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公开(公告)号：CN111234014B
公开(公告)日：2022-02-11
申请号：CN202010068535.8
申请日：2020-01-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K16/12 , C12N15/13 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种广谱识别藻毒素的纳米抗体及酶联免疫分析方法。所述纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明利用此纳米抗体建立了广谱的检测藻毒素酶联免疫分析方法。本发明得到一种可以识别多种藻毒素药物的纳米抗体，且检测结果准确、效果好、稳定性好、广谱性好。该方法可以广泛的应用于饮用水中藻毒素的残留检测，避免了利用单克隆抗体和多克隆抗体建立免疫检测方法时候，目前单克隆抗体和多克隆抗体均表现稳定性差、易失活的缺点的不足，使酶联免疫分析检测法更具市场前景。本方法具有很大的应用推广价值。
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公开(公告)号：CN110028581B
公开(公告)日：2022-02-11
申请号：CN201910251588.0
申请日：2019-03-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种微囊藻毒素抗体Fab片段的制备方法和应用。本发明首先提供了一种微囊藻毒素抗体Fab片段的氨基酸序列和核苷酸序列，依次如SEQ ID NO：1～4所示。本发明还提供了一种微囊藻毒素抗体Fab片段的制备方法，用蛋白酶酶切微囊藻毒素抗体IgG，酶切产物直接采用凝胶过滤层析进行纯化，即可得到Fab片段。该方法仅使用凝胶过滤层析便可获得生物活性高、纯度高的Fab片段，成功实现了一步法高效纯化Fab片段。另外，该方法步骤少，操作流程简易，使用的凝胶过滤层析介质可再生，大大降低了成本，是一种低成本、高产出的高效制备微囊藻毒素Fab片段的方法，为建立微囊藻毒素的免疫分析检测方法提供了核心材料，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN113354600A
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN202110236737.3
申请日：2021-03-03
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D295/185 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/79 , C07K14/795 , C07K14/42 , C07K1/107 , C07K16/44 , G01N33/53 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种烯酰吗啉半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。所述烯酰吗啉半抗原的结构式如式I所示；再以此为基础制备烯酰吗啉人工抗原和抗体，并建立了一种基于抗体的检测烯酰吗啉的免疫分析方法，对烯酰吗啉的最低检测限为1.43ng/mL，IC50为4.34ng/mL，线性范围为2.17～8.69ng/mL，表明本发明制备的人工抗原具有良好的免疫原性，可以用于后续制备烯酰吗啉多克隆抗体、单链抗体和纳米抗体并建立相对应免疫分析法，在烯酰吗啉检测中具有较大的应用前景。
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公开(公告)号：CN113092749A
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN202110374480.8
申请日：2021-04-07
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/53 , G01N21/64
Abstract: 本发明提供了一种杀螟硫磷的荧光比率型免疫分析方法。通过在微孔板中包被杀螟硫磷包被原，以杀螟硫磷纳米抗体融合碱性磷酸酶(Nb‑ALP)识别及信号放大元件，样品中杀螟硫磷与板上包被原竞争结合Nb‑ALP，随后洗去多余的药物和抗体，连接在微孔板的Nb‑ALP催化随后加入的L‑抗坏血酸‑2‑磷酸三钠盐(AAP)水解生成抗坏血酸(AA)；随后再向其中加入邻苯二胺(OPD)，壳聚糖修饰的铂纳米颗粒(Ch‑Pt NPs)，AA与OPD竞争性地被具有类氧化特性的Ch‑Pt NPs催化氧化。其中，OPD被氧化为荧光物质2,3‑二氨基酚(DAP)，荧光发射峰为568nm；而氧化态AA与OPD反应生成喹喔啉衍生物(DFQ)，荧光发射峰为430nm；因此，样品中杀螟硫磷的含量更为灵敏地反映在430nm与568nm的荧光比值上，实现对杀螟硫磷农药高灵敏检测的目的。
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公开(公告)号：CN108218992B
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN201711482207.7
申请日：2017-12-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种直接识别3‑氨基‑5‑吗啉甲基‑2‑恶唑烷酮（AMOZ）的单链抗体（scFv）及其制备方法和应用。所述单链抗体包括重链可变区和轻链可变区，其序列分别如SEQ ID NO.1和2所示，或与所示序列经缺失、取代或添加一个或多个氨基酸但与所示序列具有相同功能的氨基酸序列。本发明提供的单链抗体scFv与抗原的结合可被游离的半抗原竞争性抑制，IC50为72.93ng/mL，检测限为13.35ng/mL，具有很好的抗原结合活性；通过标准曲线可知线性检测范围分别在24.98～212.92ng/mL之间。该基因工程抗体在AMOZ的免疫检测和大量样品的快速检测筛选方面具有很好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110407732B
