一株骆驼刺泛菌突变株PA11ZM1的筛选方法及其应用

    公开(公告)号:CN108546652A

    公开(公告)日:2018-09-18

    申请号:CN201810196893.X

    申请日:2018-03-10

    Abstract: 本发明公开了一株骆驼刺泛菌突变株PA11ZM1的筛选方法及其应用,在骆驼刺泛菌已有的促作物抗干旱功能基础上,通过独特的GREACE诱变筛选技术,获得了一株既能促作物抗干旱,又可以抗高盐胁迫的骆驼刺泛菌突变株。GREACE诱变筛选技术不同于传统的先诱变再筛选的方法,首先通过诱变PCR获得大量变异的骆驼刺泛菌DNA聚合酶Ⅲδ亚基基因片段。然后通过构建载体将这些突变片段导入野生型骆驼刺泛菌,获得DNA聚合酶Ⅲδ亚基突变基因表达文库,进而利用逐步提高NaCl浓度的高盐胁迫环境定向筛选获得耐受高盐的骆驼刺泛菌突变株。

    一个新型细菌抗逆功能基因及其表达产物与应用

    公开(公告)号:CN104878023A

    公开(公告)日:2015-09-02

    申请号:CN201510194757.3

    申请日:2015-04-22

    Abstract: 一个新型细菌抗逆功能基因及其表达产物与应用,所述基因的核苷酸序列如SED ID NO:1所示。本发明还包括新型细菌抗逆功能基因的表达产物分支硫醇抗氧化物酶MPx与应用。本发明之新型细菌抗逆基因可克隆到表达载体pET28a上,然后转到BL21(DE3)菌株中表达,并用温和破碎法纯化表达产物,即可得到分支硫醇抗氧化物酶MPx,该表达产物可显著提高细菌的抗逆性。实验证明,在100mM过氧化氢、11mM异丙苯-OOH和120mMLA-OOH处理下,Δmpx突变体的存活率下降约20%~35%,野生型中Pmpx的启动子活性在35mM H2O2,5.5mM异丙苯-OOH和60mMLA-OOH处理下分别提高了38.7%,44.5%和32.3%。

    增强型单体细菌荧光素酶基因luxAB及其应用

    公开(公告)号:CN103160528A

    公开(公告)日:2013-06-19

    申请号:CN201310073405.3

    申请日:2013-03-07

    Abstract: 本发明公开了增强型单体细菌荧光素酶基因luxAB,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。以及所述的增强型单体细菌荧光素酶基因luxAB作为生物发光报告基因的应用。本发明将luxA和luxB基因融合表达后形成的单体蛋白经过易错PCR突变和化学随机突变,克隆到pBluescriptII载体中,筛选得到9个荧光强度增强的突变体,然后经过shuffling技术,得到一个增强型单体细菌荧光素酶基因luxAB。从实验结果我们看出该增强型单体细菌荧光素酶不仅可以在革兰氏阴性菌种表达出有活性的荧光蛋白而且还可以应用到革兰氏阳性菌中,是很有前景的生物发光报告基因。

    一株短乳杆菌LB-21及其应用、发酵剂和方法

    公开(公告)号:CN117736932B

    公开(公告)日:2024-11-08

    申请号:CN202410010866.4

    申请日:2024-01-04

    Abstract: 本发明涉及酿酒技术领域,特别是涉及一株短乳杆菌LB‑21及其应用、发酵剂和方法。所述短乳杆菌LB‑21于2022年03月09日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M2022231。短乳杆菌LB‑21耐受酸/乙醇能力强,可快速生长并完全降解苹果酸,与现有的混菌发酵降酸技术相比,降酸速度更快,实施例中发酵10天苹果酸由2.8g/L降至0.25g/L以下,将LB‑21与酿酒酵母同时接种,快速高效完成酒精‑苹乳同时发酵。增香效果明显,与现有的混菌发酵增香技术相比,乙酸异丁酯、乙酸己酯、乙酸苯乙酯、乳酸乙酯、琥珀酸二乙酯等果香和乳香物质含量显著提升。

    一种哈瓦斯假单胞菌、生防菌剂及应用

    公开(公告)号:CN118222449A

    公开(公告)日:2024-06-21

    申请号:CN202410440774.X

    申请日:2024-04-12

    Abstract: 本发明从小麦茎组织分离得到一种假单胞菌属SR9菌种,通过全基因组平均核苷酸相似度分析,证实菌种SR9为哈瓦斯假单胞菌,平板对峙实验证明了SR9菌种对假禾谷镰刀菌具有较强的拮抗效果,在对峙培养中,哈瓦斯假单胞菌SR9对假禾谷镰刀菌的生长抑制率达到69%以上,并通过类似的方法验证了SR9的广谱抑菌性可以拮抗多种植物病原菌,如脉孢霉菌、核盘菌和葡萄座腔菌。可将其应用于由假禾谷镰刀菌引起的小麦茎基腐病,由脉孢霉菌引起的玉米芯或棉籽壳的灰霉病,由核盘菌引起的壳果类作物的褐腐病,以及由葡萄座腔菌引起的苹果果实的轮纹烂果病,为植物真菌病害的生物防治提供了新方案和新思路。

