基于纳米颗粒团聚的DNA去甲基化酶的生物传感方法

    公开(公告)号:CN102586463B

    公开(公告)日:2014-12-10

    申请号:CN201210073843.5

    申请日:2012-03-20

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于纳米颗粒团聚的DNA去甲基化酶的生物传感方法。制备了核酸功能化的纳米颗粒探针,特定的核酸序列中包含了限制性内切酶的切割位点并进行了甲基化处理,激活的DNA去甲基化酶使甲基化的DNA发生去甲基化作用,从而对甲基化敏感的限制性内切酶和核酸外切酶同时消化降解DNA,导致纳米颗粒团聚,产生耦合增强,实现了高灵敏度的SERS检测。同时,该方法会产生光吸收性质的变化,也可以通过比色法进行检测。操作步骤简单、快速,灵敏度高、特异性强,有望成为研究全基因组范围内的DNA去甲基化问题以及表观遗传重编排过程的新方法之一,对于生物大分子的功能研究、活性分析和抑制剂考察也提供了技术手段。

    基于磷脂修饰的纳米颗粒团聚的磷脂酶A2的生物传感方法

    公开(公告)号:CN102661926B

    公开(公告)日:2014-09-17

    申请号:CN201210075069.1

    申请日:2012-03-20

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明制备了拉曼染料修饰的磷脂双层膜包裹的金纳米颗粒探针,激活的PLA2水解甘油磷脂sn-2位的脂酰键,使磷脂双层膜结构的稳定性受到破坏,导致纳米颗粒团聚,导致纳米颗粒团聚,表面等离子体发生耦合作用,在颗粒之间产生了巨大的电磁场,显著增强了颗粒表面吸附分子的拉曼信号,实现了高灵敏度的SERS检测。同时,该方法会产生光吸收性质的变化,也可以通过比色法进行检测。该方法不需要对酶底物进行标记,操作步骤简单、快速,成本低,灵敏度高,特异性强,重现性好。有望成为一种有用的PLA2定量分析方法,对于研究抗菌、抗炎症以及细胞毒性、药理毒理作用、代谢稳定性及其机制具有重要的意义。

    基于表面等离子体耦合效应的均相多组分免疫分析方法

    公开(公告)号:CN102914646B

    公开(公告)日:2014-08-20

    申请号:CN201210463931.6

    申请日:2012-11-16

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于表面等离子体耦合效应的均相多组分免疫分析方法,分别制备了表面修饰有拉曼活性染料和捕获抗体的金纳米球探针和表面修饰有拉曼活性染料和检测抗体的金纳米棒探针,拉曼活性染料自身带有巯基且无荧光背景,抗体经TCEP还原处理。待测物抗原与抗体发生免疫夹心反应,生成免疫复合物,拉近纳米颗粒之间的距离,产生表面等离子体耦合效应,显著增强了纳米颗粒表面修饰染料的拉曼信号,利用耦合增强效应实现了对抗原的SERS定量分析。该方法简单、快速,检测过程只需要一步操作,不需要反复洗脱,无需对样品进行分离,实现了样品中含有多个组分的同步定量分析,灵敏度高,特异性好,有望成为蛋白组学研究和药物疗效评估的一种新方法。

    基于磷脂双分子层膜包裹的纳米颗粒团聚的霍乱毒素的生物传感方法

    公开(公告)号:CN102608311B

    公开(公告)日:2013-12-25

    申请号:CN201210116434.9

    申请日:2012-04-19

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种定量分析霍乱毒素的生物传感方法,制备了拉曼染料修饰的磷脂双分子层膜包裹的金纳米颗粒探针,选用功能化磷脂,即头端修饰巯基的磷脂,它能共价结合在金纳米颗粒表面,使金纳米颗粒探针的稳定性得到了提高。霍乱毒素B亚单元(CTB)与多个受体GM1分子特异性结合,导致包裹有GM1分子的金纳米颗粒团聚,表面等离子体发生耦合作用,实现了高灵敏的SERS检测。同时,该方法会产生光吸收性质的变化,也可以通过比色法进行检测。操作步骤简单、快速,不需要对底物进行任何标记,成本低,灵敏度高,特异性好,有望成为有用的检测与鉴定霍乱毒素的技术手段,对于食品安全监测以及控制和预防食源性疾病具有重要的意义。

