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公开(公告)号：CN114778852B
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202210447079.7
申请日：2022-04-26
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543 , C12N15/70 , C12N15/57 , C12N9/50
摘要： 本发明公开了一种检测PRRSV PLP2抗体的间接ELISA方法，该方法针对PRRSV JXwn06PLP2(46～323)基因序列设计特异性引物，构建原核表达质粒pET28a(+)‑PLP2‑StrepⅡ，在E.coli BL21中实现了高效可溶性表达。经过亲和层析柱与Superdex75分子筛纯化，获得了高纯度PLP2重组蛋白，将其作为包被抗原，建立了检测PRRSV PLP2抗体的间接ELISA方法。本发明发现PLP2可作为一种新的PRRSV诊断抗原，应用其建立的抗体检测方法重复性和特异性好，能够在PRRSV感染仔猪后第3～5天检测到PLP2抗体，可用于PRRS抗体检测和早期诊断。
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公开(公告)号：CN116656615A
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202310175226.4
申请日：2023-02-28
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明公开了支持非洲猪瘟病毒体外高效增殖的野猪肺细胞系WSL‑R4及其建立方法，属于非洲猪瘟病毒技术领域。本发明采用有限稀释法对野猪肺细胞进行亚克隆，最终获得一株能够支持非洲猪瘟病毒高效复制单细胞克隆株WSL‑R4，该细胞株性能稳定，能够支持非洲猪瘟病毒野毒株及缺失毒株复制，病毒滴度最高可达106TCID50/mL，在非洲猪瘟病毒基础研究与疫苗生产中具有很好的应用价值。
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公开(公告)号：CN112795704B
公开(公告)日：2022-11-11
申请号：CN202110255280.0
申请日：2021-03-09
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
摘要： 本发明是关于动物疫病检测技术领域，具体涉及一种可快速检测猪伪狂犬病病毒的重组酶介导等温扩增方法，具体包括检测过程中使用的引物对和探针、试剂盒。本发明所述检测猪伪狂犬病病毒的RAA引物对和探针以及相应的试剂盒，可以实现对猪伪狂犬病病毒的快速检测，具有简单快速、反应灵敏、特异性好的特点，扩增所得产物可以通过便携式蓝光仪进行肉眼可视化的结果判断，可以真正实现便携式快速核酸检测。
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公开(公告)号：CN113801961A
公开(公告)日：2021-12-17
申请号：CN202110993993.7
申请日：2021-08-27
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
摘要： 本发明属于动物疫病检测技术领域，具体涉及一种可快速、灵敏地检测猪塞内卡病毒A(Senecavirus A，SVA)的rRT‑RAA引物对和探针、试剂盒。本发明所述检测猪塞内卡病毒A的rRT‑RAA引物对和探针，针对于猪塞内卡病毒A的rRT‑RAA检测，筛选出适宜于快速鉴定猪塞内卡病毒AVP2基因的正向引物SVA‑VP2‑F、反向引物SVA‑VP2‑R和探针SVA‑VP2‑P，可实现对SVA进行快速、特异、灵敏、简便地检测，从而弥补现有检测技术的不足，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN113583980A
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202110989500.2
申请日：2021-08-26
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明属于病毒基因工程技术领域，具体涉及一种猪繁殖与呼吸综合征突变病毒RvJXwn‑nsp1α‑G90A，并进一步公开其应用。本发明所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒RvJXwn‑nsp1α‑G90A，通过将高致病性的PRRSV毒株JXwn06非结构蛋白nsp1α的第90位氨基酸由甘氨酸突变为丙氨酸获得突变病毒，获取了诱导降解其靶细胞‑猪肺泡巨噬细胞(PAMs)PAMs细胞表面SLA‑I分子功能受损的突变毒株。该突变病毒感染宿主细胞后，可诱导降解靶细胞表面SLA‑I分子的功能严重受损，且该突变病毒遗传性质表现稳定，可作为猪繁殖与呼吸综合征的疫苗侯选株，用于预防猪繁殖与呼吸综合征，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN112795704A
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN202110255280.0
