加强了frr表达的重组淀粉酶产色链霉菌及构建方法与用途

    公开(公告)号:CN103289945A

    公开(公告)日:2013-09-11

    申请号:CN201310170674.1

    申请日:2013-05-08

    Abstract: 本发明公开了一种加强了frr表达的重组淀粉酶产色链霉菌及构建方法与用途。它过量表达了核糖体循环因子frr,具有比淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes)1628更高的丰加霉素合成能力。构建过程如下:1)构建表达载体pIB139-frr;2)利用接合转移法将所述的表达载体整合入淀粉酶产色链霉菌染色体,获得所述的工程菌。利用pIB139载体上的启动子permE*启动frr基因的表达,利用接合转移法将载体pIB139-frr特异性的整合入淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes)1628的染色体,获得了遗传稳定的工程菌。与原始菌株相比,重组菌丰加霉素合成途径关键酶基因toyF的转录水平显著增强,丰加霉素产量至少提高43.6%,发酵周期缩短12h。

    解淀粉芽孢杆菌添加前体物发酵法生产抗病毒药物利巴韦林的生产工艺

    公开(公告)号:CN103146785A

    公开(公告)日:2013-06-12

    申请号:CN201310097836.3

    申请日:2013-03-25

    Abstract: 一种解淀粉芽孢杆菌添加前体物TCA(1,2,4-三氮唑-3-羧甲酰胺)发酵法生产抗病毒药物利巴韦林的生产工艺。本发明首先构建了一个能在解淀粉芽孢杆菌细胞内稳定复制并高效分泌表达嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)的重组质粒pBSA43-Bs816PNP,并将此质粒转化鸟苷生产菌解淀粉芽孢杆菌TA208,得到一株兼具高效生产鸟苷和高效表达嘌呤核苷磷酸化酶这两种特点基因工程菌RBVM(pBSA43-Bs816PNP)。采用该工程菌,以葡萄糖、酵母膏、豆浓、玉米浆、磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸亚铁和自来水为原料,添加前体物TCA进行发酵,添加前体物几小时后便可在培养基中检测到较高浓度的利巴韦林。本发明具有发酵周期短,产量高,糖苷转化率高,工艺简便,成本低,能耗低,污染小等优点。

    一种他立韦林的制备方法
    13.
    发明公开

    公开(公告)号:CN102978264A

    公开(公告)日:2013-03-20

    申请号:CN201210458404.6

    申请日:2012-11-14

    Abstract: 本发明公开了一种他立韦林的制备方法,采用乙酰短杆菌Brevibacterium acetylicum ATCC39311菌株作为菌种,包括如下步骤:A、将菌种先进行发酵得菌种发酵液,再将菌种发酵液进行催化底物反应;B、催化反应液的后处理; C、氨解反应与纯化。与现有技术本相比,本发明具的优点和效果是:1)菌种发酵液催化反应相比化学法条件温和。2)原料成本低。3)步骤简便。4)他立韦林总收率高,达到87.5%~91.5%。

    一种基于唾液特异性岩藻糖基化结构糖谱及其检测方法和应用

    公开(公告)号:CN113960232A

    公开(公告)日:2022-01-21

    申请号:CN202111259337.0

    申请日:2021-10-28

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于唾液特异性岩藻糖基化结构糖谱及其检测方法,首先采集人体唾液标本,接着从唾液中提取蛋白质,然后将聚糖从糖蛋白质上酶解富集,再用质谱对聚糖结构解析和丰度定量分析,最后确定样本中聚糖糖谱。通过对健康、非癌症和肺癌唾液分析,鉴定高丰度核心岩藻糖和支链岩藻糖的糖谱,可应用于肺癌的临床筛查。本方案便于早期诊断,样本易收集,对患者无伤害,具有优良的应用前景,对高发病率和高死亡率肺癌的早期筛查和治疗等方面有着重要意义。

