鉴定新城疫病毒和多亚型禽流感病毒的引物对及其应用

    公开(公告)号:CN102321769B

    公开(公告)日:2013-05-29

    申请号:CN201110303463.1

    申请日:2011-10-09

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定新城疫病毒和多亚型禽流感病毒的引物对及其应用。本发明提供的PCR引物对组合物由引物对NDV、引物对H3V、引物对H5V和引物对H9V组成;该PCR引物对组合物可用于制备诊断或辅助诊断新城疫和禽流感试剂,或制备鉴定或辅助鉴定新城疫病毒和多亚型禽流感病毒试剂。使用本发明所提供的PCR引物对组合物同时检测新城疫病毒、H3、H5和H9亚型禽流感病毒的特异性强,灵敏度分别为1EID50/100μl、1EID50/100μl、1×10-2EID50/100μl和1EID50/100μl,与病毒分离和血凝抑制实验等常规实验方法的鉴定结果相比,符合率达100%,适合开发相应的多重RT-PCR试剂盒,以用于新城疫和禽流感的临床诊断和流行病控制。

    双表达盒的表达载体及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN101463361B

    公开(公告)日:2011-07-20

    申请号:CN200910076381.0

    申请日:2009-01-14

    Abstract: 本发明公开了一种双表达盒的表达载体及其制备方法与应用。该表达载体是一种环状载体,包含原核复制起点、两个真核复制起点、筛选标记基因和两个外源基因表达盒;所述两个外源基因表达盒分别为外源基因表达盒1和外源基因表达盒2;所述外源基因表达盒1自上游至下游依次含有两个转录方向相同的启动子、连接片段1和多聚腺苷酸加尾信号,所述连接片段1含有EcoRV识别序列;所述外源基因表达盒2自上游至下游依次含有两个转录方向相同的启动子、连接片段2和多聚腺苷酸加尾信号,所述连接片段2含有StuI识别序列。本发明的pDP-EX-vector含有两个外源基因表达盒、两个真核复制起点,可以在表达T抗原的细胞中大量增值,从而提高蛋白表达的水平,具有很好的应用前景。

    禽源启动子表达载体及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN101481703A

    公开(公告)日:2009-07-15

    申请号:CN200910076382.5

    申请日:2009-01-14

    Abstract: 本发明公开了一种禽源启动子表达载体及其构建方法与应用。该禽源启动子表达载体是一种环状载体,包含原核复制起点、一个真核复制起点、筛选标记基因和外源基因表达盒;所述外源基因表达盒自上游至下游依次含有LTR启动子、连接片段和多聚腺苷酸加尾信号;所述LTR启动子的核苷酸序列为序列表中序列1自5′末端第1-607位;所述连接片段含有EcoRV识别序列。使用本发明的pAPP-Vector构建表达外源基因的重组载体的过程简便、快速、经济、高效,可以快速完成大量外源基因的表达载体的构建。将在转基因动物研究中发挥重要作用。

    融合表达绿色荧光蛋白的表达载体及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN101463362A

    公开(公告)日:2009-06-24

    申请号:CN200910077103.7

    申请日:2009-01-15

    Abstract: 本发明公开了一种融合表达绿色荧光蛋白的表达载体及其构建方法与应用。该载体是一种环状载体,包含原核复制起点、真核复制起点、筛选标记基因和绿色荧光蛋白基因表达盒;所述绿色荧光蛋白基因表达盒自上游至下游依次由两个转录方向相同的启动子、连接片段、绿色荧光蛋白编码区基因和多聚腺苷酸加尾信号组成;所述绿色荧光蛋白编码区基因缺失起始密码子,所述连接片段含有EcoRV识别序列,所述绿色荧光蛋白编码区基因自5’末端第1位和第2位与EcoRV识别序列自5’末端的最后两位重叠;所述连接片段含有或不含有起始密码子;当所述连接片段含有起始密码子时,所述起始密码子与所述EcoRV识别序列自5’末端第一位间隔2+3n或1+3n位,n为正整数。该载体含有绿色荧光蛋白基因,且只有在插入的外源基因正确表达的情况下才能表达,从而可以有效的排除出发载体表达荧光而出现的干扰问题。