    一种激活放线菌沉默次生代谢产物合成基因簇表达的方法

    公开(公告)号:CN117625430A

    公开(公告)日:2024-03-01

    申请号:CN202310681790.3

    申请日:2023-06-09

    Abstract: 本发明公开了一种激活放线菌沉默次生代谢产物合成基因簇(BGC)表达的方法,涉及微生物次生代谢产物技术领域,其技术要点为:该方法采用微生物群体感应信号分子刺激放线菌沉默基因簇,使放线菌沉默BGCs被激活;所使用的群体感应信号分子包括但不限于Farnesol、Tyrosol、3‑oxo‑C12‑HSL和Tryptophol。本发明的方法为一种新型激活放线菌沉默基因簇表达的方法,即为一种快速、高效激活不同放线菌中沉默BGCs的策略,本发明的方法将为激活自然界中大量存在的沉默BGCs宝库,深入发掘新型放线菌天然产物提供有效途径,从而为医药、农业等多领域的研发贡献更多更好的新型先导化合物。

    一种蛋白型锰离子螯合剂、免疫抑制剂及应用

    公开(公告)号:CN111569047B

    公开(公告)日:2023-02-10

    申请号:CN202010412287.4

    申请日:2020-05-15

    Abstract: 本发明公开了一种蛋白型锰离子螯合剂、免疫抑制剂及应用,属于基因工程领域,包括假结核耶尔森氏菌转锰效应蛋白,所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示;在所述的蛋白上螯合Mn2+。转锰效应蛋白可特异并高效与锰离子结合,且在增强细菌的致病能力方面发挥了重要作用,具体体现在该效应蛋白编码基因缺失突变体菌株降低了假结核耶尔森氏菌对小鼠的致病能力,并且该效应蛋白编码基因缺失突变体菌株更能激活宿主细胞的天然免疫应答;本发明公开的转锰效应蛋白在制备特异性锰离子螯合剂以及免疫抑制剂方面均具有潜在应用前景,同时为增强细菌抗环境胁迫能力提供了新的途径。

    一株可高效降解木质素的乙酸钙不动杆菌

    公开(公告)号:CN104017753A

    公开(公告)日:2014-09-03

    申请号:CN201410193429.7

    申请日:2014-05-09

    Abstract: 本发明提供了一株可高效降解木质素的乙酸钙不动杆菌,其特征在于:乙酸钙不动杆菌AcinetobactercalcoaceticusLG-1,已在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)登记保藏;保藏日期为2014年3月12日;编号为CCTCCM2014079。该菌对木质素具有高效降解作用,其可以在以木质素作为唯一碳源的木质素无机盐培养液中生长,且其生长曲线图显示该菌的生长效果明显高于作为阳性对照的红球菌和作为阴性对照的大肠杆菌,本菌株可应用于造纸,能源,环保等领域,利用其对碱性木质素的高效降解效率进而解决碱木质素在各行业中降解难度大的问题。

    增强型单体细菌荧光素酶基因luxAB及其应用

    公开(公告)号:CN103160528B

    公开(公告)日:2014-06-11

    申请号:CN201310073405.3

    申请日:2013-03-07

    Abstract: 本发明公开了增强型单体细菌荧光素酶基因luxAB,其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。以及所述的增强型单体细菌荧光素酶基因luxAB作为生物发光报告基因的应用。本专利将luxA和luxB基因融合表达后形成的单体蛋白经过易错PCR突变和化学随机突变,克隆到pBluescriptII载体中,筛选得到9个荧光强度增强的突变体,然后经过shuffling技术,得到一个增强型单体细菌荧光素酶基因luxAB。从实验结果我们看出该增强型单体细菌荧光素酶不仅可以在革兰氏阴性菌种表达出有活性的荧光蛋白而且还可以应用到革兰氏阳性菌中,是很有前景的生物发光报告基因。

    基于细菌荧光素酶BRET技术检测蛋白质相互作用的方法

    公开(公告)号:CN103616502A

    公开(公告)日:2014-03-05

    申请号:CN201310413981.8

    申请日:2013-09-12

    CPC classification number: C12Q1/6818 C12Q2565/101 C12Q2565/601

    Abstract: 本发明公开了一种基于细菌荧光素酶BRET技术检测蛋白质相互作用的方法,构建荧光供体克隆pBluescript-pLac::luxAB-MCS;受体蛋白选择绿色荧光蛋白GFP等;在MCS处选择合适酶切位点分别将三种荧光蛋白克隆到MCS处;产生BRET信号的模式体;检测三个BRET模式体的荧光素酶的荧光强度;选择三个荧光强度值都较强的模式体作为BRET信号产生的荧光供体;通过生物荧光显微镜(Leica)检测荧光蛋白的表达情况,选择合适的荧光受体;通过荧光分光光度计检测BRET模式体的信号。本发明通过细菌荧光素酶luxAB作为检测两蛋白互作的荧光供体与eYFP作为荧光受体产生BRET信号,构建BRET模型,该系统可以在体内检测两个蛋白的动态互作,提高了检测蛋白质相互作用的准确性,作为检测原核细胞内蛋白质互作的较理想系统。

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