适用于芽胞杆菌的透明颤菌血红蛋白表达框及应用

    公开(公告)号:CN111549050A

    公开(公告)日:2020-08-18

    申请号:CN202010417161.6

    申请日:2020-05-18

    申请人: 湖北大学

    摘要: 本发明属于生物技术与发酵工程领域,提供了适用于芽胞杆菌的透明颤菌血红蛋白表达框及应用,本发明将透明颤菌血红蛋白VHb与枯草芽胞杆菌中YwbN的信号肽SPywbN以及枯草芽胞杆菌启动子P43、地衣芽胞杆菌中淀粉酶终止子TamyL相连,组成VHb蛋白表达框P43-SPywbN-vhb-TamyL。将该表达框应用于三种芽胞杆菌(枯草芽胞杆菌168、解淀粉芽胞杆菌LX-12、地衣芽胞杆菌DW2)中,与常规的单独强化表达VHb菌株相比,分别使得聚γ-谷氨酸、伊枯草菌素A、杆菌肽的产量提高21.85%、18.77%和23.40%,本发明为透明颤菌血红蛋白VHb在芽胞杆菌中高效表达和广泛应用提供了理论指导。

    苯丙酮酸脱羧酶突变体M538A在生物发酵生产苯乙醇中的应用

    公开(公告)号:CN110331173A

    公开(公告)日:2019-10-15

    申请号:CN201910688005.0

    申请日:2019-07-29

    申请人: 湖北大学

    IPC分类号: C12P7/22 C12N1/21 C12R1/10

    摘要: 本发明属于基因工程和酶工程技术领域,公开了苯丙酮酸脱羧酶突变体M538A在生物发酵生产苯乙醇中的应用。本发明通过定点突变的方式,将来源于乳酸乳球菌(Lactococcus lactis subsp. Lactis,其保藏号为CICC6246)的苯丙酮酸脱羧酶KivD分子催化结构域附近的第538位甲硫氨酸突变为丙氨酸显著提高了苯丙酮酸脱羧酶的酶活力,解决了目前苯丙酮酸脱羧酶对苯丙酮酸催化效率不高的问题,使用于苯乙醇的生物发酵,为苯乙醇的生产提供新思路,适合大规模推广。

    一株可以高产聚γ-谷氨酸的地衣芽胞杆菌工程菌

    公开(公告)号:CN106497857B

    公开(公告)日:2019-07-02

    申请号:CN201611043607.3

    申请日:2016-11-11

    申请人: 湖北大学

    IPC分类号: C12N1/21 C12P13/02 C12R1/10

    摘要: 本发明提供了一株高产聚γ‑谷氨酸的地衣芽胞杆菌工程菌,其保藏号为CCTCC No:M2016439,命名为地衣芽胞杆菌Bacillus licheniformis(WX‑02)/pHY‑zwf,并进一步提供了地衣芽胞杆菌WX‑02/pHY‑zwf的构建方法及高产聚γ‑谷氨酸的方法。通过基因工程改造增加胞内NADPH的合成水平,提高γ‑PGA的产量。通过构建6‑磷酸葡萄糖脱氢酶过表达载体pHY‑zwf,并转化至实验室之前保存的产γ‑PGA地衣芽胞杆菌WX‑02中,重新构建了地衣芽胞杆菌产γ‑PGA工程菌WX‑02/pHY‑zwf。该菌株在优化培养基和培养条件下可以显著提高γ‑PGA的合成。其聚γ‑谷氨酸产量高达51.13g/L;与原始菌株相比聚γ‑谷氨酸产量显著提高49%。

    一种提高芽胞杆菌甘油代谢增加聚γ-谷氨酸产量的方法

    公开(公告)号:CN109913515A

    公开(公告)日:2019-06-21

    申请号:CN201810396812.0

    申请日:2018-04-28

    申请人: 湖北大学

    摘要: 本发明公开了一种通过强化黄素腺嘌呤二核苷酸的合成提高芽胞杆菌甘油代谢增加聚γ-谷氨酸产量的方法。通过在芽胞杆菌中强化表达黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)合成途径中的三个关键基因ribE、ribF和ribH,分别构建了三株FAD强化合成的菌株。在不同的液体发酵条件下,ribE、ribF和ribH过表达使甘油代谢能力比对照菌株分别至少提高了22.02%,20.62%和23.92%,这些重组菌株的聚γ-谷氨酸产量至少是对照菌株的1.20倍,1.18倍和1.27倍。由此表明,强化FAD合成可显著提高芽胞杆菌甘油代谢,增加聚γ-谷氨酸合成。该方法能够提高甘油利用来增强目标产物的合成,在利用甘油为原料微生物发酵合成生物基化合物方面具有广泛的应用价值,为微生物高效利用甘油合成生物基化学品提供了一种新策略。