    合成N-乙酰氨基葡萄糖的基因工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN110669708B

    公开(公告)日:2021-10-15

    申请号:CN201910627190.2

    申请日:2019-07-11

    Abstract: 本发明涉及一种合成N‑乙酰氨基葡萄糖的基因工程菌及其应用。该基因工程菌为含有氨基葡萄糖合成酶基因glmS和氨基葡萄糖转乙酰基酶基因gna1的重组谷氨酸棒状杆菌,且其经过了敲除GlcNAc逆转运途径、分解代谢途径和竞争代谢途径的相关基因的底盘微生物改造;该基因工程菌还含有用于提高胞外GlcNAc浓度的6p‑GlcNAc特异性的磷酸酶基因yqaB,并且该基因工程菌表达氨基葡萄糖合成酶基因glmS、氨基葡萄糖转乙酰基酶基因gna1和6p‑GlcNAc特异性的磷酸酶基因yqaB。该基因工程菌安全无毒性,能够利用微生物发酵法高产GlcNAc,且批次稳定,生产成本较低,应用前景广阔。

    生产氨基糖的方法及专用菌株

    公开(公告)号:CN102031232B

    公开(公告)日:2012-05-02

    申请号:CN201010531998.X

    申请日:2010-11-04

    Abstract: 本发明公开了一种生产氨基糖的方法及专用菌株。生产氨基糖的专用菌株其保藏编号为CGMCC No.4218。生产氨基糖的方法,包括如下步骤:将生产氨基糖的专用菌株CGMCC No.4218在产酶发酵培养基中28~37℃发酵培养,获得含氨基糖的复合产物;通过非专一性转化酶水解所述含氨基糖的复合产物,过滤,浓缩,干燥得到氨基糖粉末;所述产酶发酵培养基包括如下质量百分含量的物质:1.0~2.0%的淀粉水解物、0.1~0.8%氮源、0.01~0.5%无机盐,0.01~0.1%小分子有机酸,余量为水;所述非专一性转化酶为溶菌酶、复合蛋白酶、蜗牛酶、复合纤维素酶,几丁质酶、壳聚糖酶中的任一种或几种。利用本发明的菌株OLG-1发酵生产氨基糖,糖转化能力高,超过60%,单位发酵液所含氨基糖复合物达每升5-10克原料消耗少,培养条件容易控制。

    一种微生物产酶发酵酶法生产抗病毒药物利巴韦林的工艺

    公开(公告)号:CN101974585A

    公开(公告)日:2011-02-16

    申请号:CN201010527428.3

    申请日:2010-11-02

    Abstract: 一种利用基因工程菌产酶发酵,微生物酶法生产抗病毒药物利巴韦林的生产工艺。构建高效表达冷适应嘌呤核苷磷酸化酶的基因工程菌DH5α(pQF-XmPNP),优化冷适应酶表达条件,采用该工程菌,以葡萄糖、酵母膏、豆浓、玉米浆、磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸亚铁、微量元素和自来水为原料,进行产酶发酵,以所得菌体为酶源,以鸟苷和TCA(1,2,4-三氮唑-3-羧甲酰胺)为底物,50℃反应生产利巴韦林。本发明降低了传统酶法反应温度,降低了能耗,产酶效率高,底物转化率高,环境污染程度低,工艺简单,降低了生产成本。

    一种从硫酸新霉素发酵液中提取硫酸弗拉菌素的方法

    公开(公告)号:CN101343295B

    公开(公告)日:2010-12-08

    申请号:CN200810079256.0

    申请日:2008-08-25

    Abstract: 本发明涉及一种药品原料的制备方法,特别是指一种从硫酸新霉素发酵液中提取硫酸弗拉菌素的方法。包括将硫酸新霉素发酵液经强酸性离子树脂吸附、解析、浓缩、脱色;将浓缩、脱色后的硫酸新霉素浓缩液经弱酸性阳离子交换树脂吸附;用0.1M-1.0M氨水对a步骤中的饱和树脂中的硫酸新霉素B进行洗脱;洗脱液进行浓缩、酸化、脱色、喷雾干燥、微粉化制成硫酸弗拉菌素。本发明解决了现有技术存在的解析收率低,原材料消耗大,成本高。结晶过程用甲醇,成本高,对环境造成污染,产品中有机溶剂残留高的问题。具有提高了树脂吸附选择性,减少了洗脱液的用量,产品中无有机溶剂残留,减少`环境污染,提高收率,提高产品质量,生产成本低等优点。

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