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公开(公告)号：CN115894638B
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202210987699.X
申请日：2022-08-17
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C07K14/18 , C12N15/40 , C12N15/81 , C12N1/19 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/532 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种重组鸭坦布苏病毒E蛋白结构域III蛋白的制备方法。本发明首先提供一株用于制备鸭坦布苏病毒E蛋白结构域III的毕赤酵母GS115菌株。该重组菌株是通过截取鸭坦布苏病毒囊膜蛋白EDIII抗原区域，经密码子优化获得鸭坦布苏病毒EDIII蛋白的编码序列，然后将其克隆到酵母表达载体pPIC9K上并转化到酵母宿主菌株GS115中。在甲醇的作用下，鸭坦布苏病毒EDIII蛋白获得高效表达。同时，将该蛋白作为包被抗原用于鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA诊断试剂盒，试剂盒具有较高的特异性、重复性及稳定性，可用于坦布苏病毒引起的相关疾病的诊断。
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公开(公告)号：CN116891913A
公开(公告)日：2023-10-17
申请号：CN202311104039.3
申请日：2023-08-30
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种基于RT‑RPA和CRISPR/Cas12a的坦布苏病毒核酸检测组合物、试剂盒及检测方法，所述坦布苏病毒核酸检测组合物包括RT‑RPA恒温扩增体系和CRISPR/Cas12a检测体系；所述RT‑RPA恒温扩增体系包括针对坦布苏病毒的RT‑RPA扩增引物；所述CRISPR/Cas12a检测体系包括靶向坦布苏病毒的特异性CrRNA、CRISPR/Cas12a蛋白和检测探针。本发明首次基于RT‑RPA和CRISPR/Cas12a系统检测坦布苏病毒核酸，具有特异性强、灵敏度高、简单快速、不依赖复杂大型仪器等优点，利于基层普及应用。
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公开(公告)号：CN108676078B
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN201810499820.8
申请日：2018-05-23
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明公开了引起坦布苏病毒抗体依赖增强作用的抗原的应用。所述的引起坦布苏病毒抗体依赖增强作用的抗原，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述的引起坦布苏病毒抗体依赖增强作用的抗原在制备坦布苏病毒疫苗中的应用。本发明用大肠杆菌表达的上述表位蛋白免疫雏鸭，可在雏鸭体内诱导产生高水平特异性抗体，该抗体可促进病毒增殖，提高病毒在雏鸭体内的滴度。在未来坦布苏病毒疫苗研发中，可通过分子设计去除该类抗原，避免疫苗引起抗体依赖增强作用，保证保护效果，因此，鉴定引起坦布苏病毒抗体依赖增强作用的抗原对研制有效、安全的疫苗和防控坦布苏病毒的流行具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN110386965A
公开(公告)日：2019-10-29
申请号：CN201810350513.3
申请日：2018-04-18
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种坦布苏病毒E蛋白B细胞表位及其编码基因和应用。一种坦布苏病毒E蛋白B细胞表位，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述的坦布苏病毒E蛋白B细胞表位在制备坦布苏病毒疫苗中的应用。本发明用大肠杆菌表达的上述表位蛋白免疫雏鸭，可在雏鸭体内诱导产生高水平特异性抗体，该抗体对坦布苏病毒具有中和作用，并保护宿主免受病毒攻击。B细胞表位具有良好的抗原性，为非全病毒抗原，安全性好，不含无关杂蛋白。此外，还可与其他类型的表位共同构建新型多表位疫苗。因此，B细胞表位具有良好和广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN104312979B
公开(公告)日：2017-09-29
申请号：CN201410519544.9
申请日：2014-09-30
Applicant: 江苏省农业科学院 , 江苏立华牧业股份有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及一种抗H7亚型禽流感病毒单克隆抗体及其应用，属于生物技术领域。本发明筛选出一株杂交瘤细胞株5D2，用其制备的鼠腹水抗体对H7‑AIV的血凝抑制（HI）效价为11 log2，ELISA效价为2×105。本发明的杂交瘤细胞株分泌的抗H7‑AIV单克隆抗体，HI和ELISA效价高，用其组装成的胶体金免疫层析检测试纸条特异性强，除H7‑AIV显示阳性结果外，禽的其它病毒均为阴性结果，可用于家禽或哺乳动物等感染H7‑AIV的现场诊断，10分钟内出结果，结果直观，肉眼即可容易做出判断。本发明的杂交瘤细胞株分泌抗体组装成的诊断试剂盒，保存一年后敏感性未降低，稳定性好。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104338127A
