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公开(公告)号：CN102040187A
公开(公告)日：2011-05-04
申请号：CN201010545476.5
申请日：2010-11-12
Applicant: 浙江大学
IPC: B81C1/00
Abstract: 本发明公开的核壳结构ZnO纳米线阵列的生长方法，采用的是热蒸发法，步骤如下：1)采用磁控溅射装置在衬底上生长籽晶层。2)将纯ZnO粉末和石墨粉放入一端封口的石英管中，将生长了籽晶层的衬底放在石英管内放入生长室，生长得到在衬底上垂直的ZnO纳米线阵列。3)利用旋涂仪把CH3COCH2COCH3、Ti(OC4H9)4和H2O溶于酒精中得到的混合溶液均匀涂于垂直ZnO纳米线阵列的空隙中，在空气中200℃下退火，得到TiO2包覆的核壳结构ZnO纳米线阵列。本发明制备工艺简单，成本低；可以实现ZnO纳米线阵列的可控生长；制得的核壳结构ZnO纳米线阵列中的ZnO纳米线密度与尺寸分布较均匀。
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公开(公告)号：CN101914560A
公开(公告)日：2010-12-15
申请号：CN201010268770.6
申请日：2010-09-01
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶的变体基因，该基因的DNA序列为SEQ ID NO.1。本发明变体基因通过在编码野生GAD酶基因基础上进行定点突变，提高了其对应变体酶在中性pH值的催化活力，拓宽了酶的最适pH值范围，使对应的变体酶在pH6.0条件下催化谷氨酸生成GABA的能力提高到野生型酶的2倍。随着酶的最适pH值范围的拓宽，使得催化反应可以在高于pH 5.0的条件进行，因此也解决了在pH4.0-5.0条件下催化时底物谷氨酸溶解度低的问题，为利用该酶通过生物转化生产GABA创造了条件。
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公开(公告)号：CN1673351A
公开(公告)日：2005-09-28
申请号：CN200510049188.X
申请日：2005-03-07
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种产γ－氨基丁酸的短乳杆菌及其用途。短乳杆菌(Lactobacillus brevis)，其保藏编号为：CGMCCNO.1306，显微镜观察成对或成链状出现，不运动，无孢子，菌落小，表面光滑；属于革兰氏阳性菌株，兼性厌氧。保藏编号为：CGMCCNO.1306的短乳杆菌(Lactobacillus brevis)用于生产γ－氨基丁酸。本发明采用生物法合成γ－氨基丁酸是利用乳酸菌体内含有高活性的谷氨酸脱羧酶，此酶以L－谷氨酸钠(L－MSG)为底物，将L－谷氨酸钠(L－MSG)α－脱羧，产生γ－氨基丁酸和CO2。乳酸菌制品的健康功效世人公认，被FDA认为是GRAS(generally recognized as safe)级食品添加剂。因此，此法生产的γ－氨基丁酸不存在安全上的隐患，能达到食品安全级。
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公开(公告)号：CN107312787B
公开(公告)日：2020-04-14
申请号：CN201710586367.X
申请日：2017-07-18
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种融合蛋白基因、工程菌及其在制备9α‑羟基‑雄烯二酮中的应用，其中，所述融合蛋白基因包括编码3‑甾酮‑9α‑羟基化酶的基因和编码细胞色素P450 BM‑3酶中黄素域的基因。本发明将3‑甾酮‑9α‑羟基化酶在大肠杆菌中异源表达，并通过基因重组技术，将3‑甾酮‑9α‑羟基化酶与细胞色素P450 BM‑3酶的黄素域进行融合表达，得到融合蛋白KshA‑P450，并使用含有该融合蛋白的重组工程菌催化底物雄烯二酮制备9α‑羟基‑雄烯二酮，不仅提高了比活力，同时也提高了转化率。
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公开(公告)号：CN103031323B
公开(公告)日：2014-10-08
申请号：CN201110297904.1
申请日：2011-09-30
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明涉及一种谷氨酸脱羧酶热稳定变体G56P基因，其核苷酸序列在第56位有定点突变。研究发现，此位点突变后得到的变体基因编码的谷氨酸脱羧酶的热稳定性有所增强。本发明通过在编码野生GAD酶基因基础上进行定点突变，提高了其对应变体酶在在60℃和70℃下的热稳定性。随着酶热稳定性的提高，在工业生产过程中可以采用更高的操作温度，以提高反应速率、增加底物溶解度，有利于利用该酶通过生物转化生产GABA。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102583227B
