公开(公告)号：CN109734745B

公开(公告)日：2021-05-04

申请号：CN201811647747.0

申请日：2018-12-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  陈子键 ,  孙远明 ,  傅慧君 ,  肖治理 ,  沈玉栋 ,  杨金易 ,  王弘 ,  雷红涛

IPC: C07F9/24 ,  C07F9/20 ,  C07K14/79 ,  C07K14/765 ,  C07K14/795 ,  C07K14/77 ,  C07K1/107 ,  C07K16/44 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种直接识别杀螟硫磷抗体的制备方法和应用。本发明的杀螟硫磷的半抗原，其结构式如式（II）或（I）所示：；。进而通过将半抗原偶联到载体蛋白上，成功制备得到两种的人工抗原。利用其中一种人工抗原免疫动物，制备能分泌抗杀螟硫磷抗体的杂交瘤细胞；利用其中一种人工抗原作为包被原，进一步建立一种基于间接竞争酶联免疫法的杀螟硫磷的检测方法。本检测方法检测杀螟硫磷农药残留具有简便快速、特异性强、灵敏度较高的特点，检测的IC50值为7.13 ng/mL，检测限为（IC10）1.7 ng/mL，线性检测范围为2.9～17.9 ng/mL。

公开(公告)号：CN108558718B

公开(公告)日：2021-04-23

申请号：CN201711489726.6

申请日：2017-12-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  李然 ,  王弘 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  韦晓群 ,  孙远明

IPC: C07C317/40 ,  C07K14/795 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  G01N33/531 ,  G01N33/94

Abstract: 本发明公开了氟苯尼考及氟苯尼考胺抗原、抗体及其同时检测酶联免疫分析方法。本发明利用氟苯尼考作为半抗原与载体蛋白偶联获得人工抗原，作为包被原；同时在氟苯尼考分子苄羟基上衍生丁二酸半酯偶联手臂得到氟苯尼考半抗原，与载体蛋白偶联得到氟苯尼考人工抗原，作为免疫原；制备了检测抗体，并建立了酶联免疫检测方法，对于氟苯尼考的IC50=37.10 ng/mL，线性检测范围为12.03～114.49 ng/mL，对于氟苯尼考胺IC50=45.3 ng/mL，线性检测范围为10.76～190.69 ng/mL，具有灵敏度高，特异性好等显著优势，可用于快速检测食品中残留的氟苯尼考及氟苯尼考胺，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN110407943B

公开(公告)日：2021-03-30

申请号：CN201910341232.6

申请日：2019-04-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  张瑾如 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  孙远明 ,  沈玉栋 ,  肖治理

IPC: C07K16/44 ,  C12N15/13 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  G01N33/53 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种克百威农药的纳米抗体及其制备方法和应用，该纳米抗体，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；编码其的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明得到一种针对克百威农药的纳米抗体，该纳米抗体能够检测克百威农药，且检测结果准确、效果好、稳定性好，在高温和有机溶剂的条件下还有很好的检测效果。该抗体不仅可以广泛的应用于农产品中克百威农药残留的检测；还可以作为前体，通过随机或定点突变技术进行改造，能够获得性质(亲和性、特异性、稳定性等)更好的突变体，用来发展进一步用于食品、医药、农业等领域，有很大的应用推广价值。

公开(公告)号：CN112250604A

公开(公告)日：2021-01-22

申请号：CN202011021786.7

申请日：2020-09-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 雷红涛 ,  谢海欢 ,  李向梅 ,  沈兴 ,  李兆栋 ,  徐振林 ,  沈玉栋 ,  孙远明 ,  肖治理

IPC: C07C311/59 ,  C07C311/58 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K16/44 ,  C12N5/10 ,  G01N33/53 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了用于广谱检测磺酰脲类药物的半抗原、人工抗原及其抗体和应用。本发明设计得到了一种用于检测磺酰脲类药物的半抗原，包括半抗原1和半抗原2，所述半抗原1的结构式如式(I)所示： 所述半抗原2的结构式如式(II)所示：本发明在设计出的2个半抗原的基础上，利用碳二亚胺法将2种半抗原与载体蛋白偶联制备人工抗原，然后用2种人工抗原免疫新西兰兔得到2种针对7种磺酰脲类药物特异性完全互补的多克隆抗体，并根据这两种抗体的特性成功建立了一种用于广谱检测磺酰脲类药物的胶体金免疫层析试纸条快速检测方法，该方法能够简便、快速的同时检测7种磺酰脲类药物，应用前景良好。

公开(公告)号：CN108164472B

公开(公告)日：2020-12-29

申请号：CN201711308739.9

申请日：2017-12-11

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  邹婷婷 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  王弘 ,  肖治理 ,  罗林 ,  雷红涛 ,  孙远明

IPC: C07D249/14 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/577 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开了一种基于4H‑三唑环结构限定性N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉半抗原、人工抗原、抗体及应用。一种N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉半抗原，结构如式I所示：其中R为羧基和对羧基苯基。并以此制备了N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉人工抗原和抗体，对N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉的检测效率高、操作简便，可用于N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉的酶联免疫快速检测；且本发明的抗原抗体合成过程简单、成本较低，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN108178777B

公开(公告)日：2020-12-11

申请号：CN201711464700.6

申请日：2017-12-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  姚婵媛 ,  杨金易 ,  王弘 ,  徐振林 ,  孙远明 ,  韦晓群

