一种MBP融合肝素酶Ⅱ及其编码基因与制备方法

    公开(公告)号:CN105754979A

    公开(公告)日:2016-07-13

    申请号:CN201410778633.5

    申请日:2014-12-15

    Inventor: 邢新会 苏楠 张翀

    Abstract: 本发明公开了一种MBP融合肝素酶Ⅱ,该MBP融合肝素酶Ⅱ是如下a)或b)的蛋白:a)序列表中序列1的氨基酸序列组成的蛋白;b)序列表中序列1氨基酸序列经过对构成MBP融合肝素酶Ⅱ蛋白中肝素酶Ⅱ二聚体结合面的33个氨基酸位点中的一个或多个定点突变的蛋白。上述蛋白的编码基因及制备方法也属于本发明的保护范围。本发明通过基因工程手段对MBP融合肝素酶Ⅱ进行定点突变,最终获得催化活性及热稳定性都明显提高的MBP融合肝素酶Ⅱ。

    一种生产紫色杆菌素的工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN104694448A

    公开(公告)日:2015-06-10

    申请号:CN201310656314.2

    申请日:2013-12-06

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种生产紫色杆菌素的工程菌及其应用。本发明提供的工程菌,是将大肠杆菌进行如下(a)和(b)和(c)的改造得到的重组菌:(a)沉默抑制色氨酸生成的蛋白的编码基因;(b)导入参与色氨酸生成的蛋白的编码基因;(c)导入参与紫色杆菌素途径的各个蛋白的编码基因,所述紫色杆菌素途径为以色氨酸为底物生成紫色杆菌素的途径。本发明解决了紫色杆菌素发酵过程需要添加色氨酸的问题,以葡萄糖作为主要碳源生产紫色杆菌素,大幅降低了发酵制备紫色杆菌素的成本。

    一种调节秸秆发酵产氢的方法

    公开(公告)号:CN103484501B

    公开(公告)日:2015-05-13

    申请号:CN201310482059.4

    申请日:2013-10-15

    Abstract: 本发明属于生物质能源领域,涉及一种降解秸秆发酵制氢的方法。为一种调节秸秆发酵制氢的方法,它包括如下步骤:(1)对秸秆进行汽爆预处理,(2)将步骤(1)中预处理的秸秆与厌氧污泥一起加入到制氢反应器中,搅拌均匀后进行厌氧发酵,制得氢气;其中在所述步骤(2)中,通过调节醛类发酵抑制物的不同浓度调节制氢反应,反应条件为pH5.5-7,温度30-50℃,时间为1-5天;所述汽爆处理的湿秸秆不经烘干或水洗脱毒处理直接进行厌氧发酵;所述醛类发酵抑制物为5-羟甲基糠醛(5-HMF)和/或糠醛(FUR)。本发明得到的方法可使经汽爆湿秸秆无需脱毒直接进行发酵产氢,降低汽爆秸秆的发酵成本;所述醛类发酵抑制物可在秸秆汽爆过程中自然产生,在后续发酵过程中可全部或部分降解,使得毒性的降解抑制物成为有效的发酵调节剂。

    一种制备紫色杆菌素的方法及其专用菌

    公开(公告)号:CN102703367A

    公开(公告)日:2012-10-03

    申请号:CN201110075105.X

    申请日:2011-03-28

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种制备紫色杆菌素的方法及其专用菌。该重组甲基扭曲杆菌,是将紫色杆菌素生物合成相关基因簇导入宿主甲基扭曲杆菌中得到的。本发明的制备紫色杆菌素的方法成本低廉,一方面发酵使用的培养基成分简单、成本低廉,另一方面本发明方法只需以甲醇作为碳源,就可以发酵得到紫色杆菌素,甲醇是能够通过石油或者生物可再生资源合成的,价格低廉,本发明方法实现了用廉价可再生资源工业化生产紫色杆菌素;本发明方法操作简单,产率高,可达0.15g/l发酵液。本发明的重组菌产紫色杆菌素的效果好。因此,本发明重组菌及紫色杆菌素的制备方法具有广阔的应用前景。

    甲烷氧化混合菌的保存方法

    公开(公告)号:CN101638631B

    公开(公告)日:2011-07-20

    申请号:CN200910092357.6

    申请日:2009-09-07

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种甲烷氧化混合菌的保存方法。本发明的方法中,包括将甲烷氧化混合菌菌体置于-70℃~-80℃冻存的步骤。本发明提供的保存甲烷氧化混合菌的方法没有引入其他碳源,可以稳定地保持混合菌群的结构和功能,并且操作方便,需要使用时,将冻存的菌体倒入培养基中培养即可。本发明将在甲烷氧化混合菌的保存及其工业化应用中发挥重要作用。

    产脱氧紫色杆菌素的重组恶臭假单孢菌及其应用

    公开(公告)号:CN101368169B

    公开(公告)日:2011-04-27

    申请号:CN200810224359.1

    申请日:2008-10-17

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了产脱氧紫色杆菌素的重组恶臭假单孢菌及其应用。本发明的重组恶臭假单孢菌将脱氧紫色杆菌素合成相关基因簇导入恶臭假单孢菌中获得的重组菌,所述脱氧紫色杆菌素合成相关基因簇编码紫色杆菌素合成途径中的VioA、VioB、VioC和VioE四种酶。所述重组恶臭假单孢菌可用来生产脱氧紫色杆菌素。生产脱氧紫色杆菌素的方法是以L-色氨酸为底物利用所述重组恶臭假单孢菌发酵生产脱氧紫色杆菌素。本发明的重组恶臭假单孢菌生产的脱氧紫色杆菌素,其产率较高,可用于工业化生产。

    一种制备超低分子量肝素的方法

    公开(公告)号:CN101671711A

    公开(公告)日:2010-03-17

    申请号:CN200910092339.8

    申请日:2009-09-10

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种制备超低分子量肝素的方法。本发明提供的方法,是用麦芽糖结合蛋白-肝素酶I融合蛋白降解底物中的肝素,得到超低分子量肝素;所述麦芽糖结合蛋白-肝素酶I融合蛋白,是具有序列表中的SEQ ID №:1的氨基酸残基序列的蛋白质;所述麦芽糖结合蛋白-肝素酶I融合蛋白的用量是0.4-4.0IU/g肝素,优选是1.6IU/g肝素。因此利用该融合蛋白生产的超低分子量肝素具有理想平均分子量且分子量分布范围窄,具有巨大的工业应用价值。

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