公开(公告)日：2015-02-11
申请号：CN201410529744.2
申请日：2014-10-09
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种H9N2亚型禽流感灭活疫苗的生产方法及其制品，属于H9N2亚型禽流感灭活疫苗的生产及应用领域。本发明公开了一种H9N2亚型禽流感灭活疫苗的生产方法，包括：(1)利用细胞工厂培养MDCK细胞；(2)接种H9N2亚型禽流感病毒，在细胞工厂中增殖病毒；其中，所述H9N2亚型禽流感病毒微生物保藏编号为：CGMCC No.9325；(3)收获病毒，制备灭活疫苗。免疫保护实验表明，本发明方法生产的H9N2亚型禽流感灭活疫苗保护率达100％，且各时间点细胞毒免疫组的抗体水平均比胚毒免疫组高，抗体水平上升也较快。本发明方法生产的病毒液能用于制备预防或治疗H9N2亚型禽流感药物或试剂。
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公开(公告)号：CN104312979A
公开(公告)日：2015-01-28
申请号：CN201410519544.9
申请日：2014-09-30
Applicant: 江苏省农业科学院 , 江苏立华牧业有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及一种抗H7亚型禽流感病毒单克隆抗体及其应用，属于生物技术领域。本发明筛选出一株杂交瘤细胞株5D2，用其制备的鼠腹水抗体对H7-AIV的血凝抑制（HI）效价为11log2，ELISA效价为2×105。本发明的杂交瘤细胞株分泌的抗H7-AIV单克隆抗体，HI和ELISA效价高，用其组装成的胶体金免疫层析检测试纸条特异性强，除H7-AIV显示阳性结果外，禽的其它病毒均为阴性结果，可用于家禽或哺乳动物等感染H7-AIV的现场诊断，10分钟内出结果，结果直观，肉眼即可容易做出判断。本发明的杂交瘤细胞株分泌抗体组装成的诊断试剂盒，保存一年后敏感性未降低，稳定性好。
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公开(公告)号：CN102174444B
公开(公告)日：2012-09-12
申请号：CN201110047388.7
申请日：2011-02-28
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N1/20 , A61K39/145 , A61K39/102
Abstract: 本发明涉及一种鸡胚同时增殖H9亚型禽流感病毒及禽巴氏杆菌的方法，属于生物学领域，特别属于兽用生物制品领域。该方法包括以下步骤：先将H9亚型禽流感病毒尿囊液经稀释后尿囊腔接种鸡胚，37℃孵化一定时间后再次接种经稀释后的禽巴氏杆菌菌液，继续孵化至鸡胚死亡，收获含有H9亚型禽流感病毒及禽巴氏杆菌的尿囊液。本发明方法获得的同时含有H9亚型禽流感病毒及禽巴氏杆菌的尿囊液具有菌落含量较常规培养基培养高、病毒含量及HA与常规鸡胚繁殖相当，且操作简便，节约成本等优点，可用于相应兽用生物制品细菌和病毒联苗的研发和生产。
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公开(公告)号：CN118580314A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410855513.4
申请日：2024-06-28
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种用于检测2型鹅星状病毒的多肽及其编码基因和应用，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述的用于检测2型鹅星状病毒的多肽在制备2型鹅星状病毒疫苗中的应用。本发明所述的多肽对2型鹅星状病毒的特异性号，从而能够用于检测2型鹅星状病毒。该多肽分子量小，易于获得。应用该多肽作为抗原的检测方法避免了假阳性、重复性不好、干扰因素多的缺点，能够对2型鹅星状病毒进行检测，特异性好。
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公开(公告)号：CN115894638A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202210987699.X
申请日：2022-08-17
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C07K14/18 , C12N15/40 , C12N15/81 , C12N1/19 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/532 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种重组鸭坦布苏病毒E蛋白结构域III蛋白的制备方法。本发明首先提供一株用于制备鸭坦布苏病毒E蛋白结构域III的毕赤酵母GS115菌株。该重组菌株是通过截取鸭坦布苏病毒囊膜蛋白EDIII抗原区域，经密码子优化获得鸭坦布苏病毒EDIII蛋白的编码序列，然后将其克隆到酵母表达载体pPIC9K上并转化到酵母宿主菌株GS115中。在甲醇的作用下，鸭坦布苏病毒EDIII蛋白获得高效表达。同时，将该蛋白作为包被抗原用于鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA诊断试剂盒，试剂盒具有较高的特异性、重复性及稳定性，可用于坦布苏病毒引起的相关疾病的诊断。
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