-
公开(公告)号:CN109943624A
公开(公告)日:2019-06-28
申请号:CN201910194830.5
申请日:2019-03-14
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/6895 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种基于RPA-侧流层析技术检测大豆疫霉的方法及其专用引物及探针组合,该方法包括1)提取待测样本DNA;2)以DNA为模板,进行RPA扩增;3)应用侧流层析试纸条进行扩增产物检测;当试纸条出现两条棕色条带,一条位于质控区内,一条位于检测区,则结果为阳性,表明样本中含有大豆疫霉;当试纸条只有质控区出现一条棕色条带,检测区没有条带,则结果是阴性,表明样本中不含有大豆疫霉。本发明所使用的引物探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在检测区的有阳性反应,增加了检测的灵敏性,为检疫性疫霉菌的检测提供了新的技术平台,同时在病害侵染初期鉴定出病原物,能够对出入境大豆中的大豆疫霉进行检测。
-
公开(公告)号:CN108588265A
公开(公告)日:2018-09-28
申请号:CN201810599786.1
申请日:2018-06-11
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645
CPC classification number: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明公开了一种丁香疫霉菌的LAMP检测引物组合物及其LAMP检测试剂盒和LAMP检测方法。该环介导等温扩增检测引物组合物由正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3组成。本发明的检测方法准确性高、特异性强、操作方便、实用性好、实现了恒温扩增,同时还为检疫性疫霉菌的检测提供了新的技术平台,可用于丁香疫霉的高灵敏度快速检测,同时在病害侵染初期鉴定出病原物,能够对出入境水果样品中的丁香疫霉进行检测。本发明对丁香疫霉引起的疫病和对减少农药盲目使用,降低生产成本,减少农药的环境污染也具有重要意义。
-
公开(公告)号:CN104313176B
公开(公告)日:2017-02-01
申请号:CN201410643035.7
申请日:2014-11-13
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种棕榈疫霉菌的LAMP检测引物组合物及其LAMP检测试剂盒和LAMP检测方法。该LAMP检测引物组合物由正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3、正向环引物LF和反向环引物LB组成;各引物序列具体如下:FIP:5′-CTCACTTCAACAGCCCCGCC-GAAGTGTGCTGCGTCGTG-3′;BIP:5′-TC GG CTA AA GTG AC GG CTT TG A-CAACCTGCAACCACCGAA-3′;F3:5′-GCGGAAGGGACTACACCT-3′;B3:5′-AACAACAACACCGAGGCC-3′;LF:5′- ACAGAGCAAGAAGCGAATTAGAG-3′;LB:5′-GCTGCGAGTGGTTTGTGACT-3′。
-
公开(公告)号:CN104372104B
公开(公告)日:2016-03-02
申请号:CN201410742299.8
申请日:2014-12-08
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种樟疫霉菌的LAMP检测引物组合物及其LAMP检测试剂盒和LAMP检测方法。该LAMP检测引物组合物由正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3、正向环引物LF和反向环引物LB组成。本发明的检测方法准确性高、特异性强、操作方便、实用性好、实现了恒温扩增,同时还为樟疫霉菌的检测提供了新的技术平台,可用于樟疫霉菌的高灵敏度快速检测,同时在病害侵染初期鉴定出病原物,能够对田间土壤中的樟疫霉菌进行检测。本发明对樟疫霉菌引起的疫病防治和对减少农药盲目使用,降低生产成本,减少农药的环境污染也具有重要意义。
-
公开(公告)号:CN118028521A
公开(公告)日:2024-05-14
申请号:CN202410265784.4
申请日:2024-03-08
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/77
Abstract: 本发明公开了一种松树脂溃疡病原菌(Fusarium circinatum)的特异性检测靶标Fcir_CM004511.1.g143.t1,同时,本发明还基于该靶标建立了CRISPR‑Cas12a体系可视化检测方法。该方法通过重组酶聚合酶扩增后的目的DNA片段,再在crRNA序列介导下,引导CRISPR‑Cas12a体系对扩增产物进行识别结合并切割目标双链DNA激活非特异性核酸酶功能,然后任意切割体系中的单链DNA荧光探针得到裂解产物,最后通过裂解产物的显色检测进行判断,实现CRISPR‑Cas12a的特异性荧光检测。该检测靶标特异性强,检测方法可视化强,在灵敏度上可低至1pg·μL‑1,对于港口的进境植物上携带的松树脂溃疡病病原菌(F.circinatum)实现即检即防,具有很高的应用价值。
