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公开(公告)号：CN102220302A
公开(公告)日：2011-10-19
申请号：CN201110132525.7
申请日：2011-05-20
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明通过基因定点突变的方法获得葡萄糖耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶的基因、突变质粒、工程菌，并可在将工程菌诱导表达后，获得葡萄糖耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶。本发明以来自海洋未培养微生物来源的β-葡萄糖苷酶为基础，通过PCR定点突变，获得突变基因。相对野生型β-葡萄糖苷酶蛋白，获得的突变蛋白的葡萄糖耐受浓度提高了13倍，而其他酶学性质没有变化，在工业上具有应用价值，其可以改善木质纤维素的发酵工艺，并且可生产出高达20-30％浓度的果汁。
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公开(公告)号：CN117660281A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311648356.1
申请日：2023-11-29
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种利用枯草芽孢杆菌高效表达蔗糖酶的方法，属于基因工程和生物工程领域。本发明的枯草芽孢杆菌重组菌以pBHSS4为载体骨架，以来源于解单端孢菌素微杆菌的蔗糖酶基因为目的基因，以枯草芽孢杆菌WB600为表达宿主，成功实现了InvDz13蔗糖酶的表达，并通过筛选得到最佳信号肽SPYomL、共表达伴侣蛋白复合物GrpE‑DnaK‑DnaJ以及共表达分泌途径元件SppA，进一步提高了蔗糖酶的表达水平。利用本发明枯草芽孢杆菌重组菌可高效表达蔗糖酶，以其为生产菌株，摇瓶发酵上清中蔗糖酶的酶活最高达到61.14U/mL，加快了蔗糖酶InvDz13工业化生产及应用的进程。
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公开(公告)号：CN117568368A
公开(公告)日：2024-02-20
申请号：CN202311551771.5
申请日：2023-11-21
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种通过沉默灰盖鬼伞胞外蛋白酶高效表达漆酶Lcc5的方法，属于分子生物学和生物工程领域。本发明通过基因干扰技术，实现在丝状真菌灰盖鬼伞中干扰胞外金属蛋白酶的表达，继而提高灰盖鬼伞对漆酶Lcc5的表达。获得的金属蛋白酶干扰菌株经过摇瓶培养以及1‑L发酵罐培养过后，漆酶的表达提高70％左右。灰盖鬼伞金属蛋白酶经过干扰过后，该菌株的生物量发生明显的降低。同时，灰盖鬼伞胞外金属蛋白酶被干扰后，降低菌株生长以及孢子数量，但是，对于灰盖鬼伞表达漆酶的能力却得到提高，为丝状真菌灰盖鬼伞表达系统的发展提供了新的研究思路。
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公开(公告)号：CN117187084A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202310868057.2
申请日：2023-07-14
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种黑曲霉重组表达担子真菌漆酶的方法，属于微生物学和生物工程技术领域。本发明以黑曲霉MA70.15为实验菌株，系统探索了原生质体制备中的酶解液组成、菌丝培养方式、酶解时间、酶解温度和菌株培养时间对原生质体制备的影响，获得了一种高效制备黑曲霉原生质体的方法，使原生质体的数目提升了约5倍，数目达到2.2×106个/mL。在上述基础上，利用聚乙二醇介导法将质粒转入到黑曲霉原生质体中，转化子数目提升约4倍，实现了黑曲霉原生质体的高效遗传转化。通过启动子优化，实现了灰盖鬼伞漆酶Lcc9的有效表达，酶活约150U/L。本发明将进一步促进黑曲霉表达系统的发展。
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公开(公告)号：CN116200407A
公开(公告)日：2023-06-02
申请号：CN202310035238.7
申请日：2023-01-10
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种真菌漆酶的过表达基因、表达菌株、菌株的构建方法及漆酶的表达方法，真菌漆酶的过表达基因以egfp‑skn7过表达片段替换灰盖鬼伞菌株的lcc1编码区，获得所述真菌漆酶的过表达基因，以提高漆酶的酶活。改造后的灰盖鬼伞菌株具有真菌漆酶的过表达基因，可在与球托霉菌w5共培养0h漆酶总酶活达190U/L，是野生型菌株的30倍；共培养36h酶活达到最高点，较野生型菌株酶活48h达到最高点时间提前了12h，且最高酶活提高1.5倍；在kjakle培养基中培养，加1mMCu2+诱导，漆酶总酶活可达到8000U/L，是野生型菌株的5倍，该菌株具备高效表达漆酶的特点。
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Patent Agency Ranking
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公开(公告)号：CN114891757A
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202210661906.2
申请日：2022-06-13
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，公开了一种漆酶定向进化方法及突变漆酶基因、表达载体、重组菌株及其脱毒黄曲霉毒素应用，所述漆酶的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示，所述SEQ ID No:1中第235位氨基酸由Ser变为Pro得到突变漆酶，所述突变漆酶的氨基酸序列如SEQ ID No:3所示。本发明的有益效果在于：本发明以在Pichiapastoris中异源表达的漆酶为基础，通过定点饱和突变，并在P.pastoris中异源表达突变漆酶基因，构建了一个“小而精”的饱和突变体文库；最终通过筛选获得了一株重组毕赤酵母突变菌株，其发酵产生的酶蛋白脱毒AFB1的效率提升至1.34倍，突变体蛋白可应用于生物乙醇制备过程中干酒糟及其可溶物(DDGS)中AFB1的同步脱毒。
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公开(公告)号：CN102786411A
公开(公告)日：2012-11-21
申请号：CN201210138447.6
申请日：2012-05-07
Applicant: 安徽大学
IPC: C07C59/245 , C12N9/02 , C12R1/645
Abstract: 本发明属化合物分离纯化技术领域，涉及一种微生物来源的新型真菌漆酶高效诱导化合物的发酵制备、分离纯化工艺，及其在诱导真菌漆酶生产方面的应用。其特征在于包括下述步骤：通过真菌发酵制备含有活性化合物的发酵液，经过萃取获得的活性化合物粗提物依次经不同层析树脂吸附，以不同浓度甲醇-水作为洗脱剂纯化精制，最终获得纯化的活性化合物分子；获得的活性化合物在1~500 μM浓度下可以高效诱导漆酶生产真菌分泌胞外漆酶。本发明具有以下优点：诱导化合物来源于真菌次级代谢产物；诱导化合物工作浓度低，有效工作浓度为1~500μM；诱导化合物具有高的真菌漆酶诱导活性。
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公开(公告)号：CN119799548A
公开(公告)日：2025-04-11
申请号：CN202411788845.1
申请日：2024-12-06
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种平菇促生菌、筛选方法及其应用。该菌来自平菇基质自身的微生物库中，将该菌株、菌滤液添加到固体培养基和平菇基质中，均能够显著促进平菇菌丝的生长；该菌株产生的挥发性化合物2‑丁酮‑丙酮‑苯乙烯组合作用同样具有促进平菇菌丝生长的特点，本发明为平菇人工种植、微生态控制技术找到新途径，为提高食用菌生产经济和社会效益奠定基础。
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