公开(公告)日：2021-05-25
申请号：CN201910616806.6
申请日：2019-07-09
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D207/38 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/795 , C07K16/44 , G01N33/64 , G01N33/535 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种直接针对异细交链孢菌酮酸的半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法与应用，一种异细交链孢菌酮酸的半抗原，具有如式(I)所示的结构：其中n＝1～6。本发明进一步通过将半抗原偶联到载体蛋白上，成功制备得到2种人工抗原，将其中一种异细交链孢菌酮酸人工抗原作为免疫原，免疫动物获得直接针对异细交链孢菌酮酸的高特异性抗体，效价为1:128000；建立了一种能够直接检测异细交链孢菌酮酸的酶联免疫分析方法；该方法具有简便快速、特异性强、灵敏度较高的特点，对异细交链孢菌酮酸的检测限为0.3ng/mL，半数抑制浓度为8.3ng/mL，线性范围为0.9～73.1ng/mL。
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公开(公告)号：CN108059622B
公开(公告)日：2021-03-12
申请号：CN201711308738.4
申请日：2017-12-11
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D251/18 , C07K14/77 , C07K14/765 , C07K16/44 , G01N33/577 , G01N33/68
Abstract: 本发明一种基于三嗪环结构限定性N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉半抗原、人工抗原、抗体及应用。所述N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉半抗原的结构如式I所示：其中R为‑H和‑CH3。并以此制备了N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉人工抗原和抗体，对N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉的检测效率高、操作简便，可用于N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉的酶联免疫快速检测；且本发明的抗原抗体合成过程简单、成本较低，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN112129942A
公开(公告)日：2020-12-25
申请号：CN202010852145.X
申请日：2020-08-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/558 , G01N33/546
Abstract: 一种泰乐菌素及替米考星乳胶微球免疫层析试纸条及其制备和应用，本发明的乳胶微球免疫层析试纸条通过优化乳胶微球抗体探针的制备，有效提高其检测鸡蛋样品的灵敏度，在保证产品灵敏度的前提下减少抗原、抗体的使用量，缩减检测耗时；通过调节样品垫配方以适应鸡蛋样品的检测要求，精简样品前处理步骤，仅通过一次提取吹干并复溶的步骤，即可完成样品前处理的操作；采用本发明的免疫层析试纸条对鸡蛋样品中残留TYL及TIM的检测，Cut‑Off值均能够达到8ng/g，灵敏度高，检测时间为5min，省时高效。
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公开(公告)号：CN112094919A
公开(公告)日：2020-12-18
申请号：CN202010997172.6
申请日：2020-09-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴别牛猪鸡鸭动物源成分的多重PCR引物组及其方法和试剂盒。所述多重PCR引物组包括4对引物：牛源性成分检测引物对B‑F/R、猪源性成分检测引物对P‑F/R、鸡源性成分检测引物对C‑F/R和鸭源性成分检测引物对D‑F/R，其引物序列依次如SEQ ID NO:1～8所示。所述引物对仅对各自物种的目标片段进行特异性扩增，不会对其他物种进行非特异性扩增，检测时间短，其对牛肉制品中掺杂的猪、鸡、鸭源性成分检测限可达0.1％(w/w)，适用于多种肉类加工产品中动物源成分鉴别检验，适用范围广、可靠性高。
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公开(公告)号：CN111454171A
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN202010152117.7
申请日：2020-03-06
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种百草枯半抗原PH-A、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。本发明首先提供了一种百草枯半抗原PH-A，所述半抗原PH-A的结构式如式(I)所示：该半抗原PH-A与待测物百草枯的骨架结构重叠度高，有效地提高了半抗原PH-A的免疫原性；进一步利用该半抗原PH-A与乳铁蛋白偶联得到的人工抗原作为免疫原免疫羊驼，筛选得到了能够特异性识别百草枯的纳米抗体Nb2-23；并利用该纳米抗体Nb2-23建立了一种检测百草枯的方法，该方法的检测限为0.54ng/mL～3.86ng/mL，半抑制浓度(IC50)为1.44ng/mL，最低检测限(LOD)为0.34ng/mL，具有检测灵敏度高、特异性强、操作简单且耗时短的优点，在百草枯的快速有效检测中具有良好的应用前景和广阔的发展空间。
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