对藻类进行定性与定量分析的方法

    公开(公告)号:CN100352937C

    公开(公告)日:2007-12-05

    申请号:CN200410053531.3

    申请日:2004-08-06

    Abstract: 本发明公开了一种采用针对rRNA的S1酶保护分析探针和夹心杂交技术,从而快速鉴定藻的种类和数量的方法,该方法包括以下步骤:(a)将待检测样品和S1酶保护分析探针混合并杂交;(b)用S1酶酶切处理步骤(a)的混合溶液;(c)变性处理,从而释放出S1酶保护分析探针;(d)用固定于固相载体上的抓捕探针,捕获保留下来的S1酶保护分析探针;(e)用连接探针与S1酶保护分析探针杂交,然后与带可检测信号的信号探针杂交;(f)检测可检测信号,从而确定样品中藻类的种类和/或数量。本发明方法还快速、简便、可靠的鉴定微藻种类和数量。

    卵黄免疫球蛋白的仿生亲和纯化方法

    公开(公告)号:CN1325516C

    公开(公告)日:2007-07-11

    申请号:CN200510030657.3

    申请日:2005-10-20

    Inventor: 李荣秀 刘浩然

    Abstract: 一种卵黄免疫球蛋白的仿生亲和纯化方法,属于生物技术领域。本发明包括以下步骤:(1)基础层析介质与三氯三氮嗪反应活化后,分别与对氨基苯甲酸、以及酪氨酸和精氨酸反应,合成仿生亲和分离材料;(2)用上述合成的亲和层析介质制备成亲和层析柱,将含卵黄免疫球蛋白的样品流过该亲和层析柱,卵黄免疫球蛋白吸附在亲和层析柱上,冲洗亲和层析柱,不吸附在亲和层析柱上的杂蛋白被除去,然后变换缓冲液条件,再冲洗亲和层析柱,将结合的卵黄免疫球蛋白洗脱下来,得到纯化的卵黄免疫球蛋白。本发明能够高效率、低成本的大规模生产高纯度的卵黄免疫球蛋白。鸡卵黄免疫IgY的一步纯化的回收率>50%,纯度>99.5%。鸭IgY和IgY(ΔFc)的一步纯化的回收率>55%,纯度>75%。

    脂肪酶的仿生亲和纯化方法

    公开(公告)号:CN1970745A

    公开(公告)日:2007-05-30

    申请号:CN200610119253.6

    申请日:2006-12-07

    Abstract: 本发明涉及一种脂肪酶的仿生亲和纯化方法,属于工业生物技术领域的。本发明包括下列步骤:(1)制备仿生亲和分离材料:首先用带氨基的基础层析介质与三氯三氮嗪进行反应,然后在50℃与烯丙胺反应,最后在95℃与环己胺反应,合成仿生亲和分离材料;(2)用仿生亲和分离材料纯化脂肪酶粗品:用上述制备的仿生亲和分离材料装入层析柱,得到亲和层析柱,随后将含脂肪酶的样品上至该亲和层析柱中,脂肪酶被柱中仿生亲和分离材料专一地吸附留在层析柱中,其它不能被吸附的蛋白随缓冲液流出,最后用洗脱缓冲液将脂肪酶从柱中专一洗脱下来,得到纯脂肪酶。本发明能够高效率、低成本的大规模生产高纯度的脂肪酶。

    尖刺拟菱形藻的检测探针
    24.
    发明授权

    公开(公告)号:CN1292079C

    公开(公告)日:2006-12-27

    申请号:CN200410093091.4

    申请日:2004-12-16

    Abstract: 一种尖刺拟菱形藻的检测探针,属于核酸检测领域。用于对该藻进行S1酶保护分析和夹心杂交检测,具体包括三条相互关联的寡核苷酸探针:S1酶保护分析探针,在进行生物信息学比对分析时,仅与尖刺拟菱形藻核糖体小亚基360~430区域核苷酸互补,而与其它藻核糖体RNA无同源性,长度为59bp,在一定的条件下可特异性结合于尖刺拟菱形藻的rRNA上,序列为:5’-CCACAAGTGGCCAGGGAAATATGAACAAACAAACACTGGTTTCCTTCGCTTCCGTTTCA。本发明探针适用性好,大大方便了特异探针的寻找和实现。本发明的稳定性远远高于夹心杂交技术。

