公开(公告)号：CN117210506A

公开(公告)日：2023-12-12

申请号：CN202311173216.3

申请日：2023-09-12

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 陈矾 ,  毕延震 ,  顾浩 ,  罗安凤 ,  华再东 ,  任红艳 ,  周昌繁

IPC: C12N15/87 ,  C12N15/113 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种小干扰RNA高效转染卵母细胞的方法，具体为：将卵母细胞置于纳米电穿孔缓冲液中进行电击，其中所述纳米电穿孔缓冲液为包括siRNA、纳米多肽的卵母细胞培养液。本发明方法保留了透明带，对卵母细胞后续发育潜能无影响，通过电穿孔和纳米多肽的协同作用，实现了较高的干扰效率，操作流程简单且时间短成本低。本发明建立的卵母细胞siRNA转染方法，极大地提高了生殖生物学和动物繁殖学相关领域研究人员的工作效率，减少对仪器和人员的依赖，减低成本，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN119286862A

公开(公告)日：2025-01-10

申请号：CN202411502198.3

申请日：2024-10-25

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 周昌繁 ,  黄国斌 ,  毕延震 ,  任红艳 ,  顾浩 ,  陈矾 ,  曾威 ,  刘松 ,  徐德全

IPC: C12N15/113 ,  C12Q1/6888 ,  C12N15/85 ,  C12N15/64 ,  C12N5/10 ,  C12P7/56

Abstract: 本发明公开了一种猪环状RNA、猪circLDHC、过表达载体及其构建方法和应用，涉及家畜分子生物学技术领域。所述猪环状RNA由LDHC基因第3‑6外显子环化形成，猪环状RNA核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。所述猪circLDHC由猪环状RNA经逆转录所得。本发明针对circLDHC设计特异性扩增引物，经PCR扩增、测序及RNase R酶消化验证所述的circLDHC的真实存在。荧光定量PCR分析发现circLDHC在猪性成熟睾丸组织中高表达，其表达水平与睾丸的成熟相关，同时在75日龄梅山公猪睾丸中表达量极显著高于同日龄杜洛克公猪(p

公开(公告)号：CN118360238A

公开(公告)日：2024-07-19

申请号：CN202410467486.3

申请日：2024-04-17

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 张立苹 ,  毕延震 ,  肖红卫 ,  任红艳 ,  顾浩 ,  周昌繁 ,  曾威 ,  陈矾

IPC: C12N5/077 ,  C12N5/10 ,  C12N15/873

Abstract: 本发明公开了一种单克隆细胞的制备方法及应用，属于细胞生物学技术领域。本发明提供了一种单克隆细胞的制备方法，利用原代成纤维细胞进行培养，选取对数生长期的细胞进行转染，并对转染后的细胞进行抗生素筛选，直到有细胞单克隆的出现，挑选单克隆细胞。利用本发明所述制备方法制备得到的单克隆细胞，效率高且挑选的单克隆较为单一，挑选时细胞始终处于液体中，细胞的成活率高。本发明得到的所述单克隆细胞可作为动物体细胞核移植的供体细胞，用于转基因克隆动物的制备。

公开(公告)号：CN116286891A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310186362.3

申请日：2023-03-02

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 毕延震 ,  方钱海 ,  任红艳 ,  顾浩 ,  陈矾 ,  周昌繁

IPC: C12N15/53 ,  C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明提供了一种猪SCD基因家族成员双基因突变细胞、突变细胞系及突变动物的构建方法，涉及生物医学技术领域。本发明从猪SCD1基因中分离出1个基因编辑靶位点，从猪SCD5基因中分离出2个基因编辑靶位点，均可应用于基因编辑。统计结果表明，以上位点的打靶效率分别为90％和82％。提供的猪SCD1和SCD5双基因编辑位点为对猪硬脂酰辅酶A去饱和酶基因家族成员进行精确编辑提供了有效靶标，同时提供了一个猪SCD1和SCD5双基因突变的细胞模型，为脂质代谢及猪种肉质改良提供了可靠的研究材料，也为优良肉质猪品种的研究和开发提供了新策略。

公开(公告)号：CN115918641A

公开(公告)日：2023-04-07

申请号：CN202211516735.0

申请日：2022-11-29

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 肖红卫 ,  华再东 ,  张立苹 ,  陈矾 ,  周昌繁 ,  任红艳 ,  毕延震

IPC: A01N1/02 ,  C12N5/076

Abstract: 本发明公开了一种猪精液冷冻保护剂、制备方法、冷冻及解冻方法和应用，涉及猪精液冷冻保护技术领域。所述冷冻保护剂包括渗透性冷冻保护剂和非渗透性冷冻保护剂，所述渗透性冷冻保护剂包括甘油、DMSO和异丙醇；所述非渗透性冷冻保护剂包括PVP、吐温20、Triton‑100和SDS，且渗透性冷冻保护剂和非渗透性冷冻保护剂的体积比为1:1。本发明利用渗透性冷冻保护剂与非渗透性冷冻保护剂联合使用，可以充分保护精子的顶体、线粒体完整性，提高精子配种率，解冻后精液活力优于其它猪冻精。采用本发明的稀释剂用于猪冷冻精液的生产，解冻后精子活力达85％以上，顶体完整率达85％以上，质膜完整率80以上，线粒体活性达80％以上，畸形率10％以下。