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公开(公告)号：CN118516275A
公开(公告)日：2024-08-20
申请号：CN202410767701.1
申请日：2024-06-14
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N1/20 , C02F3/34 , C12R1/22 , C02F101/16 , C02F103/20
Abstract: 本申请属于农业污染物降解处理技术领域，具体涉及一株克雷伯菌N5菌株及其在氨氮降解中应用。所述克雷伯菌(Klebsiella oxytoca)N5菌株，其保藏号为CCTCC NO：M 2024658。该菌株在低氨氮浓度条件下，氨氮降解率最高可达96.40%（氨氮浓度106 mg/L条件下），表现出较好应用前景，尤其是在高浓度氨氮条件下，也表现出较好的氨氮降解效果（742 mg/L、848mg/L中氨氮降解率分别达72%、65.43%）。这一结果表明该菌株对于氨氮具有较好的耐受性和较好的利用性。这为养殖场等高浓度氨氮粪污的有效处理提供了可能，对于相关农业污废物处理具有较好的实用价值。
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公开(公告)号：CN106834324A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201710038807.8
申请日：2017-01-19
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本申请属于基因工程技术领域，具体涉及一种能促进蛋白可溶性表达及提高蛋白表达量的重组表达载体。重组表达载体pET21b‑HEMBP（Pyr）为原核表达载体，在pET21b的基础上双酶切后，重组连接有HE‑MBP（Pyr）‑TEV 序列；具体通过构建重组质粒pUC57‑HEMBP（Pyr）‑Nb、酶切、连接、转化、筛选等步骤构建获得。该重组表达载体在蛋白表达中的应用，可用于表达单克隆抗体、抗原、多聚蛋白、c‑di‑GMP和c‑GAMP合成酶等多种蛋白。本申请通过构建改造、构建新的重组表达载体，可以较好地提高蛋白表达量和提高蛋白的可溶度，在基因工程、蛋白工程中具有较好地实用价值和推广应用意义。
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公开(公告)号：CN104531699B
公开(公告)日：2017-03-15
申请号：CN201410525824.0
申请日：2014-10-09
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/67
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种增强外源基因表达的猪的UCOE调控元件片段。所述UCOE调控元件片段的碱基序列如序列表所示。该调控元件片段在外源蛋白表达的方面，通过构建重组质粒表达载体pCpG-Mini-GFP-UCOE，转染HEK293T细胞，可以增强GFP表达。本发明以人的1.5kbUCOE片段作为对照，利用酶切方法和RT-PCR方法将猪UCOE片段分割成不同长度的片段，构建不同表达载体，转染HEK293T细胞，通过实时荧光定量PCR和Western blot技术检测报告基因GFP的相对表达量筛选出最佳的能够增强外源基因表达的UCOE片段序列，即本发明所请求保护的基因序列。
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公开(公告)号：CN116790643A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310397789.8
申请日：2023-04-14
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物工程领域，尤其涉及编码突变体的核酸分子、重组蛋白及其应用。本发明提供了编码突变体的核酸分子，所述突变体包括单突变体、三突变体和/或多突变体中的一种或多种；编码所述单突变体的核酸分子经编码野生型TEV蛋白酶突变获得；编码所述三突变体的核酸分子经编码所述单突变体的核酸分子突变获得；编码所述多突变体的核酸分子经编码所述三突变体的核酸分子突变获得。本发明筛选到一条高表达TEVP的基因序列：31C‑3MP‑S219V，可极大地提高TEVP在原核细胞中的表达量，为TEV蛋白酶的高效表达和生产提供了一种经济、操作简单的方法。
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公开(公告)号：CN106834324B
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN201710038807.8
申请日：2017-01-19
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本申请属于基因工程技术领域，具体涉及一种能促进蛋白可溶性表达及提高蛋白表达量的重组表达载体。重组表达载体pET21b‑HEMBP（Pyr）为原核表达载体，在pET21b的基础上双酶切后，重组连接有HE‑MBP（Pyr）‑TEV序列；具体通过构建重组质粒pUC57‑HEMBP（Pyr）‑Nb、酶切、连接、转化、筛选等步骤构建获得。该重组表达载体在蛋白表达中的应用，可用于表达单克隆抗体、抗原、多聚蛋白、c‑di‑GMP和c‑GAMP合成酶等多种蛋白。本申请通过构建改造、构建新的重组表达载体，可以较好地提高蛋白表达量和提高蛋白的可溶度，在基因工程、蛋白工程中具有较好地实用价值和推广应用意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105018510B
