用CRISPR‑cas9基因编辑技术将宿主菌FMME‑N‑5中编码甲酸脱氢酶基因fdhF替换为假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并运用RBS序列和启动子策略上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的关键外膜蛋白调节器OmpR，所得到的重组大肠杆菌没有抗性，耐渗透压并可高效生产琥珀酸。

公开(公告)号：CN114107153A

公开(公告)日：2022-03-01

申请号：CN202111423759.7

申请日：2021-11-26

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘立明 ,  丁强 ,  陈修来 ,  高聪 ,  郭亮 ,  胡贵鹏 ,  刘佳

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/53 ,  C12N15/55 ,  C12N15/52 ,  C12P7/44 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种生产己二酸的重组菌，表达调控细胞不对称分裂的靶点基因和调控己二酸生产的靶点基因，在此基础上，通过RBS序列调控不同基因片段的表达强度，实现定制化微生物群落，并且改善了己二酸生产性能。本发明的重组菌实现了从头合成己二酸，底物为脂肪酸，且该菌株在7.5L发酵罐发酵后，己二酸最高产量为5.2g/L。

公开(公告)号：CN114015634A

公开(公告)日：2022-02-08

申请号：CN202111299764.1

申请日：2021-11-04

Applicant: 江南大学 ,  淮北创新生物新材料有限责任公司

Inventor： 刘立明 ,  罗旭 ,  王学明 ,  陈修来 ,  刘佳 ,  唐文秀 ,  徐祖伟 ,  高聪 ,  郭亮 ,  胡贵鹏 ,  宋伟

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/90 ,  C12N15/53 ,  C12N15/31 ,  C12N15/55 ,  C12P7/46 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种生物工程技术领域，尤其涉及一种高产琥珀酸的重组大肠杆菌及其构建方法和应用。其中，高产琥珀酸的重组大肠杆菌是将编码大肠杆菌中甲酸脱氢酶的基因fdhF替换为来自假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的外膜蛋白调节器OmpR。本发明采用CRISPR‑cas9基因编辑技术将宿主菌FMME‑N‑5中编码甲酸脱氢酶基因fdhF替换为假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并运用RBS序列和启动子策略上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的关键外膜蛋白调节器OmpR，所得到的重组大肠杆菌没有抗性，耐渗透压并可高效生产琥珀酸。

公开(公告)号：CN113957029A

公开(公告)日：2022-01-21

申请号：CN202111257582.8

申请日：2021-10-27

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘立明 ,  丁强 ,  陈修来 ,  高聪 ,  胡贵鹏 ,  郭亮 ,  宋伟 ,  刘佳

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P7/46 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种调控生物被膜杂合系统改善苹果酸生产性能的策略，属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段，利用生物被膜，结合苯酚功能化修饰CdS纳米材料，达到提高电子传输。通过引入靶向生物被膜杂合系统，构建得到含有CdS‑生物杂合系统的菌株，显著提高了CdS纳米材料与大肠杆菌的接触面积，提高了NADH浓度，进而改善苹果酸生产。在光照条件下，L‑苹果酸浓度和生产强度分别提高到9.84g/L和0.14g/L/h。5L发酵罐发酵生产该菌株，苹果酸产量达到45.93g/L，具有较好的工业应用前景。