公开(公告)号：CN105039560A

公开(公告)日：2015-11-11

申请号：CN201510489852.6

申请日：2015-08-11

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 习平根 ,  李亭潞 ,  姜子德 ,  何宁 ,  沈万宽 ,  李敏慧

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

CPC classification number: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q2531/119

Abstract: 本发明属于农作物病害防治及植物检疫领域，公开了一种荔枝炭疽菌LAMP引物及其快速检测方法和在荔枝炭疽菌的早期诊断、病菌的监测和鉴定中的应用。该引物包括内引物对F3和B3，以及外引物对FIP和BIP，序列见SEQNO.1～SEQNO.4。利用该引物进行检测，经过扩增和加入SYBR Green Ⅰ显色剂显色或琼脂糖凝胶电泳检测，可观察到绿色荧光或出现LAMP特征性的梯形带。本发明检测方法结果可靠、易于操作、特异性强、灵敏度高，适用于发病组织及带菌植株中荔枝炭疽菌的高灵敏度快速检测和鉴定，及早期诊断、病菌的监测和鉴定中，对于农业生产中荔枝炭疽菌病害的早期监测，确定病害防治最佳时期具有十分重要的意义。

公开(公告)号：CN104031997B

公开(公告)日：2015-10-28

申请号：CN201410244204.X

申请日：2014-06-04

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈万宽 ,  徐刚红 ,  罗明珠

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种快速检测甘蔗黑穗病菌的LAMP引物组、试剂盒及其检测方法。本发明针对甘蔗黑穗病菌核糖体基因转录间隔区ITS序列设计得到一组引物组F3/B3和FIP/BIP，由该引物组或含有该引物组的试剂盒通过环介导等温扩增（LAMP）检测甘蔗黑穗病菌，具有成本低、易操作、简单、快速、检测结果直观、肉眼可判断、灵敏度高、特异性强等优点，本发明适用于基层部门甘蔗引种检疫、脱毒种苗质量检测及甘蔗黑穗病田间早期检测等，具有广泛和实际的应用价值。

公开(公告)号：CN104031997A

公开(公告)日：2014-09-10

申请号：CN201410244204.X

申请日：2014-06-04

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈万宽 ,  徐刚红 ,  罗明珠

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

CPC classification number: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q2531/119

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种快速检测甘蔗黑穗病菌的LAMP引物组、试剂盒及其检测方法。本发明针对甘蔗黑穗病菌核糖体基因转录间隔区ITS序列设计得到一组引物组F3/B3和FIP/BIP，由该引物组或含有该引物组的试剂盒通过环介导等温扩增（LAMP）检测甘蔗黑穗病菌，具有成本低、易操作、简单、快速、检测结果直观、肉眼可判断、灵敏度高、特异性强等优点，本发明适用于基层部门甘蔗引种检疫、脱毒种苗质量检测及甘蔗黑穗病田间早期检测等，具有广泛和实际的应用价值。

公开(公告)号：CN102329858B

公开(公告)日：2013-02-13

申请号：CN201110218585.0

申请日：2011-08-02

Applicant: 广州甘蔗糖业研究所 ,  华南农业大学

Inventor： 沈万宽 ,  姜子德 ,  邓海华 ,  习平根 ,  刘睿 ,  李敏慧 ,  陈健文 ,  杨湛端 ,  陈仲华

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明涉及甘蔗病原菌检测领域，提出甘蔗黑穗病菌巢式PCR快速检测方法，包括基因组DNA提取、第一轮PCR扩增、第二轮PCR扩增、PCR扩增产物检测步骤，其中第一轮PCR扩增中采用真菌核糖体基因转录间隔区ITS的通用引物ITS4和ITS5，第二轮PCR扩增中采用甘蔗黑粉菌核糖体基因转录间隔区ITS的特异引物Smut-L1和Smut-R2，本发明的实质性特点有：1、检测灵敏度极高，即使在甘蔗无黑穗病症状或者感染黑粉菌量极少时也能准确检测出黑穗病菌。2、特异性强，受其他菌类干扰小，准确率高。3、具有耗时短、检测速度快的特点，适用于甘蔗引种检疫、脱毒种苗质量检测及甘蔗黑穗病抗性鉴定早期无症状叶片检测等。

公开(公告)号：CN102204465A

公开(公告)日：2011-10-05

申请号：CN201110099531.7

申请日：2011-04-20

Applicant: 广州甘蔗糖业研究所 ,  华南农业大学

Inventor： 沈万宽 ,  姜子德 ,  陈健文 ,  习平根 ,  邓海华 ,  刘睿

IPC: A01G1/00 ,  A01G7/06

Abstract: 本发明涉及植物抗病性鉴定技术领域，提出一种甘蔗黑穗病抗性鉴定方法，首先用微量新鲜甘蔗黑粉菌冬孢子分离培养出甘蔗黑粉菌异型交配型（+、-）单倍体担孢子，然后经过菌株扩大培养、接种、发病率调查、抗性评价等步骤，本发明具有以下突出的实质性特点和显著的进步：1、只需极少量甘蔗黑粉菌冬孢子经分离培养，即可满足接种需要，工作量小；2、异型交配型菌株能够超低温保存，经活化、扩大培养后可作接种源，无需每次鉴定都重新采取菌种并分离培养；3、本发明抗性鉴定历期短、灵敏性高；4、还可利用本发明的方法，鉴别出参试品种所抗感的黑穗病生理小种类型，有效指导甘蔗抗黑穗病育种及蔗区品种合理配置。