公开(公告)号：CN104372023B

公开(公告)日：2017-02-08

申请号：CN201410643862.6

申请日：2014-11-10

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 孙怡朋 ,  刘金华 ,  沈晔 ,  蒲娟

IPC: C12N15/85 ,  C12N7/01 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种拯救重组流感病毒的方法。该方法包括：1)将编码流感病毒鸡胚适应株中PB2、PB1、PA、NP、NA、M1和M2、NS1和NS2的cDNA分子以及编码待拯救流感病毒毒株中PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M1和M2、NS1和NS2的cDNA分子这15个cDNA分子每个单独插入真核细胞表达载体，得到15个重组表达载体。2)将所述15个重组表达载体导入包装细胞中，得到重组流感病毒。从该拯救重组流感病毒的方法中得到的重组流感病毒疫苗株在鸡胚中具有高复制力，比传统疫苗在鸡胚中的生长滴度也要高，通过对疫苗种子毒进行抗原性检测发现，疫苗种子毒的抗原性与亲本病毒没有明显差异。

公开(公告)号：CN103614345A

公开(公告)日：2014-03-05

申请号：CN201310581504.2

申请日：2013-11-19

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 孙怡朋 ,  刘金华 ,  张谞霄 ,  沈晔

IPC: C12N7/01 ,  A61K39/145 ,  A61P31/16 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种流感病毒疫苗株。本发明公开的一种病毒，其PB2蛋白、PB1蛋白、PA蛋白、NP蛋白、NA蛋白、M1蛋白、M2蛋白、NS1蛋白、NS2蛋白和HA蛋白的氨基酸序列分别如SEQ ID No.26、SEQ ID No.34、SEQ ID No.33、SEQ ID No.21、SEQ ID No.29、SEQ ID No.27、SEQ ID No.28、SEQ ID No.31、SEQ ID No.32和SEQ ID No.16所示。本发明公开的重组病毒可以在MDCK细胞中快速、高产、稳定的增殖，与利用鸡胚制备疫苗的方法相比具有明显的优势，并且该重组病毒的灭活疫苗可以用于保护动物免受流感病毒的侵染。

公开(公告)号：CN103614345B

公开(公告)日：2016-01-20

申请号：CN201310581504.2

申请日：2013-11-19

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 孙怡朋 ,  刘金华 ,  张谞霄 ,  沈晔

IPC: C12N7/01 ,  A61K39/145 ,  A61P31/16 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种流感病毒疫苗株。本发明公开的一种病毒，其PB2蛋白、PB1蛋白、PA蛋白、NP蛋白、NA蛋白、M1蛋白、M2蛋白、NS1蛋白、NS2蛋白和HA蛋白的氨基酸序列分别如SEQ ID No.26、SEQ ID No.34、SEQ ID No.33、SEQ ID No.21、SEQ ID No.29、SEQ ID No.27、SEQ ID No.28、SEQ ID No.31、SEQ ID No.32和SEQ ID No.16所示。本发明公开的重组病毒可以在MDCK细胞中快速、高产、稳定的增殖，与利用鸡胚制备疫苗的方法相比具有明显的优势，并且该重组病毒的灭活疫苗可以用于保护动物免受流感病毒的侵染。

公开(公告)号：CN104372023A

公开(公告)日：2015-02-25

申请号：CN201410643862.6

申请日：2014-11-10

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 孙怡朋 ,  刘金华 ,  沈晔 ,  蒲娟

IPC: C12N15/85 ,  C12N7/01 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种拯救重组流感病毒的方法。该方法包括：1)将编码流感病毒鸡胚适应株中PB2、PB1、PA、NP、NA、M1和M2、NS1和NS2的cDNA分子以及编码待拯救流感病毒毒株中PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M1和M2、NS1和NS2的cDNA分子这15个cDNA分子每个单独插入真核细胞表达载体，得到15个重组表达载体。2)将所述15个重组表达载体导入包装细胞中，得到重组流感病毒。从该拯救重组流感病毒的方法中得到的重组流感病毒疫苗株在鸡胚中具有高复制力，比传统疫苗在鸡胚中的生长滴度也要高，通过对疫苗种子毒进行抗原性检测发现，疫苗种子毒的抗原性与亲本病毒没有明显差异。