公开(公告)号：CN113092749B

公开(公告)日：2022-04-01

申请号：CN202110374480.8

申请日：2021-04-07

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 罗林 ,  吴卓裕 ,  徐振林 ,  王弘 ,  孙远明 ,  沈玉栋 ,  雷红涛

IPC: G01N33/543 ,  G01N33/53 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明提供了一种杀螟硫磷的荧光比率型免疫分析方法。通过在微孔板中包被杀螟硫磷包被原，以杀螟硫磷纳米抗体融合碱性磷酸酶(Nb‑ALP)识别及信号放大元件，样品中杀螟硫磷与板上包被原竞争结合Nb‑ALP，随后洗去多余的药物和抗体，连接在微孔板的Nb‑ALP催化随后加入的L‑抗坏血酸‑2‑磷酸三钠盐(AAP)水解生成抗坏血酸(AA)；随后再向其中加入邻苯二胺(OPD)，壳聚糖修饰的铂纳米颗粒(Ch‑Pt NPs)，AA与OPD竞争性地被具有类氧化特性的Ch‑Pt NPs催化氧化。其中，OPD被氧化为荧光物质2,3‑二氨基酚(DAP)，荧光发射峰为568nm；而氧化态AA与OPD反应生成喹喔啉衍生物(DFQ)，荧光发射峰为430nm；因此，样品中杀螟硫磷的含量更为灵敏地反映在430nm与568nm的荧光比值上，实现对杀螟硫磷农药高灵敏检测的目的。

公开(公告)号：CN113092749A

公开(公告)日：2021-07-09

申请号：CN202110374480.8

申请日：2021-04-07

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 罗林 ,  吴卓裕 ,  徐振林 ,  王弘 ,  孙远明 ,  沈玉栋 ,  雷红涛

IPC: G01N33/543 ,  G01N33/53 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明提供了一种杀螟硫磷的荧光比率型免疫分析方法。通过在微孔板中包被杀螟硫磷包被原，以杀螟硫磷纳米抗体融合碱性磷酸酶(Nb‑ALP)识别及信号放大元件，样品中杀螟硫磷与板上包被原竞争结合Nb‑ALP，随后洗去多余的药物和抗体，连接在微孔板的Nb‑ALP催化随后加入的L‑抗坏血酸‑2‑磷酸三钠盐(AAP)水解生成抗坏血酸(AA)；随后再向其中加入邻苯二胺(OPD)，壳聚糖修饰的铂纳米颗粒(Ch‑Pt NPs)，AA与OPD竞争性地被具有类氧化特性的Ch‑Pt NPs催化氧化。其中，OPD被氧化为荧光物质2,3‑二氨基酚(DAP)，荧光发射峰为568nm；而氧化态AA与OPD反应生成喹喔啉衍生物(DFQ)，荧光发射峰为430nm；因此，样品中杀螟硫磷的含量更为灵敏地反映在430nm与568nm的荧光比值上，实现对杀螟硫磷农药高灵敏检测的目的。