一种高效快速合成赤藓糖醇的酵母菌及其构建方法

    公开(公告)号:CN117925432A

    公开(公告)日:2024-04-26

    申请号:CN202410087435.8

    申请日:2024-01-22

    Inventor: 程海荣 徐硕

    Abstract: 本发明公开了一种高效快速合成赤藓糖醇的酵母菌及其构建方法,采用解脂耶氏酵母Yarrowia lipolytica为合成底盘,通过代谢工程改良手段,对该酵母进行遗传改良,增强其合成赤藓糖醇的产量、转化率,尤其是生产效率;将改造后的酵母菌用于合成赤藓糖醇的方法为:以发酵初始浓度为50~350克/升的葡萄糖作为碳源,以发酵初始浓度为5~30克/升的氮源以及无机盐类为原料,灭菌处理培养基,冷却后接入所述解脂耶氏酵母菌,在有氧条件下进行连续发酵或分批补料发酵;发酵结束后,从发酵液中提纯赤藓糖醇。该菌株能以葡萄糖为原料高效快速合成赤藓糖醇。在连续补料的条件下赤藓糖醇产量超过350g/L,生产效率超过4.5克/升·小时,比对比菌株提高接近100%。

    合成木糖醇的重组解脂耶氏酵母的构建方法及其菌株

    公开(公告)号:CN110878261B

    公开(公告)日:2022-05-06

    申请号:CN201911111632.4

    申请日:2019-11-14

    Inventor: 程海荣

    Abstract: 本发明公开了一种合成木糖醇的重组解脂耶氏酵母的构建方法及其菌株;采用解脂耶氏酵母为合成底盘,通过代谢工程改良手段,对该酵母进行基因剪接,引入由葡萄糖、果糖、甘油、淀粉为碳源合成木糖醇的基因,阻断合成副产物的代谢途径,从而使得重组的解脂耶氏酵母能由葡萄糖、果糖、甘油、淀粉为碳源,发酵合成木糖醇,得到由葡萄糖等碳源合成木糖醇的工程菌株。发酵后,通过菌液分离,澄清的发酵液进行离子交换、脱色、浓缩、结晶等工艺得到木糖醇结晶。本发明描述的由葡萄糖等碳源合成木糖醇的工程酵母菌的构建方法以及采用该方法获得的由葡萄糖等碳源合成木糖醇的解脂耶氏酵母菌株,能够简化现有的化学合成木糖醇的方法,具有较好的应用价值。

    合成低聚果糖的专用菌株及其用于合成低聚果糖的方法

    公开(公告)号:CN113234609A

    公开(公告)日:2021-08-10

    申请号:CN202110661105.1

    申请日:2015-09-18

    Abstract: 本发明公开了一株合成低聚果糖的专用菌株及其用于合成低聚果糖的方法。所述专用菌株为解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11368。将该菌株培养于含碳源、氮源、无机盐以及水的培养基中,进行培养,培养结束后菌液分离得到解脂亚罗酵母细胞,再加入蔗糖水溶液进行转化合成低聚果糖;转化结束后进行纯化精制,得到液体或粉状低聚果糖。本发明的有益效果为:第一,由于该酵母能合成果糖基转移酶且能循环使用,因此无需购买果糖基转移酶,降低了生产成本。第二,由于该酵母同时还能合成赤藓糖醇,因此可以利用合成赤藓糖醇后得到的废酵母细胞转化蔗糖合成低聚果糖,节省了培养细胞的成本。

    合成木糖醇的重组解脂耶氏酵母的构建方法及其菌株

    公开(公告)号:CN110878261A

    公开(公告)日:2020-03-13

    申请号:CN201911111632.4

    申请日:2019-11-14

    Inventor: 程海荣

    Abstract: 本发明公开了一种合成木糖醇的重组解脂耶氏酵母的构建方法及其菌株;采用解脂耶氏酵母为合成底盘,通过代谢工程改良手段,对该酵母进行基因剪接,引入由葡萄糖、果糖、甘油、淀粉为碳源合成木糖醇的基因,阻断合成副产物的代谢途径,从而使得重组的解脂耶氏酵母能由葡萄糖、果糖、甘油、淀粉为碳源,发酵合成木糖醇,得到由葡萄糖等碳源合成木糖醇的工程菌株。发酵后,通过菌液分离,澄清的发酵液进行离子交换、脱色、浓缩、结晶等工艺得到木糖醇结晶。本发明描述的由葡萄糖等碳源合成木糖醇的工程酵母菌的构建方法以及采用该方法获得的由葡萄糖等碳源合成木糖醇的解脂耶氏酵母菌株,能够简化现有的化学合成木糖醇的方法,具有较好的应用价值。

