一种筛选调控特定基因mRNA的miRNAs的方法

    公开(公告)号:CN104099322A

    公开(公告)日:2014-10-15

    申请号:CN201410327898.3

    申请日:2014-07-11

    Abstract: 本发明建立了一种基于生物素标记的筛选调控特定基因mRNA的miRNAs的方法。本发明将目的基因的3’UTR序列克隆到EGFP荧光载体下游,生物信息学分析预测EGFPmRNA的二级结构和设计互补的反义链DNA,并进行3’端生物素标记,利用生物素和链霉亲和素之间的强亲和力将与目的基因mRNA结合在一起的所有miRNA进行分离和纯化。该方法可以分离纯化出调控特定基因mRNA的所有miRNAs,并且可以应用到所有目的基因的mRNA,避免重复设计和合成生物素标记的反义链寡核苷酸链。

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