申请日：2021-03-09
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
摘要： 本发明是关于动物疫病检测技术领域，具体涉及一种可快速检测猪伪狂犬病病毒的重组酶介导等温扩增方法，具体包括检测过程中使用的引物对和探针、试剂盒。本发明所述检测猪伪狂犬病病毒的RAA引物对和探针以及相应的试剂盒，可以实现对猪伪狂犬病病毒的快速检测，具有简单快速、反应灵敏、特异性好的特点，扩增所得产物可以通过便携式蓝光仪进行肉眼可视化的结果判断，可以真正实现便携式快速核酸检测。
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公开(公告)号：CN107267470A
公开(公告)日：2017-10-20
申请号：CN201710671547.8
申请日：2017-08-08
申请人： 中国农业大学 , 上海创宏生物科技有限公司
IPC分类号： C12N7/04 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
CPC分类号： C12N7/00 , A61K39/12 , A61K2039/5252 , A61K2039/552 , C12N2710/16721 , C12N2710/16734
摘要： 本发明提供了一种猪伪狂犬病毒基因缺失株C1201/ΔgE株，该猪伪狂犬病毒(Pseudorabies Virus,PRV)为gE基因缺失株，其微生物保藏名称为：猪伪狂犬病毒基因缺失株C1201/ΔgE株；保藏号为：CCTCC NO:V201721；保藏单位：中国典型培养物保藏中心；保藏地址：湖北省武汉市武昌区武汉大学保藏中心，保藏日期：20170504，本发明构建的猪伪狂犬病毒C1201/ΔgE株的在细胞上连续传代，具有很好的稳定性，不发生变异，为猪伪狂犬基因缺失灭活疫苗的研制提供了很好的资源。
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公开(公告)号：CN101386860A
公开(公告)日：2009-03-18
申请号：CN200810225311.2
申请日：2008-10-29
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明涉及一种构建脑心肌炎病毒的感染性克隆的方法，该方法包括以下步骤：提取脑心肌炎病毒总RNA；RT－PCR方法分段扩增其全长cDNA，并分别建立亚克隆；用双酶切的方法将各段cDNA依次定向克隆至低拷贝质粒载体中，即得脑心肌炎病毒感染性克隆。本发明方法的操作难度较小，可控性强，能够获得稳定的脑心肌炎病毒感染性克隆，因而，为脑心肌炎病毒的分子病毒学研究和疫苗的研制提供了有效的工具。
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公开(公告)号：CN117159527A
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202210583728.6
申请日：2022-05-25
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： A61K31/194 , A61K31/225 , A61P11/00 , A61P31/14 , C07C57/13
摘要： 本发明涉及生物制品技术领域，尤其涉及衣康酸在抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒的方法。衣康酸是三羧酸循环重编的产物，由顺乌头酸脱羧酶催化顺乌头酸脱羧产生，本发明通过外源添加能够穿过细胞膜的衣康酸衍生物4‑辛基衣康酸在MARC‑145细胞和PAMs上能高效的抑制PRRSV的复制，在200μM浓度以上可以完全抑制病毒增殖，并且该药物细胞毒性较低，在200μM时未见对细胞活性的影响。本发明同时研究发现衣康酸通过烷基化Keap1激活Nrf2，诱导HO‑1的高表达从而发挥抗PRRSV活性，这对于PRRSV的防治具有重要意义。
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公开(公告)号：CN116948022A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202310881787.6
申请日：2023-07-18
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C07K16/18 , G01N33/577 , G01N33/68
摘要： 本发明公开了抗猪Gasdermin D蛋白单克隆抗体及其应用。本发明提供五株小鼠抗猪GSDMD蛋白的单抗，并建立了利用所述单抗对猪GSDMD蛋白进行免疫印迹和免疫荧光检测的方法。结果表明，五株单抗均能够特异性识别猪GSDMD全长蛋白(GSDMD‑FL)，其中15H6、19H3、23H10、27A10能进一步识别猪GSDMD蛋白被活化切割后所形成的具有膜成孔活性的GSDMD氨基端片段(GSDMD‑NT)，25E2识别猪GSDMD蛋白的羧基端片段(GSDMD‑CT)。本发明提供的单抗为开展猪GSDMD蛋白生物学功能研究、猪体内外细胞焦亡研究提供了必需试剂，具有广阔的商品化生产前景和良好的市场需求。
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