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公开(公告)号：CN118638744A
公开(公告)日：2024-09-13
申请号：CN202410936888.3
申请日：2024-07-12
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明提供一种猪繁殖与呼吸综合征突变病毒及其构建方法与应用。所述突变病毒是在猪繁殖与呼吸综合征病毒JXwn06毒株的基础上进行突变得到的，包含非结构蛋白nsp9 K541R、K336R、K336A、A394G、L396S、R401A、K541A或K541H突变位点。所述突变病毒感染宿主细胞后含有nsp9 K541R的突变株具有高保真特性，其余突变病毒具有低保真特性。所有突变的猪繁殖与呼吸综合征病毒，在细胞中增殖滴度与亲本毒相似，可作为猪繁殖与呼吸综合征的疫苗侯选株，用于预防猪繁殖与呼吸综合征，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114703179B
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202210482181.0
申请日：2022-05-05
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12N15/11 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , G01N33/543
摘要： 本发明涉及动物疫病检测技术领域，具体涉及检测PDCoV的RT‑RAA‑LFD引物对、探针、试纸条、试剂盒及其应用。本发明以PDCoV的ORF1b基因为诊断靶标，设计、筛选、优化并最终获得了能够特异性检测PDCoV核酸的引物对与探针。使用本发明的引物对、探针、试剂盒和试纸条可以实现对PDCoV的快速检测，等温扩增所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行结果判读。整个检测过程无需昂贵的仪器设备，仅通过肉眼判读即可获得检测结果。本发明在基层和现场快速检测与甄别PDCoV感染方面具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN116948022B
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202310881787.6
申请日：2023-07-18
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C07K16/18 , G01N33/577 , G01N33/68
摘要： 本发明公开了抗猪Gasdermin D蛋白单克隆抗体及其应用。本发明提供五株小鼠抗猪GSDMD蛋白的单抗，并建立了利用所述单抗对猪GSDMD蛋白进行免疫印迹和免疫荧光检测的方法。结果表明，五株单抗均能够特异性识别猪GSDMD全长蛋白(GSDMD‑FL)，其中15H6、19H3、23H10、27A10能进一步识别猪GSDMD蛋白被活化切割后所形成的具有膜成孔活性的GSDMD氨基端片段(GSDMD‑NT)，25E2识别猪GSDMD蛋白的羧基端片段(GSDMD‑CT)。本发明提供的单抗为开展猪GSDMD蛋白生物学功能研究、猪体内外细胞焦亡研究提供了必需试剂，具有广阔的商品化生产前景和良好的市场需求。
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公开(公告)号：CN117987377A
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202410159233.X
申请日：2021-04-06
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种荧光素酶标记猪繁殖与呼吸综合征病毒及其构建方法和应用。所述猪繁殖与呼吸综合征病毒为：基因序列中含有HiBiT序列的猪繁殖与呼吸综合征病毒。本发明通过将HiBiT序列插入猪繁殖与呼吸综合征病毒的序列中，构建得到了一种具有荧光酶特性，同时可以正常增殖的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒。该重组猪繁殖与呼吸综合征病毒具备较好的遗传稳定性，通过该重组病毒可以准确快速地实现病毒的定量检测和抗病毒药物的筛选。
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公开(公告)号：CN114908065A
公开(公告)日：2022-08-16
申请号：CN202210492200.8
申请日：2022-05-07
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12N7/01 , C12N7/04 , C12N15/38 , C12N15/85 , C12N15/113 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了猪伪狂犬病病毒基因工程弱毒疫苗株及其建立方法和应用。本发明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，构建得到猪伪狂犬病病毒基因工程弱毒疫苗株，即以猪伪狂犬病病毒(PRV)疫苗毒株Bartha‑K61为骨架包含变异毒株HB1201免疫保护基因gB、gC、gD的嵌合病毒，命名Bartha‑gBCDHB1201。该弱毒疫苗株遗传性质稳定，复制效率高且安全性好，同时能刺激机体产生针对国内流行的变异毒株的中和抗体，Bartha‑gBCDHB1201疫苗株能更好的阻止感染仔猪发病、降低组织病毒载量和减轻病毒感染造成的脏器损伤，提供100％完全免疫保护，适用于弱毒活疫苗与灭活疫苗的制备和使用。
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公开(公告)号：CN111593139B
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202010402843.X
申请日：2020-05-13
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种检测猪瘟病毒的RT‑RAA引物、探针和试剂盒及应用，所述检测猪瘟病毒的RT‑RAA引物和探针包括用于鉴定猪瘟病毒5’NTR基因的正向引物CSFV‑5’NTR‑F(SEQ ID NO.1)、反向引物CSFV‑5’NTR‑R(SEQ ID NO.2)和探针CSFV‑5’NTR‑Probe(SEQ ID NO.3)。通过上述引物和探针进行RT‑RAA核酸扩增所得到的扩增结果可以通过便携式蓝光仪进行肉眼可视化判断，可实现对CSFV进行快速、特异、灵敏、简便的检测，从而弥补现有检测技术的不足。
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公开(公告)号：CN114703179A
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202210482181.0
申请日：2022-05-05
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12N15/11 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , G01N33/543
摘要： 本发明涉及动物疫病检测技术领域，具体涉及检测PDCoV的RT‑RAA‑LFD引物对、探针、试纸条、试剂盒及其应用。本发明以PDCoV的ORF1b基因为诊断靶标，设计、筛选、优化并最终获得了能够特异性检测PDCoV核酸的引物对与探针。使用本发明的引物对、探针、试剂盒和试纸条可以实现对PDCoV的快速检测，等温扩增所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行结果判读。整个检测过程无需昂贵的仪器设备，仅通过肉眼判读即可获得检测结果。本发明在基层和现场快速检测与甄别PDCoV感染方面具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN111593139A
公开(公告)日：2020-08-28
申请号：CN202010402843.X
申请日：2020-05-13
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种检测猪瘟病毒的RT-RAA引物、探针和试剂盒及应用，所述检测猪瘟病毒的RT-RAA引物和探针包括用于鉴定猪瘟病毒5’NTR基因的正向引物CSFV-5’NTR-F(SEQ ID NO.1)、反向引物CSFV-5’NTR-R(SEQ ID NO.2)和探针CSFV-5’NTR-Probe(SEQ ID NO.3)。通过上述引物和探针进行RT-RAA核酸扩增所得到的扩增结果可以通过便携式蓝光仪进行肉眼可视化判断，可实现对CSFV进行快速、特异、灵敏、简便的检测，从而弥补现有检测技术的不足。
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公开(公告)号：CN104593336B
公开(公告)日：2019-05-17
申请号：CN201410823151.7
申请日：2014-12-25
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明提供了一种猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒RvHBJX及其应用，属于病毒基因工程技术领域。本发明的猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒RvHBJX是以低致病性PRRSV毒株HB‑1/3.9为骨架包含高致病性PRRSV毒株JXwn06结构蛋白编码区的嵌合病毒，该嵌合病毒经MARC‑145细胞体外连续传代80次，该病毒遗传性质表现稳定；病毒对宿主细胞的适应性随传代次数的增加逐渐增强；嵌合病毒传代60次(P60)及以上对本体动物具有较好的安全性，且接种后能够对高致病性PRRSV毒株感染提供100％的免疫保护，可作为猪繁殖与呼吸综合征的疫苗侯选株，用于预防猪繁殖与呼吸综合征，具有良好的应用前景。
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