-
公开(公告)号:CN114989272B
公开(公告)日:2023-07-04
申请号:CN202210459287.9
申请日:2022-04-27
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于樟疫霉的SCR效应子蛋白SCR97226及其编码基因和应用。该蛋白是具有下述氨基酸残基序列之一的蛋白质:序列表中的SEQ ID No.1的氨基酸残基序列。实验证明,该基因控制表达的蛋白质能够参与疫霉侵染本氏烟草的过程,引起凋亡前体蛋白Bax诱导的植物植物细胞死亡。本发明对于充实植物病原卵菌与寄主互作的分子机制资料信息,以及建立植物病原卵菌病害的综合防治技术策略都有重要意义。
-
公开(公告)号:CN116254260A
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202310252805.4
申请日:2023-03-16
IPC: C12N15/11 , C12Q1/6895 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种栗疫霉黑水病菌(Phytophthora cambivora)的特异性检测新靶标g7300,该检测靶标g7300的DNA序列如SEQ ID NO:1所示,CDS序列如SEQ ID NO:1所示,蛋白序列如SEQ ID NO:2所示。同时,还公开了特异性检测靶标g7300的引物组合,其正向引物序列如SEQ IDNO:3所示,反向引物序列如SEQ ID NO:4所示。本发明是基于全基因组筛选发掘的新靶标和基于该靶标建立的检测方法,用于常规PCR,其特异性强,灵敏度高,证明g7300适合栗疫霉黑水病菌(P.cambivora)的检测靶标。对于港口的进境植物上携带的P.cambivora实现即检即防,对保护我国生态安全具有重要作用。
-
公开(公告)号:CN115746113A
公开(公告)日:2023-03-07
申请号:CN202210818238.X
申请日:2022-07-13
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于樟疫霉的效应子蛋白SCR85664及其编码基因和应用。效应子蛋白SCR85664的氨基酸序列为SEQIDNo.1,编码改氨基酸的核苷酸序列为SEQIDNo.2,实验证明,该基因控制表达的蛋白质能够参与疫霉侵染本氏烟草的过程,抑制凋亡前体蛋白Bax诱导的植物植物细胞死亡。本发明有助于充实植物病原卵菌与寄主互作的分子机制,同时也有助于建立植物樟疫霉的综合防治技术策略。
-
公开(公告)号:CN110079631B
公开(公告)日:2022-11-15
申请号:CN201910391877.0
申请日:2019-05-10
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种高通量检测8种疫霉菌的分子检测方法。在本发明中,将LAMP技术与96孔板结合建立了一种能够同时检测8种疫霉菌的高通量检测技术。针对8种疫霉菌(寄生疫霉Phytophthora parasitica、Phytophthora tentaculata、致病疫霉Phytophthora infestans、草莓疫霉Phytophthora fragariae、辣椒疫霉Phytophthora capsici、掘氏疫霉Phytophthora drechsleri、恶疫霉Phytophthora cactorum、大雄疫霉Phytophthora megasperma)的同一个靶标基因Ypt1建立了Ypt1‑LAMP检测引物、试剂盒和方法。本发明的检测方法准确性高、特异性强、操作方便、实用性好,为疫霉菌的检测提供了高通量快速检测技术,对疫霉菌疫病防治和监测具有重要和深远意义。
-
公开(公告)号:CN110093446B
公开(公告)日:2022-09-30
申请号:CN201910467152.5
申请日:2019-05-31
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/6804 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种RPA‑LFD技术检测樟疫霉的引物和探针组合及其应用方法。采用所述引物及探针组合检测樟疫霉的具体方法为:1)提取待测样本DNA;2)以DNA为模板,进行RPA扩增;3)应用LFD进行扩增产物检测;当试纸条出现两条棕色条带,一条位于质控区内,一条位于检测区,则结果为阳性,表明样本中含有樟疫霉;当试纸条只有质控区出现一条棕色条带,检测区没有条带,则结果是阴性,表明样本中不含有樟疫霉。本发明所提供的引物及探针组合RPA扩增效果好,条带特异性强、灵敏度高,为樟疫霉的检测提供了新的技术手段。
-
-
-
-
-
-
-
-
-