    纤溶酶原激活剂的仿生亲和纯化方法

    公开(公告)号:CN1786161A

    公开(公告)日:2006-06-14

    申请号:CN200510030656.9

    申请日:2005-10-20

    Abstract: 一种纤溶酶原激活剂的仿生亲和纯化方法,属于生物技术领域。本发明包括以下步骤:(1)基础层析介质与三氯三氮嗪反应活化后,与对氨基苯甲脒反应,合成仿生亲和分离材料;(2)用上述合成的亲和分离材料制备成亲和层析柱,将含天然或改构的人组织型纤溶酶原激活剂的样品流过该亲和层析柱,天然或改构的人组织型纤溶酶原激活剂吸附在亲和层析柱上,冲洗亲和层析柱,然后变换缓冲液条件,再冲洗亲和层析柱,将结合的天然或改构人组织型纤溶酶原激活剂洗脱下来,得到纯化的天然或改构的人组织型纤溶酶原激活剂。本发明纯化步骤少,成本低,效率高,快速、简便、低成本、大批量纯化天然或改构人组织型纤溶酶原激活剂和尿型纤溶酶原激活剂。

    卵黄免疫球蛋白的仿生亲和纯化方法

    公开(公告)号:CN1752105A

    公开(公告)日:2006-03-29

    申请号:CN200510030657.3

    申请日:2005-10-20

    Inventor: 李荣秀 刘浩然

    Abstract: 一种卵黄免疫球蛋白的仿生亲和纯化方法,属于生物技术领域。本发明包括以下步骤:(1)基础层析介质与三氯三氮嗪反应活化后,分别与对氨基苯甲酸、以及酪氨酸和精氨酸反应,合成仿生亲和分离材料;(2)用上述合成的亲和层析介质制备成亲和层析柱,将含卵黄免疫球蛋白的样品流过该亲和层析柱,卵黄免疫球蛋白吸附在亲和层析柱上,冲洗亲和层析柱,不吸附在亲和层析柱上的杂蛋白被除去,然后变换缓冲液条件,再冲洗亲和层析柱,将结合的卵黄免疫球蛋白洗脱下来,得到纯化的卵黄免疫球蛋白。本发明能够高效率、低成本的大规模生产高纯度的卵黄免疫球蛋白。鸡卵黄免疫IgY的一步纯化的回收率>50%,纯度>99.5%。鸭IgY和IgY(ΔFc)的一步纯化的回收率>55%,纯度>75%。

    海洋原甲藻的检测探针
    27.
    发明公开

    公开(公告)号:CN1635153A

    公开(公告)日:2005-07-06

    申请号:CN200410067806.9

    申请日:2004-11-04

    Abstract: 一种海洋原甲藻的检测探针,属于核酸检测领域。用于对该藻进行S1酶保护分析和夹心杂交检测,具体包括三条相互关联的寡核苷酸探针:S1酶保护分析探针,在进行生物信息学比对分析时,仅与海洋原甲藻核糖体大亚基430~520区域核苷酸互补,而与其它藻核糖体RNA无同源性,长度为58bp,在一定的条件下可特异性结合于海洋原甲藻的rRNA上,序列为:5’-ACCAGGCACATTCACCCACCCAGGGGTAGGCTACCATGTCCCTGGAGTTTTCCTCGAT。本发明探针适用性好,大大方便了特异探针的寻找和实现。本发明的稳定性远远高于夹心杂交技术。

    基于FIX的抗原表位及其应用

    公开(公告)号:CN105294857A

    公开(公告)日:2016-02-03

    申请号:CN201410273142.5

    申请日:2014-06-18

    Inventor: 李荣秀 杜进

    Abstract: 本发明公开了基于FIX的抗原表位及其应用。具体地,本发明提供了一种抗原表位肽,所述抗原表位肽源自动物FIX且包含一个或多个抗原表位,并且所述抗原表位肽氨基酸序列长度为FIX全长的2-100%,且所述抗原表位肽的长度为5-500个氨基酸;并且所述抗原表位肽与载体蛋白形成的重组蛋白可诱发同一种类的所述动物产生针对FIX的免疫反应。该抗原表位肽与载体蛋白融合后能激发起较强的体液免疫反应,产生特异性针对FIX的抗体。本发明还公开了一种特异性识别并结合人FIX的抗体及FIX抗体的制备方法,该抗体可用于人FIX的分离纯化、检测以及治疗与所述抗原表位相关的疾病。

    提高膜蛋白检测率的膜蛋白多肽的制备方法

    公开(公告)号:CN102221586B

    公开(公告)日:2012-11-28

    申请号:CN201110073681.0

    申请日:2011-03-25

    Abstract: 一种生物检测技术领域的提高膜蛋白检测率的膜蛋白多肽的制备方法。包括如下步骤:交联固化细胞质蛋白:首先用戊二醛溶液处理完整细胞,使细胞质蛋白相互交联形成致密固体,离心收集戊二醛交联固化细胞;用蛋白酶解反应溶液悬浮戊二醛交联固化细胞,加入蛋白酶进行酶解反应;收集酶解多肽,进行除盐和富集,制备脱盐酶解多肽;用酶解多肽直接做LC-MS/MS检测,分析所得质谱数据,获得所需要的膜蛋白信息。本发明能够快速获得更多、更可靠的膜蛋白信息,有效减少LC-MS/MS检测中胞质蛋白的信号干扰。

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