公开(公告)日：2019-03-15
申请号：CN201510389502.2
申请日：2015-07-06
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域，具体涉及一种提高免疫用口蹄疫蛋白可溶性的方法。该方法为，在采用基因工程进行口蹄疫蛋白表达时，通过基因工程手段，在口蹄疫蛋白的C端增加His6‑MBP标签可增加口蹄疫蛋白的可溶性；所述His6表示6个组氨酸标签，MBP表示麦芽糖酶结合蛋白。本发明还提供了利用该方法所制备的针对A型口蹄疫用免疫口蹄疫蛋白CDG276。本发明与现有的基因工程所制备的FMDV VPI蛋白相比，表达量有较为明显提高，同时由于加入了可溶性的标签麦芽糖结合蛋白（MBP），所表达的FMDVA1蛋白可溶度提升明显，因而具有较好的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN104293822A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410525823.6
申请日：2014-10-09
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种DisA表达过程中所使用的重组质粒pEX-MBP及其制备。所述pEX-MBP重组质粒的碱基序列如序列表所示。该重组质粒是在pBbB3a-GFP的基础上改造而成的。将该重组质粒用于制备可溶性的DisA蛋白时，以丙酸钠作为诱导剂。本发明所提供的pEX-MBP重组质粒，特异性的用于DisA蛋白的表达纯化，与传统的pET28α（+）载体所构建的重组质粒表达体相比，所表达的DisA蛋白可溶度较高；其次所构建的表达系统以丙酸钠作为诱导剂，成本低廉，而且对细菌没有毒性，因而适于表达DisA蛋白，且表达后的蛋白可特异性的切除相关标签蛋白，获得的DisA蛋白纯度较高。
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公开(公告)号：CN117904058A
公开(公告)日：2024-04-19
申请号：CN202410125280.2
申请日：2024-01-30
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本申请属于致病微生物防治技术领域，具体涉及一株沙门氏菌噬菌体及其应用。所述沙门氏菌噬菌体保藏编号为CCTCC NO:M 20231665，已于2023年9月11日保藏于地址为中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心。该噬菌体可用于制备沙门菌灭菌药剂。本申请中，以致病性的沙门氏菌作为宿主菌，通过对部分生态环境中噬菌体筛选、鉴定，获得了一株具有较好广谱性、且生长适应条件较为宽泛的筛菌体。初步实验结果表明，筛选所得噬菌体表现出较好的灭菌效果。因此，基于此噬菌体，可为相关沙门菌防控药剂开发、进而为相关传染病防控奠定良好的技术基础。
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公开(公告)号：CN105018510A
公开(公告)日：2015-11-04
申请号：CN201510389502.2
申请日：2015-07-06
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域，具体涉及一种提高免疫用口蹄疫蛋白可溶性的方法。该方法为，在采用基因工程进行口蹄疫蛋白表达时，通过基因工程手段，在口蹄疫蛋白的C端增加His6-MBP标签可增加口蹄疫蛋白的可溶性；所述His6表示6个组氨酸标签，MBP表示麦芽糖酶结合蛋白。本发明还提供了利用该方法所制备的针对A型口蹄疫用免疫口蹄疫蛋白CDG276。本发明与现有的基因工程所制备的FMDV VPI蛋白相比，表达量有较为明显提高，同时由于加入了可溶性的标签麦芽糖结合蛋白（MBP），所表达的FMDVA1蛋白可溶度提升明显，因而具有较好的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN104293832A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410525855.6
申请日：2014-10-09
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种细胞永生化过程中所使用的真核重组微环表达载体Minicircle-MRPS18及其制备方法。该载体由微环质粒与猪的MRPS18基因重组构建，其碱基序列如序列表所示。该载体通过Tubofect试剂转染法转染Hela细胞可制备永生化细胞。本发明特异性的结合了Minicircle质粒载体与MRPS18基因的优点，所制备的真核重组微环表达载体，具有转基因持续表达时间长；不会引起真核细胞的应激非病毒式诱导系统，低免疫源性，安全稳定的优点；且该质粒表达载体表达GFP，便于跟踪反应；同时具备转染效率高、简单易用等优点，可以获得较好的永生化细胞制备效果。
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