一种提高免疫用口蹄疫蛋白可溶性的方法

    公开(公告)号:CN105018510B

    公开(公告)日:2019-03-15

    申请号:CN201510389502.2

    申请日:2015-07-06

    Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域,具体涉及一种提高免疫用口蹄疫蛋白可溶性的方法。该方法为,在采用基因工程进行口蹄疫蛋白表达时,通过基因工程手段,在口蹄疫蛋白的C端增加His6‑MBP标签可增加口蹄疫蛋白的可溶性;所述His6表示6个组氨酸标签,MBP表示麦芽糖酶结合蛋白。本发明还提供了利用该方法所制备的针对A型口蹄疫用免疫口蹄疫蛋白CDG276。本发明与现有的基因工程所制备的FMDV VPI蛋白相比,表达量有较为明显提高,同时由于加入了可溶性的标签麦芽糖结合蛋白(MBP),所表达的FMDVA1蛋白可溶度提升明显,因而具有较好的推广应用价值。

    酶促cGAMP生成量检测所用RNA适配体及检测方法

    公开(公告)号:CN104962561A

    公开(公告)日:2015-10-07

    申请号:CN201510357003.5

    申请日:2015-06-25

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体设计一种酶促cGAMP生成量检测所用RNA适配体及检测方法。该RNA适配体包括spinach2,VC2/g20a和tRNA三部分,碱基序列如SEQ ID NO.1 所示。相较于现有的cGAMP生成量检测方法,本发明的主要技术优点体现在:1、本发明中的RNA适配体通过体外转录获得,无需切胶纯化,较好的保证了RNA适配体的完整性;2、相较于HPLC法,检测成本低廉,操作简便,相较于TLC法,操作安全无风险,检测样品数量大,可实现大规模样品检测;3、本发明中的RNA适配体可进一步纯化或者与其他试剂完善配制成标准化检测试剂盒,便于检测使用。

    一种用于DisA表达的pEX-MBP重组质粒

    公开(公告)号:CN104293822A

    公开(公告)日:2015-01-21

    申请号:CN201410525823.6

    申请日:2014-10-09

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,涉及一种DisA表达过程中所使用的重组质粒pEX-MBP及其制备。所述pEX-MBP重组质粒的碱基序列如序列表所示。该重组质粒是在pBbB3a-GFP的基础上改造而成的。将该重组质粒用于制备可溶性的DisA蛋白时,以丙酸钠作为诱导剂。本发明所提供的pEX-MBP重组质粒,特异性的用于DisA蛋白的表达纯化,与传统的pET28α(+)载体所构建的重组质粒表达体相比,所表达的DisA蛋白可溶度较高;其次所构建的表达系统以丙酸钠作为诱导剂,成本低廉,而且对细菌没有毒性,因而适于表达DisA蛋白,且表达后的蛋白可特异性的切除相关标签蛋白,获得的DisA蛋白纯度较高。

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