    合成海藻糖的专用菌株及其用于合成海藻糖的方法

    公开(公告)号:CN105219663A

    公开(公告)日:2016-01-06

    申请号:CN201510599925.7

    申请日:2015-09-18

    Abstract: 本发明公开了一株合成海藻糖的专用菌株及其用于合成海藻糖的方法。该菌株为解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11367。将菌株培养于含碳源、氮源、无机盐以及水的培养基中,进行发酵,结束后进行菌液分离,从发酵液中纯化海藻糖;分离得到的酵母细胞,还可加入到低聚麦芽糖或麦芽糖水溶液转化合成海藻糖。该方法的有益效果是:第一,该酵母能自我高效合成海藻糖所需要的酶,且能循环使用,降低了生产成本。第二,该酵母还能合成赤藓糖醇,可以利用合成赤藓糖醇后得到的废酵母细胞转化低聚麦芽糖合成海藻糖,节省了培养细胞的成本。第三,酵母细胞更容易高密度发酵与高浓度底物转化,合成更多的海藻糖。

    基于革兰氏阳性安全微生物的透明质酸的异源合成方法

    公开(公告)号:CN101935679A

    公开(公告)日:2011-01-05

    申请号:CN201010117889.3

    申请日:2010-03-04

    Inventor: 程海荣 邓子新

    Abstract: 一种基因工程技术领域的基于革兰氏阳性安全微生物的透明质酸的异源合成方法,通过从革兰氏阳性安全微生物宿主中克隆与透明质酸前体合成相关的基因(序列表中的SEQ ID No.31到SEQ ID No.43);按照革兰氏阳性安全微生物宿主的基因密码子偏好性重新设计并合成透明质酸合成酶基因(序列表中的SEQ ID No.1到SEQ ID No.27),并将与透明质酸前体合成相关的基因与优化的透明质酸合成酶基因组成基因表达盒,最后将基因表达盒转化革兰氏阳性微生物宿主菌,得到能分泌透明质酸的革兰氏阳性基因工程安全宿主菌,经发酵培养得到基于革兰氏阳性安全微生物的透明质酸。本发明大大提高了宿主细胞合成透明质酸的能力。

    发酵产泡沫能力降低的解脂耶氏酵母菌的构建方法和应用

    公开(公告)号:CN113801896A

    公开(公告)日:2021-12-17

    申请号:CN202111182315.9

    申请日:2021-10-11

    Inventor: 程海荣 黄艺园

    Abstract: 本发明公开了一种发酵产泡沫能力降低的解脂耶氏酵母菌的构建方法及用于合成赤藓糖醇的方法;所述构建是采用合成赤藓糖醇的解脂耶氏酵母为底盘微生物,通过代谢工程改良手段,对该酵母基因组进行突变,获得突变菌株。所获得的突变菌株显著降低其发酵过程中产泡沫的能力。发酵过程中消泡剂的用量比对照菌株显著减少,甚至不再添加消泡剂。以发酵初始浓度为50~350克/升的葡萄糖等作为碳源,以发酵初始浓度为5~30克/升的氮源以及无机盐类为原料,灭菌,冷却后接入获得的解脂耶氏酵母突变菌株,在有氧的条件下进行发酵。发酵结束后,从发酵液中提纯赤藓糖醇。

    制备L-塔格糖的方法
    29.
    发明授权

    公开(公告)号:CN101691597B

    公开(公告)日:2012-09-05

    申请号:CN200910307138.5

    申请日:2009-09-17

    Inventor: 程海荣 邓子新

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域的制备L-塔格糖的方法。制备L-塔格糖的方法,包括如下步骤:制备培养基;培养产酸细菌,得一级种子液;得二级种子液;将二级种子液接种到发酵培养基中,得到发酵液;得到酵母一级种子液和二级酵母种子液,离心,得酵母细胞;将酵母细胞培养,得澄清的发酵液;浓缩,脱色,过滤,得溶液;将溶液过离子交换树脂,结晶,洗涤,干燥,得L-塔格糖;利用静息细胞转化D-卫矛醇制备L-塔格糖的方法,包括如下步骤:制备培养基,培养细菌;悬浮菌体细胞,得溶液;接种假丝酵母(Candida ssp.)CGMCCNO:3268,得发酵液;将发酵液经过脱色和脱盐处理,得到水溶液,浓缩,结晶,洗涤,干燥,得L-塔格糖。本发明的方法可用来制备医药级L-塔格糖。

    一种从液体木糖醇里制备L-阿拉伯糖醇的方法

    公开(公告)号:CN101560526B

    公开(公告)日:2012-01-04

    申请号:CN200910052132.8

    申请日:2009-05-27

    Inventor: 邓子新 程海荣

    Abstract: 一种生物技术领域的从液体木糖醇里制备L-阿拉伯糖醇的方法,包括如下步骤:取原料,加入氮源和无机盐,得到发酵培养基,灭菌,得到无菌发酵培养基;将芽孢杆菌CGMCC No.3041接种到含一级种子培养基中,培养,形成一级种子液;将一级种子液加入到含二级种子培养基中,培养,形成二级种子液;将二级种子液加入到含无菌发酵培养基的发酵罐中,发酵,当L-阿拉伯糖醇的相对纯度>65%时停止发酵;发酵结束后去除芽孢杆菌,取发酵上清液,脱色,利用离子交换树脂进行脱盐、浓缩,得到发酵液;结晶,离心,洗涤干燥,得到L-阿拉伯糖醇晶体。本发明的方法无污染,生产成本极低,适合工业规模化从液体木糖醇或者含有L-阿拉伯糖醇的原料中分离提取L-阿拉伯糖醇。

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