    基于表面等离子体耦合效应的均相多组分免疫分析方法

    公开(公告)号:CN102914646A

    公开(公告)日:2013-02-06

    申请号:CN201210463931.6

    申请日:2012-11-16

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于表面等离子体耦合效应的均相多组分免疫分析方法,分别制备了表面修饰有拉曼活性染料和捕获抗体的金纳米球探针和表面修饰有拉曼活性染料和检测抗体的金纳米棒探针,拉曼活性染料自身带有巯基且无荧光背景,抗体经TCEP还原处理。待测物抗原与抗体发生免疫夹心反应,生成免疫复合物,拉近纳米颗粒之间的距离,产生表面等离子体耦合效应,显著增强了纳米颗粒表面修饰染料的拉曼信号,利用耦合增强效应实现了对抗原的SERS定量分析。该方法简单、快速,检测过程只需要一步操作,不需要反复洗脱,无需对样品进行分离,实现了样品中含有多个组分的同步定量分析,灵敏度高,特异性好,有望成为蛋白组学研究和药物疗效评估的一种新方法。

    纳米亚麻酸乳剂的制备方法

    公开(公告)号:CN1186018C

    公开(公告)日:2005-01-26

    申请号:CN02139891.7

    申请日:2002-12-30

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 一种纳米亚麻酸乳剂的制备方法,其特征在于:①制取混合乳化剂水溶液,将二种可食乳化剂,按相同重量比例混合(各占50%),取这种混合乳化剂,配制成重量百分比浓度为0.5~2.0%的水溶液即成;②取亚麻酸油,加入10~15倍纯净水,不断搅拌下加入前述制得的混合乳化剂水溶液,加入的乳化剂量占溶液总重量的0.20‰~0.40‰,使上述混合后的溶液成乳化状;③采用高速剪切乳化设备剪切分散15~30分钟,使亚麻酸形成具有纳米尺度的稳定的油包水颗粒,即得本发明的纳米亚麻酸乳剂。本发明具有工艺简单、制造成本低、便于操作推广等优点。

    一种基于连接的环介导等温扩增技术用于基因突变检测方法

    公开(公告)号:CN106148549A

    公开(公告)日:2016-11-23

    申请号:CN201610786262.4

    申请日:2016-08-31

    Applicant: 湖南大学

    CPC classification number: C12Q1/6858 C12Q2525/301 C12Q2563/107 C12Q2531/119

    Abstract: 本发明提供了一种基于连接的环介导等温扩增技术用于基因突变检测方法,所述检测方法包括如下步骤:(1)以目标DNA为模板设计两条DNA发夹探针H1和H2;(2)在目标存在的情况下,目标DNA与H1和H2退火杂交,在H1的3'末端完全互补的情况下,用连接酶将H1和H2连接形成双哑铃DNA结构;(3)以双哑铃DNA为模板进行环介导等温扩增反应,得到环介导等温扩增产物;(4)向环介导等温扩增产物中加入DNA双链特异性染料SYBR GreenI后荧光信号增强,通过对荧光信号的检测实现对基因突变的定量检测。本发明所述的基因突变检测方法具有非常低的检测下限,较高的选择性和特异性。

    基于磷脂分子修饰纳米金颗粒的团聚反应分析检测酶及其抑制剂的生物传感方法

    公开(公告)号:CN102586400B

    公开(公告)日:2014-08-27

    申请号:CN201210073838.4

    申请日:2012-03-20

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明建立了一个基于磷脂分子修饰纳米金颗粒团聚的生物分析方法,用于生物学研究、食品检测、环境分析的通用的传感技术平台。此技术包括基于磷脂分子修饰纳米金颗粒方法;磷脂分子修饰纳米金颗粒与酶及其抑制剂的特异反应;特定磷脂分子的绑定蛋白标记纳米金颗粒技术;磷脂分子修饰的纳米金颗粒与蛋白标记的纳米金颗粒发生团聚反应引起紫外可见吸收光强度的变化,定量分析检测酶及其抑制剂。该方法灵敏度高、操作简单、特异性强,可望成为一种用于生物学研究、食品检测、环境分析的通用技术。

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