    一种高效代谢甘油的芽胞杆菌的制备方法和应用

    公开(公告)号:CN108588108A

    公开(公告)日:2018-09-28

    申请号:CN201810420776.7

    申请日:2018-05-04

    申请人: 湖北大学

    摘要: 本发明属于基因工程和微生物技术领域,具体涉及一种高效代谢甘油的芽胞杆菌的制备方法和应用。本方法采用分子生物学技术,通过在地衣芽胞杆菌中敲除转录抑制因子基因ccpC,获得了ccpC缺失的地衣芽胞杆菌工程菌株WX-02△ccpC,显著提高了地衣芽胞杆菌甘油代谢的速率。WX-02△ccpC在不同培养基中的甘油消耗速率比原始菌地衣芽胞杆菌WX-02至少提高了18.38%,最高可达32.67%。利用该菌株在聚γ-谷氨酸发酵培养基中能够显著提高聚γ-谷氨酸的产量,至少提高了10.7%,最高可达17.4%。说明该基因工程改造方法在提高微生物甘油代谢速率具有重要作用,并提高甘油合成生物基化学品的效率。

    一种降低烟草特有亚硝胺的解淀粉芽胞杆菌DA9及其应用

    公开(公告)号:CN105886417A

    公开(公告)日:2016-08-24

    申请号:CN201410548352.0

    申请日:2014-10-14

    申请人: 湖北大学

    IPC分类号: C12N1/20 A24B15/20 C12R1/07

    摘要: 本发明涉及微生物领域,具体地,本发明涉及一株具有降烟草特有亚硝胺的解淀粉芽孢杆菌。本发明采用的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)DA9已于2014年6月12日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCNO:M2014252。本发明从白肋烟烟叶表面细菌中筛选到一株能显著降低烟草特有亚硝胺的解淀粉芽孢杆菌DA9,该菌株的特点为降亚硝酸盐能力强而降硝酸盐能力弱,通过液体发酵制备菌液,将菌液运用于白肋烟晾晒和陈化过程中,分别比对照低47.08%和47.57%,具有良好的应用价值。

    一种有机废弃物的耐高温腐熟菌剂及其应用

    公开(公告)号:CN105524858A

    公开(公告)日:2016-04-27

    申请号:CN201510852975.1

    申请日:2015-11-27

    申请人: 湖北大学

    IPC分类号: C12N1/20 C05F17/00 C12R1/125

    CPC分类号: Y02W30/43

    摘要: 本发明公开了一种腐熟有机废弃物的耐高温腐熟菌剂,枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)H1-7,保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏编号为CCTCC NO:M2015174。H1-7菌剂在有机废弃物堆肥中的应用方法为将所述H1-7菌剂的发酵液和市售有机废腐熟剂按1:10~20的质量比混合,以0.2%~0.5%的接种量接入有机废弃物堆体发酵,可加快有机废弃物腐熟。本发明提供耐高温腐熟菌剂构成简单,制备方便,利于推广,在高温环境下能维持较好的降解效果,具有更强的环境适应性,加速了堆肥化进程。

    聚γ-谷氨酸作为农药粘附剂的应用

    公开(公告)号:CN105432603A

    公开(公告)日:2016-03-30

    申请号:CN201510893337.4

    申请日:2015-11-30

    申请人: 湖北大学

    摘要: 本发明公开了聚γ-谷氨酸作为农药粘附剂的应用,聚γ-谷氨酸与辛硫磷农药、阿维菌素农药或多菌灵等农药混用。聚γ-谷氨酸作为农药粘附剂,在紫外照射3h条件下能减少农药降解率达20%以上;在水淋条件下,能减少农药流失率达25%以上。说明聚γ-谷氨酸具有保护农药抗紫外、抗雨水冲刷的作用,从而延长农药的药效周期,减少农药的使用次数和使用量,促进生态农业的可持续发展。