IPC: C07H17/08 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K16/44 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种泰乐菌素半抗原、人工抗原与抗体及其制备方法和应用。具体是将泰勒菌素大环侧链的乙醛基官能团作为衍生偶联位点，通过一步氧化法将醛基转化为羧基，即得到羧甲基化偶联手臂的泰勒菌素半抗原。所得半抗原与骨架结构重叠度高，为泰乐菌素特征结构的暴露和高特异性抗体的产生做好了基础。进一步将半抗原与载体蛋白偶联得到人工抗原，并免疫动物获得泰勒菌素高特异性抗体，所建立的酶联免疫方法准确度高，灵敏度好，检测限达到0.051 ng/mL，半抑制浓度为1.39 ng/mL，且操作简单，成本低，非常适合于现场检测，可用于环境和食品样品中泰乐菌素的快速有效检测，具有广阔的应用前景和经济价值。

公开(公告)号：CN111961010A

公开(公告)日：2020-11-20

申请号：CN202010435981.8

申请日：2020-05-21

Applicant: 广东康辉集团有限公司 ,  华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  张咏仪 ,  徐振林 ,  杨金易 ,  孙远明 ,  郭卓钊

IPC: C07D275/06 ,  C07K14/77 ,  C07K14/79 ,  C07K16/44 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种糖精钠半抗原Ri、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。本发明首先提供了一种糖精钠半抗原Ri，其结构式如式(I)所示：该糖精钠半抗原Ri是将糖精钠类似物6-氨基糖精苯环上的氨基功能团作为手臂延长位点，通过与丁二酸酐发生反应生成酰胺，所得到的半抗原与待测物糖精钠的骨架结构重叠度高和将糖精钠的特征结构暴露出来，为产生高特异性抗体做好了基础；进一步利用该糖精钠半抗原Ri的羧基末端与乳铁蛋白偶联得到的人工抗原作为免疫原免疫动物，通过细胞融合制备了杂交瘤单抗细胞株，获得糖精钠高特异性单克隆抗体。且该糖精钠半抗原Ri、人工抗原和抗体的制备方法简单易行、成本低，应用前景广泛。

公开(公告)号：CN111825759A

公开(公告)日：2020-10-27

申请号：CN202010462243.2

申请日：2020-05-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 肖治理 ,  李莉萍 ,  田巍 ,  孙远明 ,  徐振林 ,  沈玉栋 ,  罗林 ,  柳心梅 ,  谢波

IPC: C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种间接检测甲基嘧啶磷的酶联免疫吸附分析方法，以牛血清白蛋白偶联2-二乙基氨基-6-甲基-4-嘧啶醇的人工抗原为免疫原，以鸡卵清白蛋白偶联2-二乙基氨基-6-甲基-4-嘧啶醇的人工抗原为包被原。以人工免疫原免疫试验动物，使其机体产生特异性针对甲基嘧啶磷水解产物的抗体，所述抗体可以特异性识别甲基嘧啶磷水解产物--2-二乙基氨基-6-甲基-4-嘧啶醇，用于农药原药水解后间接检测食品中甲基嘧啶磷的含量。该方法检测限为3.2ng/mL，半抑制浓度(IC50)为23.42ng/mL，线性检测范围为6.09～90.07ng/mL，曲线相关系数为0.9996。本发明方法特异性强，灵敏度高，简便快捷，在食品中甲基嘧啶磷残留检测方面具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN111675670A

公开(公告)日：2020-09-18

申请号：CN202010450166.9

申请日：2020-05-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  何凡 ,  张咏仪 ,  王弘 ,  徐振林 ,  杨金易 ,  肖治理 ,  雷红涛 ,  孙远明

IPC: C07D263/26 ,  C07K14/42 ,  C07K14/77 ,  C07K16/06 ,  C07K16/44 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种用于直接检测AMOZ的柠檬酸基树状半抗原CAA、树状抗原、重链抗体及制备方法。本发明制备得到了一种柠檬酸基树状半抗原CAA，是将AMOZ与柠檬酸进行缩合反应而得到，其结构式如式(I)所示：利用该柠檬酸基树状半抗原CAA成功制备得到了AMOZ树状抗原和能够特异性结合AMOZ的重链抗体IgG3和IgG2，且其制备方法简单易行、成本低；另外，本发明基于驼源重链抗体建立的直接检测AMOZ的方法对AMOZ的最低检测限为0.99ng/mL，IC50为50.95ng/mL，线性范围为8.87-292.71ng/mL，具有简便快速、灵敏度高、特异性强的特点，能够满足目前高通量、快速、现场检测环境和食品样品中AMOZ的需求。

公开(公告)号：CN111548309A

公开(公告)日：2020-08-18

申请号：CN202010350486.7

申请日：2020-04-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  张咏仪 ,  徐振林 ,  王弘 ,  杨金易 ,  孙远明 ,  肖治理 ,  雷红涛

IPC: C07D233/60 ,  C07K14/77 ,  C07K14/79 ,  C07K16/44 ,  C07K16/06 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种抑霉唑半抗原YM-A、人工抗原、重链抗体及其制备方法和应用。本发明首先提供了一种抑霉唑半抗原YM-A，其结构式如式(I)所示：该抑霉唑半抗原YM-A与待测物抑霉唑的骨架结构重叠度高，有效地提高了抑霉唑半抗原YM-A的免疫原性；进一步利用该抑霉唑半抗原YM-A与乳铁蛋白偶联得到的人工抗原作为免疫原免疫羊驼，将免疫效果好的羊驼血清交替使用Protein A和Protein G亲和层析柱进行分离，成功制备得到了抑霉唑重链抗体；并利用该重链抗体建立了一种基于重链抗体检测抑霉唑分析方法，对抑霉唑的最低检测限为12.39ng/mL，IC50为122.18ng/mL，线性范围为29.41～507.63ng/mL；且该抑霉唑半抗原YM-A、人工抗原和重链抗体的制备方法简单易行、成本低，应用前景广泛。