公开(公告)号：CN111394293B

公开(公告)日：2023-03-10

申请号：CN202010284335.6

申请日：2020-04-10

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 王爱华 ,  支飞杰 ,  周栋 ,  靳亚平 ,  田璐璐 ,  陈蕾 ,  李俊玫 ,  张广冻 ,  秦佩佩

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  C12N15/65 ,  C12N15/66 ,  A61K39/10 ,  A61P31/04 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一株布鲁氏菌S2疫苗株Omp16基因条件性诱导缺失菌株，该菌株为猪种布鲁氏菌S2 Omp16ΔOmp16，于2019年12月2日保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：M2019991。所述菌株为在条件性诱导外源Omp16表达的基础上缺失内源性Omp16基因的布鲁氏菌S2疫苗株，可用于制备布鲁氏菌减毒疫苗。布鲁氏菌S2疫苗株Omp16基因条件性诱导缺失菌株为探究Omp16对布鲁氏菌的致病机制及区分自然感染和人工免疫的特性奠定基础，对预防和控制布病具有重要的意义。

公开(公告)号：CN111440755A

公开(公告)日：2020-07-24

申请号：CN202010283492.5

申请日：2020-04-10

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 王爱华 ,  支飞杰 ,  周栋 ,  靳亚平 ,  田璐璐 ,  秦佩佩 ,  李俊玫 ,  张广冻 ,  陈蕾

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  C12N15/90 ,  C12N15/66 ,  C12N15/31 ,  A61K39/10 ,  A61P31/04 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一株布鲁氏菌S2疫苗株DnaA条件性诱导缺失菌株，该菌株为在条件性诱导外源DnaA表达的基础上缺失内源性DnaA基因的布鲁氏菌S2疫苗株，可用于制备布鲁氏菌减毒疫苗。布鲁氏菌S2疫苗株DnaA条件性诱导缺失菌株为探究DnaA对布鲁氏菌的致病机制及区分自然感染和人工免疫的特性奠定基础，对预防和控制布病具有重要的意义。

公开(公告)号：CN110699312A

公开(公告)日：2020-01-17

申请号：CN201911190912.9

申请日：2019-11-28

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 王爱华 ,  张广冻 ,  靳亚平 ,  周栋 ,  钟方粒 ,  陈蕾 ,  秦佩佩 ,  支飞杰 ,  李俊玫 ,  田路路

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  G01N33/569 ,  A61K39/10 ,  A61P31/04 ,  C12R1/01

Abstract: 一株猪种布鲁氏菌BI-1基因缺失菌株及其构建方法和应用，该菌株是通过卡那霉素抗性基因替换猪种布鲁氏菌BI-1基因得到的，其主要步骤为：以猪种布鲁氏菌S2疫苗株基因组为模板，PCR扩增得到BI-1基因上、下游同源臂，与同样PCR扩增得到的卡那霉素抗性基因片段一起克隆入pUC18质粒，获得同源重组缺失质粒pUC18-BI1-KanR。将该质粒电转化猪种布鲁氏菌感受态细胞，经PCR鉴定，所得阳性转化子即为猪种布鲁氏菌BI-1缺失菌株。与野生型菌株相比，该缺失菌株表现出生长速度减缓，菌落减小，细胞膜通透性增加，细胞聚合性增强等特点，提示该缺失菌株具有作为布鲁氏菌减毒活疫苗的潜质。

公开(公告)号：CN102226199A

公开(公告)日：2011-10-26

申请号：CN201110109950.4

申请日：2011-04-29

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 靳亚平 ,  胡林勇 ,  王爱华 ,  张涌 ,  李倩 ,  陈华涛

IPC: C12N15/85

Abstract: 本发明公开了一种用于生产外源蛋白的山羊β-乳球蛋白基因座打靶载体构建方法，以山羊β-乳球蛋白基因5’端调控序列BLG5作为5’端同源臂，以山羊β-乳球蛋白基因3’端包含第6、第7外显子及下游的序列BLG3作为3’端同源臂，以第5外显子和第5内含子的部分序列E5作为连接序列用以将正筛选标记基因置于第5内含子中；将BLG5、目的基因及E5顺次连接，再和BLG3分别连接到通用型打靶载体中正筛选标记两侧。在需要时可以将目标蛋白的基因组DNA或cDNA序列插入到该通用打靶载体的目的基因位置处或直接置换掉原来的目的基因，然后用所获得的打靶载体转染山羊胎儿成纤维细胞或其他细胞，筛选出中靶的细胞，通过体细胞核移植技术获得能在乳腺中生产目标蛋白的转基因山羊。