    A型流感病毒核蛋白捕获ELISA抗原诊断试剂盒及专用单克隆抗体

    公开(公告)号:CN101348777A

    公开(公告)日:2009-01-21

    申请号:CN200810117227.9

    申请日:2008-07-25

    Abstract: 本发明公开了一种A型流感病毒核蛋白捕获ELISA抗原诊断试剂盒及专用单克隆抗体。该抗A型禽流感病毒核蛋白特异性单克隆抗体,是由保藏号为CGMCC No.2575的对A型流感病毒NP蛋白杂交瘤细胞株C4分泌产生的。该试剂盒,包括已包被所述的单克隆抗体的固体载体和酶标记的所述的单克隆抗体。本发明的抗A型禽流感病毒核蛋白特异性单克隆抗体效价和特异性高。所述的试剂盒操作简单,敏感性高,特异性强,可用于A型流感病毒临床检测和实验室检测,具有很高的应用价值。

    H9N2亚型禽流感冷适应减毒株及其应用

    公开(公告)号:CN105039270A

    公开(公告)日:2015-11-11

    申请号:CN201510490809.1

    申请日:2015-08-11

    Abstract: 本发明公开了一种H9N2亚型流感病毒冷适应减毒株及其应用。本发明提供的H9亚型禽流感冷适应病毒H9AIV-SD/01/10-CA,保藏登记号为CGMCC NO.10908。本发明提供的H9AIV-SD/01/10-CA毒株为减毒株,可以作为活疫苗使用,相对于现有的灭活疫苗具有如下优势:(1)可以产生具有交叉保护效力的细胞免疫和粘膜免疫,抵抗不同流行毒株的感染;(2)可以诱导细胞免疫反应,在免疫后迅速产生保护效力,在免疫后10-14天即可抵抗流感病毒的感染;(3)接种次数少,免疫持续期长。本发明对于H9N2病毒的防治至关重要。

    一种拯救流感病毒的方法
    38.
    发明公开

    公开(公告)号:CN104372023A

    公开(公告)日:2015-02-25

    申请号:CN201410643862.6

    申请日:2014-11-10

    Abstract: 本发明公开了一种拯救重组流感病毒的方法。该方法包括:1)将编码流感病毒鸡胚适应株中PB2、PB1、PA、NP、NA、M1和M2、NS1和NS2的cDNA分子以及编码待拯救流感病毒毒株中PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M1和M2、NS1和NS2的cDNA分子这15个cDNA分子每个单独插入真核细胞表达载体,得到15个重组表达载体。2)将所述15个重组表达载体导入包装细胞中,得到重组流感病毒。从该拯救重组流感病毒的方法中得到的重组流感病毒疫苗株在鸡胚中具有高复制力,比传统疫苗在鸡胚中的生长滴度也要高,通过对疫苗种子毒进行抗原性检测发现,疫苗种子毒的抗原性与亲本病毒没有明显差异。

    鉴定H3亚型禽流感病毒的PCR引物对及其应用

    公开(公告)号:CN102304591A

    公开(公告)日:2012-01-04

    申请号:CN201110302176.9

    申请日:2011-10-08

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定H3亚型禽流感病毒的PCR引物对及其应用。本发明所提供的PCR引物对是由两条单链DNA组成,所述两条单链DNA是序列表中序列1所示的单链DNA和序列表中序列2所示的单链DNA。本发明所提供的引物对用于检测H3亚型禽流感病毒的特异性高,灵敏度可达1EID50/100μl,与病毒分离和血凝抑制实验等常规实验方法的鉴定结果相比的符合率为100%;不仅可以对待测病禽的口腔拭子、泄殖拭子进行检测,还可检测病禽尿囊液,操作简单、容易推广,便于基层操作和应用,可成为H3亚型禽流感病毒疫病诊断和流行病学调查的有用检测工具。

    A型流感病毒核蛋白捕获ELISA抗原诊断试剂盒及专用单克隆抗体

    公开(公告)号:CN101348777B

    公开(公告)日:2011-08-31

    申请号:CN200810117227.9

    申请日:2008-07-25

    Abstract: 本发明公开了一种A型流感病毒核蛋白捕获ELISA抗原诊断试剂盒及专用单克隆抗体。该抗A型禽流感病毒核蛋白特异性单克隆抗体,是由保藏号为CGMCC No.2575的对A型流感病毒NP蛋白杂交瘤细胞株C4分泌产生的。该试剂盒,包括已包被所述的单克隆抗体的固体载体和酶标记的所述的单克隆抗体。本发明的抗A型禽流感病毒核蛋白特异性单克隆抗体效价和特异性高。所述的试剂盒操作简单,敏感性高,特异性强,可用于A型流感病毒临床检测和实验室检测,具有很高的应用价值。

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