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN201210064478.1
申请日：2012-03-13
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明涉及ZnO三维同质pn结纳米阵列及其制备方法，该阵列的主干为垂直于衬底的一维p型ZnO纳米线，分支为径向分布的n型ZnO纳米棒。制备方法包括利用气相法在衬底上制备一维直立的ZnO纳米线阵列，通过扩散法把上述阵列转变为一维p型ZnO纳米线阵列，最后通过水热法在p型ZnO纳米阵列上生长径向分布的n型ZnO纳米棒。本发明方法简单易行，重复性高，可通过控制气相反应生长温度和液相溶液浓度来分别调节三维ZnO纳米同质pn结阵列主干和分支的长度和密度，可广泛应用于纳米光电、光催化和能量转换器件等领域。
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公开(公告)号：CN103789246A
公开(公告)日：2014-05-14
申请号：CN201410005932.5
申请日：2014-01-03
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种透性化谷氨酸脱羧酶工程菌及其制备方法，所述方法包括：将已表达谷氨酸脱羧酶的谷氨酸脱羧酶工程菌菌体悬浮于水或缓冲液中，50～70℃处理5～40min后，收集菌体，得到所述的透性化谷氨酸脱羧酶工程菌；其中，所述的谷氨酸脱羧酶工程菌包括宿主细胞和转入宿主细胞的谷氨酸脱羧酶基因，所述的宿主细胞为大肠杆菌。本发明还提供了所述方法得到的透性化谷氨酸脱羧酶工程菌。本发明的方法，简便、成本低，易于操作，可有效提高菌体的谷氨酸脱羧酶表观催化活力。
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公开(公告)号：CN103773731A
公开(公告)日：2014-05-07
申请号：CN201410005648.8
申请日：2014-01-03
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种提高谷氨酸脱羧酶重组工程菌表观催化活力的方法，包括：将谷氨酸脱羧酶重组工程菌接种至培养基中，振荡培养，获得种子液；将种子液接种至培养基中，振荡培养至OD600为0.6～0.8时，加入诱导剂进行诱导培养，加入诱导剂的同时向培养基中加入细胞壁合成抑制剂或者表面活性剂来干扰重组菌细胞壁或（和）细胞膜的合成，达到增强菌体通透性、提高菌体表观催化活力的目的；诱导培养结束后收集菌体，即得到表观催化活力提高的谷氨酸脱羧酶重组工程菌。本发明避免了常规菌体培养后再进行透性化处理所需的多步工艺步骤，为改善高谷氨酸脱羧酶重组工程菌表观催化活力提供一种简便、高效和低成本的方法。
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公开(公告)号：CN101333520B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200810061398.4
申请日：2008-04-25
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450 BM-3 D168R变体酶以及应用其制备靛玉红的方法。该酶是采用定向进化技术，以P450 BM-3(F87V/A74G/L188Q/E435T)为父本，通过在父本基因中编码第168位天冬氨酸残基的密码子处进行定点饱和突变后经筛选获得的。其碱基序列如序列表中SEQ ID NO.1所示，原位点处的密码子由GAT突变为CGG，对应的氨基酸残基由天冬氨酸突变为精氨酸。本发明的P450 BM-3 D168R变体酶在催化吲哚时，所得产物以靛玉红为主，产物呈现明显的红色特征。
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公开(公告)号：CN101333521B
公开(公告)日：2010-12-15
申请号：CN200810061399.9
申请日：2008-04-25
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3D168W变体酶以及应用其制备靛玉红的方法。该酶是采用定向进化技术，以P450BM-3(F87V/A74G/L188Q/E435T)为父本，通过在父本基因中编码第168位天冬氨酸残基的密码子处进行定点饱和突变后经筛选获得的。其碱基序列如序列表中SEQ ID NO.1所示，原位点处的密码子由GAT突变为TGG，对应的氨基酸残基由天冬氨酸突变为色氨酸。本发明的P450BM-3D168W变体酶在催化吲哚时，所得产物以靛玉红为主，产物呈现明显的红色特征。
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